向芃
- 作品数：10 被引量：16H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金新疆维吾尔自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 激活蛋白激酶A信号对阿霉素肾病小鼠足细胞失分化的影响
- 2017年
- 目的·探讨体内激活蛋白激酶A(PKA)对阿霉素(ADR)肾病小鼠足细胞失分化以及蛋白尿的作用。方法·选择6~8周龄BALB/c雄性小鼠分为3组:ADR组予以ADR 10 mg/kg尾静脉注射构建ADR肾病小鼠模型,A+P组为ADR肾病小鼠予PKA信号激动剂p CPT-c AMP 50 mg/(kg·d)腹腔注射,对照组不做任何干预。蛋白电泳+考马斯蓝染色方法观察小鼠尿白蛋白变化,WT-1免疫组化染色观察足细胞数量,免疫荧光双染观察足细胞的损伤。结果·与对照组相比,ADR肾病小鼠尿白蛋白/肌酐比值显著升高,肾小球足细胞数量显著降低,足细胞特异性蛋白synaptopodin和podocalyxin表达明显下降,足细胞受损伤失分化标志蛋白desmin表达增多。p CPT-c AMP干预后ADR小鼠白蛋白/肌酐比值降低,WT-1阳性细胞和synaptopodin和podocalyxin表达增多,desmin表达减少。结论·p CPT-c AMP激活PKA信号后可减轻ADR肾病小鼠足细胞损伤,防止足细胞数量减少,减轻蛋白尿。其作用可能与p CPT-c AMP防止ADR肾病小鼠足细胞失分化相关。
- 姜金星向芃陈晓欢阿依加肯.卡司木马力谢可炜倪兆慧顾乐怡
- 关键词：蛋白激酶A足细胞失分化阿霉素
- 激活蛋白激酶A信号减轻阿霉素肾病小鼠白蛋白尿并促进肾小球壁层上皮细胞向足细胞分化
- <正>目的:近期研究发现壁层上皮细胞(the parietal epithelial cells,PECs)能在生理及病理情况下表达足细胞蛋白,具有再生足细胞的潜能。我们前期研究发现,腺苷酸环化酶(cAMP)激动剂For...
- 向芃
- 文献传递
- 足细胞的再生和增殖被引量：2
- 2014年
- 足细胞是肾小球蛋白质滤过屏障的关键细胞之一，细胞损伤临床上即表现为蛋白尿。足细胞是一种终末分化的细胞，通常不能再次进入细胞循环进行分裂增生。若足细胞数量因细胞脱落、坏死或凋亡而减少，邻近的细胞也不能通过细胞增殖来替代或修补。缺乏足细胞覆盖而裸露的基底膜即和包氏囊黏连，形成肾小球局灶节段性硬化。所以足细胞数量减少可能是最终导致肾小球球性硬化的一个关键的因素。
- 向芃顾乐怡
- 关键词：细胞增殖足细胞细胞数量局灶节段性肾小球
- 激活蛋白激酶A信号减轻阿霉素肾病小鼠白蛋白尿并促进肾小球壁层上皮细胞向足细胞分化
- 向芃
- 关键词：白蛋白尿足细胞
- 白芦藜醇通过Sirtuin1激活足细胞Notch1信号
- 目的:探索白芦藜醇是否影响足细胞中的Notch 1 信号通路及其可能的机制.方法:我们使用野生型(WT)和 CAGGS-col/TGM-SIRT1 hRNA(以下简称为CAGGS)小鼠足细胞系,第14-25 代分化的足细...
