张海丽
- 作品数：10 被引量：21H指数：4
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家现代农业产业技术体系建设项目国家奶牛产业技术体系项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 牛型分支杆菌CFP-10基因的原核表达及其表达产物的变态反应原性鉴定
- 为验证经原核表达方式获得的重组蛋白r CFP-10是否具有迟发型变态反应性和作为牛结核新型皮试诊断抗原的潜力,以牛型分支杆菌基因组为模板,PCR扩增获得CFP-10基因,连入pET32a(+)载体,获得了重组质粒p ET...
- 刘洪涛宋林张海丽尹尧邵建伟高明春王君伟
- 关键词：CFP-10迟发型变态反应牛结核病原核表达
- 文献传递
- 牛肠道病毒的分离鉴定及HLJ-3531株感染性分子克隆的建立
- 牛肠道病毒属于小RNA病毒科肠道病毒属成员，为单股正链RNA病毒。病毒粒子无囊膜，为二十面体球形结构，粒子直径约为25～30nm，基因组长度约为7500bp。2011年第9次国际病毒分类委员会分类报告将牛肠道病毒分类为E...
- 张海丽
- 关键词：感染性克隆
- 牛分枝杆菌CFP-10基因的原核表达及其表达产物的变态反应原性的鉴定
- 2014年
- 以牛分枝杆菌基因组为模板,PCR扩增获得CFP-10基因,并连入pET-32a(+)载体,获得了重组质粒pET-32a-CFP-10。将重组质粒转入宿主菌大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导后,重组蛋白rCFP-10以可溶形式表达并被纯化,将rCFP-10在致敏豚鼠皮内做迟发型变态反应(DTH)检测,并以PPD作为阳性对照。结果显示,测得rCFP-10组豚鼠皮肤红斑直径平均值为10mm,接近于PPD组(13mm)。结果证明,以pET-32a(+)为载体进行原核表达,获得的重组蛋白rCFP-10依然具有较强的迟发型变态反应原性,同时也证明了CFP-10具有作为皮试诊断试剂抗原的潜力,这一结果为牛结核病新型DTH皮试诊断的研究奠定了基础。
- 刘洪涛宋林张海丽尹尧邵建伟高明春王君伟
- 关键词：CFP-10迟发型变态反应牛结核病原核表达
- 牛肠道病毒3D抗体与感染相关性研究
- 2018年
- 为了研究感染牛肠道病毒后非结构蛋白3D的抗体消长规律,试验从牛肠道病毒HLJ-3531株中扩增3D基因,将其克隆至表达载体pET-30a并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达,以Ni-NTA柱亲和层析法纯化得到的重组3D蛋白为抗原制备3D多克隆抗体,随后建立3D-ELISA方法用于检测HLJ-3531毒株感染小鼠后的3D抗体消长规律,同时用RT-PCR方法检测感染时期小鼠体内病毒核酸。结果表明:RT-PCR技术可检测出病毒出现的时间范围与3D抗体存在的时间范围符合性良好。说明3D-ELISA配合核酸检测方法有很高的概率检测出病毒感染活动期动物。
- 周萍萍张海丽安东廉乐乐李嘉高明春王君伟
- 关键词：原核表达抗体消长规律核酸检测
- 牛Ⅲ型干扰素的酵母分泌表达及其抗病毒活性研究
- 1.引言Ⅲ型干扰素(Interferon)又称为IFN-λs或IL-28s,是有别于Ⅰ型和Ⅱ型的干扰素新家族成员,同样具有抗病毒、抗肿瘤及免疫调节等作用。IFN-λs对经由呼吸道、消化道传播的奶牛病毒性传染病如口蹄疫(F...
- 郭永丽张润祥华云嫣张海丽高明春王君伟
- 一株牛肠道病毒的分离与鉴定
- 本研究从山西某奶牛场的泌乳奶牛粪便样品中分离得到一株牛肠道病毒(BEV),命名为HLJ-3531/2013.理化特性鉴定结果表明,该病毒粒子呈典型小RNA 病毒粒子形态,直径为25～30nm,无囊膜;该病毒在PH3-9时...
