张男
- 作品数：7 被引量：7H指数：1
- 供职机构：锦州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 老年骨性关节炎358例非手术治疗研究
- 2002年
- 目的 通过对老年骨性关节炎非手术治疗现状的调查研究 ,为提高对此病的诊疗水平提供依据。 方法 对就诊的原发性骨性关节炎 35 8例患者进行研究 ,评价治疗方式及疗效。 结果 治疗方式很多 ,主要以药物治疗为主 ,辅以体育锻炼及休息、物理疗法等。疗效不一。 结论 增强对该病的认识是提高疗效的前提 ,完善具体治疗方法、增加医生指导。
- 曹阳王伟刘久仁张男
- 关键词：骨性关节炎疗效老年人
- 体外状态下新西兰白兔骨髓中CFU-F集落及成骨性CFU-F集落数量观察被引量：1
- 2003年
- 目的 观察体外状态下新西兰白兔骨髓中成纤维细胞集落形成单位 (CFU F)及成骨性的CFU F集落数量 ,为探讨骨髓的成骨能力提供实验依据。方法 将实验动物分为幼年组 (6个月～ 1岁 )、壮年组 (2 5～ 3 2岁 )两组 ,在无菌状态下 ,在每只动物的股骨上穿刺点抽取骨髓 0 8ml,每个培养瓶 (2 5ml)接种含 8× 10 5个有核细胞的骨髓量 ,在体外培养 12d时计数CFU F集落数量。计数后将培养瓶中CFU F集落进行ALP染色 ,在肉眼下计数着色的CFU F集落 (即成骨性CFU F集落 )数量。结果 按照集落着色的深浅 ,本研究把CFU F集落分为 3种 :①强阳性集落 ;②弱阳性集落 ;③阴性集落。两组成骨性CFU F集落数量约占CFU F集落总数的 1 4 ,主要为弱阳性集落 ,占成骨性CFU F集落的 70 %～ 80 % ;幼年组与壮年组强阳性集落分别占CFU F集落总数的 1 13和 1 17,幼年组明显高于壮年组 ,两组差异有显著性 (P <0 0 5 )。由于每个CFU F集落均来源于一个骨髓基质干细胞 ,通过集落形成率可推算出新西兰白兔骨髓中每 110 0 0～ 130 0 0个有核细胞中有一个骨髓基质干细胞 ,后者仅占骨髓细胞的百万分之一。结论 骨髓中骨髓基质干细胞数量极少 ,成骨性骨髓基质干细胞就更少了 ,但就骨髓细胞总量来说骨髓中骨髓基质干细胞也是相当可观的。
- 刘丹平栗刚关振家胡蕴玉郭韬张男
- 关键词：白兔骨髓CFU-F
- 狗骨髓基质细胞的分离培养及成骨潜能的研究
- 2006年
- 目的 观察狗骨髓基质细胞（MSCs）的生长特点及诱导条件下的成骨能力，为利用狗的MSCs进行成骨研究提供实验基础。方法 从成年狗胫骨取骨髓进行MSCs培养，检测细胞周期；应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法观察细胞增殖；测定碱性磷酸酶活性；用Von Kossa染色法观察钙化结节。观察在条件培养液中MSCs生长及成骨分化情况。结果 MSCs增殖能力强，细胞周期显示有20％的细胞处于G0／G1期。诱导条件下的细胞碱性磷酸酶活性明显增高，10～12d达到高峰，并出现钙化结节。结论 体外培养狗的MSCs具有分化成骨的潜能，增殖能力强，可作为骨组织工程的种子细胞。
- 李晖刘丹平袁红霞张男赵卫华
- 关键词：骨髓细胞骨生成细胞培养成骨潜能种子细胞
- srhBMP2m、Dex对体外状态下新西兰白兔MSC增殖的影响
- 2003年
- 目的 观察可溶性重组人骨形态发生蛋白2成熟肽(srhBMP2m)和地塞米松(Dex)对体外状态下新西兰白兔骨髓基质细胞(MSC)增殖的影响。方法 经过12d原代培养后将MSC传代再培养5d，用胰蛋白酶消化后将其定量(2×10^3个／孔)接种于96孔板中，按实验要求分别加入不同浓度的上述两种因子，分别在第7天和第3天用MTT法和^3H—TdR掺入法检测细胞的增殖情况。结果 MTT法检测当srhBMP2m浓度≥1200ng／ml时抑制MSC增殖(P<0．05或P<0．01)；^3H—TdR掺入法检测当srhBMP2m的浓度超过1600ng／ml时方才显示对MSC增殖的抑制作用(P<0．05)；两种检测方法均显示当Dex浓度≥10^-7M时明显抑制MSC增殖(P<0．05或P<0．01)。结论 体外状态下高浓度的srhBMP2m和Dex明显抑制MSC增殖，本研究为应用两种因子刺激MSC成骨提供了实验资料。