- 魏凯谢可炜向芃顾明颖倪兆慧顾乐怡
- 不同预处理方法对提取尿液脱落细胞mRNA质量的影响被引量：2
- 2016年
- 目的 探索合适的处理尿标本的方法获得尿脱落细胞mRNA。方法 比较尿液容量、尿液标本冻存时间、处理方式对提取尿液脱落细胞RNA的产量与质量的影响,并进行qPCR的试验。结果 40 ml尿液标本组及10 ml尿液标本组RNA总量均值分别为886.94±222.93 ng及211.22±62.01 ng,两组A260nm/A280nm比值分别为1.80±0.10和1.77±0.09; 尿液标本量与RNA总量相关（t=3.604,P=0.002）,不同尿液标本量RNA质量差异无统计学意义（t=0.708,P值〉0.05）。实时离心提取及冰冻保存尿液7天后提取两种预处理方法RNA总量分别为886.94±945.84 ng及881.50±829.02 ng,A260nm/A280nm比值分别为1.80±0.10及1.80±0.87; RNA总量与A260nm/A280nm比值差异无统计学意义（t=-0.221-0.085,P值均〉0.05）。直接冰冻尿液标本与TRIzol保存沉渣细胞两种预处理方法RNA总量分别为637.81±525.24 ng及639.86±535.42 ng,A260nm/A280nm比值分别为1.84±0.13及1.83±0.96; RNA总量与A260nm/A280nm比值差异无统计学意义（t=-0.47-0.293,P值均〉0.05）。尿脱落细胞mRNA中可以检测到足细胞的标记蛋白WT-1,podocin和synaptopodin的基因表达。结论 尿液标本量是提取脱落细胞RNA量的关键因素,-80℃低温冻存尿标本7天或Trizol预处理冻存均对提取尿液沉渣细胞RNA数量和质量无影响。
- 王洁敏向芃顾乐怡
- 关键词：慢性肾脏病尿液脱落细胞MRNA足细胞
- 白藜芦醇通过Sirtuin1激活足细胞Notch1信号被引量：1
- 2015年
- 目的探索白藜芦醇是否影响足细胞中的Notch1信号通路及其可能的机制。方法分别使用RNA干扰（RNAi）技术和盐酸多西环素（doxycycline，Dox）诱导野生型（WT）和可诱导的Sirtuin1（SIRT1）短发夹RNA（shRNA）转基因（CAGGS）足细胞SIRT1表达下降，重组小鼠Notch信号的Delta配体4（Delta—like ligand4，DLL4）诱导激活Notch1通路。实时荧光定量PCR法检测SIRT1、Notch1通路关键γ分泌酶mRNA及Notch1靶基因Hesl、Hey2的表达。Western印迹法检测足细胞内Notch1胞内段结构域（intracellular domain of Notch1，ICD1）、SIRT1、解聚素金属蛋白酶（ADAM）10以及γ分泌酶复合物Presenilin1和Nicastrin的表达。结果白藜芦醇剂量依赖地诱导野生型小鼠足细胞Notch1信号胞内段ICDl表达以及下游产物Hesl和Hey2 mRNA表达增高。白藜芦醇可诱导Notch1蛋白水解酶1分泌酶组分Nicastrin的mRNA和蛋白表达上升以及ADAM10蛋白的表达下降（P〈0．05），而这些变化在使用SIRTIRNAi后均被减弱（P〈0．05）。重组小鼠DLL4可以增加Notch1通路靶基因Hes1和Hey2的mRNA水平，同时增加细胞核内ICD1的表达，盐酸多西环素孵育CAGGS足细胞显著降低SIRT1mRNA水平（P〈0．05），48h后SIRT1蛋白表达明显下降（P〈0．05），并且显著减弱DLIA的作用（P〈0．05）。结论白藜芦醇可以通过高表达分泌酶Nicastrin诱导足细胞中Notch1信号活化，SIRT1介导了白藜芦醇和DLL4诱导Notch1信号活化的作用。
- 谢可炜魏凯顾明颖向芃顾乐怡
- 关键词：足细胞受体NOTCHLSIRTUINΓ-分泌酶
- 蛋白激酶A部分通过环磷腺苷效应元件结合蛋白信号防止足细胞凋亡被引量：2