- 张海丽周萍萍高明春王君伟
- 关键词：理化特性
- 文献传递
- 一株牛肠道病毒的分离与鉴定被引量：7
- 2015年
- 本研究从山西某奶牛场的泌乳奶牛粪便样品中分离得到一株牛肠道病毒（BEV），命名为HLJ-3531／2013。理化特性鉴定结果表明，该病毒粒子呈典型小1KNA病毒粒子形态，直径为25～30nm，无囊膜；该病毒在pH3～9时稳定，对氯仿、乙醚、胰酶等均有一定的抗性，但50℃可迅速被破坏，1mol／LMgSO4能显著提高该病毒对热的抵抗力。采用随机引物通过RT—PCIK扩增获得病毒部分VP2及VP4蛋白编码区的DNA片段，序列分析结果表明，其核苷酸序列与GenBank登录的参考病毒株核苷酸序列同源性为65．0％－79．2％，其中与德国分离株D3／98株同源性最高，为79．2％。进化树分析其可能为EV—E种群中新的基因型。此前中国已分离得到的三株牛肠道病毒均为EV-F，该病毒株与中国已分离株分属于不同的血清型。
- 张海丽周萍萍高明春王君伟
- 关键词：理化特性
- 牛病毒性腹泻病毒基因Ⅱ型HLJ-10分离株全基因组克隆及其序列特征分析被引量：4
- 2012年
- 为研究牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的分子特征,本研究参考GenBank中登录的BVDV基因Ⅱ型病毒株全基因组序列,设计多对引物,通过RT-PCR方法,对一株分离自某商品化血清中的BVDV分离株HLJ-10全基因组进行分段克隆及序列测定,获得了该分离株的全基因组序列。生物信息学分析表明,该分离株为BVDV基因Ⅱ型,全长12 284 nt,编码区为11 694 nt,共编码3 897个氨基酸,5'和3'非编码区分别为385 nt和205 nt。与其它BVDV参考株序列比对分析表明,HLJ-10与SH-28和KZ91CP进化关系较密切,预测该分离株含有22个潜在糖基化位点,氨基酸差异性分析表明E2蛋白的氨基酸序列在瘟病毒属中变异性较大。
- 刘华付培芬李岩温凯贾莹刘晓玫张海丽商云鹏高明春马波张文龙王君伟
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒基因组
- 牛III型干扰素的酵母分泌表达及其抗病毒活性研究
- Ⅲ型干扰素(Interferon)又称为IFN-λs或IL-28s,是有别于Ⅰ型和Ⅱ型的干扰素新家族成员,同样具有抗病毒、抗肿瘤及免疫调节等作用.IFN-λs对经由呼吸道、消化道传播的奶牛病毒性传染病如口蹄疫(FMD)、...
- 郭永丽张润祥华云嫣张海丽高明春王君伟
- 关键词：酵母表达抗病毒活性
- 文献传递
- 东北地区规模化奶牛场牛病毒性腹泻/黏膜病血清学调查被引量：6
- 2013年
- 为了解东北地区牛病毒性腹泻/黏膜病病毒(BVDV)的流行情况,本研究采用间接ELISA试验与套式RT-PCR分型检测方法对东北地区19个规模化奶牛场的1 198份血清进行了BVDV的抗体与核酸检测。结果表明,BVDV在东北地区呈散发性流行,抗体阳性率为23.5%,各奶牛场抗体阳性率在0～40%之间;BVDV核酸阳性的奶牛场均包括在抗体阳性的奶牛场中,并且均为BVDV I型。结果提示,东北地区大部分奶牛场中存在BVDV污染,并且可能存在有持续性感染牛,应采取相应的净化措施对该病进行控制。
- 商云鹏刘华张海丽高明春张文龙王君伟
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒间接ELISART-PCR血清学调查