- 刘丹平栗刚蒲勤郑振家胡蕴玉张男郭韬
- 关键词：DEX新西兰白兔MSC地塞米松骨髓基质细胞细胞增殖
- 腺病毒穿梭质粒pShuttleCMV-BMP2^+-IRES-hrGFP-1的构建和鉴定被引量：5
- 2005年
- 目的 构建腺病毒穿梭质粒pShuttleCMV -BMP2 + -IRES -hrGFP - 1,为构建表达具有抗原表位标记的骨形态发生蛋白2 (bonemorphogeneticprotein 2 ,BMP - 2 ) ,并同时表达绿色荧光蛋白(greenfluorescentpro tein ,GFP)报告分子的腺病毒真核细胞表达载体打下基础。方法 对目的基因供体质粒pcDNA3-BMP2携带的BMP2基因测序和序列内部存在的限制性内切酶识别位点进行分析,利用PCR (polymeraschainreaction ,PCR)技术对pcDNA3-BMP2携带的BMP2基因突变,以去除翻译终止密码子后的基因序列并添加新的酶切识别位点XhoⅠ。测序检测突变情况,将突变后的BMP2基因(BMP2 + 基因)定向连入腺病毒穿梭质粒pShuttleCMV -IRES -hrGFP - 1,通过限制性内切酶酶切图谱分析鉴定获得的重组质粒。结果 重组质粒经双酶切鉴定图谱正确。结论 成功构建了pShuttleCMV BMP2 + IRES hrGFP -1。
- 张正刘丹平蒲勤郭韬张男
- 体外培养状态下新西兰白兔MSC的传代增殖特性
- 2003年
- 目的 观察体外状态下新西兰白兔骨髓基质细胞 (MSC)的传代增殖特性 ,评价其体外生存能力。方法抽取新西兰白兔股骨骨髓行 1 2天原代培养后再行传代培养 8代 ,用细胞计数法测定传第 1代、第 4代、第 8代MSC的增殖情况 ,绘制生长曲线。本研究还检测了传 1代的MSC的分裂指数和细胞贴壁率。结果 传 1代MSC的生长曲线与传 4代、传 8代MSC的生长曲线基本一致 ,其生长曲线显示在接种后的第 2个～第 5个 2 4h (共 4天 )细胞增殖是呈对数生长状态 ,此时的群体倍增时间是 30 87h。培养第 7天以后细胞基本停止生长。细胞的分裂指数在传代的第 2个、第 3个 2 4h增长最快 ,第 4个 2 4h达到高峰 (2 3 8% ) ,在第 9个 2 4h细胞已处于汇合状态 ,基本停止分裂。传 1代MSC细胞贴壁率在传代后第 2h、第 8h、第 1 0h分别为 2 8 5 %、 85 0 %、92 5 % ,此后贴壁率上升趋于停止 ,表明细胞贴壁主要发生在传代后 1 0h以内。结论 新西兰白兔MSC是一种在体外状态下生长旺盛 ,生存能力较强 。
- 刘丹平栗刚张德志关振家胡蕴玉郭韬张男
- 关键词：骨髓基质细胞新西兰白兔原代培养
- hBMP2转基因载体的构建及其在兔骨髓基质细胞中的表达被引量：1
- 2006年
- 目的构建hBMP2真核表达载体pcDNA3-hBMP2,将其转染兔骨髓基质细胞(Marrow Stromal Cells,MSCs)并检测其表达效率。方法将hBMP2的cDNA构建于真核表达载体pcDNA3,形成重组真核表达载体pcDNA3-hBMP2,酶切鉴定后体外转染培养状态下的兔骨髓基质细胞,用原位杂交和免疫组织化学方法鉴定表达情况并用计算机图像分析系统测定其表达效率。结果pcDNA3-hBMP2载体酶切鉴定与预期片段相符,表明成功构建了pcDNA3-hBMP2转基因载体。用该载体转染兔骨髓基质细胞后获得了瞬时表达和稳定表达。结论载体pcDNA3-hBMP2可以在骨髓基质细胞中表达,为下一步将其用于转基因骨组织工程研究奠定基础。
- 陈峻江刘丹平崔大祥王伟张正郭韬张男
- 关键词：HBMP2转染骨髓基质细胞