- 2016年
- 目的 探讨转录因子环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）在蛋白激酶A（PKA）信号防止足细胞损伤中的作用。方法 使用条件永恒的小鼠足细胞株（5P12）14~25代分化的足细胞进行研究,细胞分为对照组、阿霉素（ADR）处理组（ADR组）和PKA特异性激动剂（pCPT-cAMP）预孵育＋ADR刺激组（pCPT-cAMP＋ADR组）。CCK-8法检测细胞毒性;Western blotting检测足细胞内被切割的半胱氨酸蛋白酶-3（cleaved caspase-3）表达;siRNA抑制细胞内CREB表达,免疫荧光共聚焦显微镜和Western blotting检测磷酸化CREB（p-CREB）的定位和表达。结果 ADR诱导足细胞内cleaved caspase-3表达升高,pCPT-cAMP预孵育可显著降低ADR诱导的cleaved caspase-3表达上升。ADR使足细胞减少为原来的（40.45±6.78）%,pCPT-cAMP预孵育使细胞数量恢复为原来的（69.8±5.48）%。Western blotting检测结果显示：pCPT-cAMP分别预孵育5、15 min可使足细胞总蛋白中p-CREB表达分别上升（105.64±38.21）%和（98.61±41.03）%,细胞核内p-CREB的表达上升（114.52±11.28）%和（118.84±14.44）%。免疫荧光共聚焦显微镜检测显示pCPT-cAMP主要引起细胞核内p-CREB表达上升。siRNA可使足细胞CREB蛋白表达下降为原来的（25.1±2.44）%,且pCPT-cAMP预孵育不能防止ADR诱导的cleaved caspase-3表达升高。结论 转录因子CREB介导了PKA信号对足细胞的保护作用。
- 向芃谢可炜姜金星倪兆慧顾乐怡
- 关键词：足细胞环磷酸腺苷蛋白激酶A
- 初始保守治疗的特发性膜性肾病患者的临床调查和短期蛋白尿预后分析被引量：9
- 2015年
- 目的：了解特发性膜性肾病（idiopathic membranous nephropathy,IMN）初始保守治疗的患者临床和病理特点,并观察12个月蛋白尿的变化及其相关危险因素。方法：我们回顾分析了2004年5月~2012年9月在我院诊断为IMN并完成至少12个月随访的患者的临床和病理资料。所有患者分为初始免疫抑制治疗组（IIT组）和初始保守治疗组（CT组）。其中CT组患者中,随访期间维持保守治疗者分为A组,加用免疫抑制治疗者为B组。结果：共139例IMN患者完成了12个月随访,其中CT组的患者56例（40.29%）。和IIT组患者比较,CT组患者年龄和血浆白蛋白较高,24 h尿蛋白定量和血胆固醇水平更低,P值均〈0.001。病理中肾小球C3沉积的水平更少,毛细血管袢和系膜细胞及基质增生程度较轻,肾小管间质病变程度更轻。随访12个月时两组患者的24 h尿蛋白分别是（2.07±2.88）vs（1.95±2.40）,P〉0.05。在56例初始保守治疗的患者中,37例在随访12个月内维持保守治疗（A组）,19例在随访至第2~9月时开始免疫抑制治疗（B组）。我们发现A组患者发病初期24 h尿蛋白水平,血总胆固醇水平更低,e GFR和白蛋白水平更高。病理中A组患者毛细血管袢增生程度更轻。随访12个月时,A组和B组患者的疾病完全和部分缓解率差异无统计学意义。多因素Logistic回归分析提示血胆固醇水平是初始保守治疗的膜性肾病患者12个月疾病是否缓解的独立危险因素。结论：对低危的IMN患者初始使用保守治疗,短期（12个月）不会导致蛋白尿加重。在初始保守治疗的患者中,血浆胆固醇水平是疾病12个月缓解的危险因素。
- 顾明颖向芃魏凯谢可炜倪兆慧顾乐怡
- 关键词：特发性膜性肾病蛋白尿免疫抑制治疗预后
- 激活蛋白激酶A信号减轻阿霉素肾病小鼠白蛋白尿并促进肾小球壁层上皮细胞向足细胞分化
- 向芃
