黄小洁
- 作品数：43 被引量：52H指数：4
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金农业部农业行业标准制定和修订项目国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学经济管理更多>>
- 鸭瘟病毒UL56基因3’端缺失和LORF5基因缺失突变株及其构建方法与应用
- 本发明涉及鸭瘟病毒UL56基因3’端缺失和LORF5基因缺失突变株及其构建方法与应用，本发明提供一种UL56基因3’端缺失和LORF5基因缺失的重组鸭瘟病毒毒株，该毒株具有减弱的毒力，对鸭无致病性，且具有良好的免疫原性，...
- 杨承槐毛娅卿刘丹侯力丹黄小洁李俊平李启红王乐元
- 产气荚膜梭菌ε毒素研究进展被引量：3
- 2021年
- 产气荚膜梭菌是一种重要的人畜共患细菌性传染病病原,在自然界中分布极广,一定条件下可引起多种疾病。该菌常通过其外毒素危害人和动物机体,所产毒素主要有α、β、ε和ι4种外毒素。根据毒素产生的情况,将产气荚膜梭菌分为A、B、C、D、E、F和G 7个型。ε毒素毒力最强,主要由B型和D型菌分泌。论文通过致病机理、病理变化、流行特点及相关疫苗研究方面对产气荚膜梭菌ε毒素研究进展进行综述,以期为产气荚膜梭菌病的防控提供参考。
- 朱真郭鑫杜吉革李启红黄小洁李倩琳印春生陈小云
- 关键词：产气荚膜梭菌致病特点
- 细胞源猪瘟活疫苗E2基因遗传稳定性和免疫原性分析
- 2023年
- 测定了中国4个细胞源猪瘟活疫苗(C株)E2基因全序列,将其与GenBank上13个猪瘟病毒的E2基因序列(含C株原始毒株、7个猪瘟病毒C株以及国际上5个主要猪瘟活疫苗毒株的E2基因全序列)进行了核苷酸序列、推导的氨基酸序列进行遗传变异分析,通过生物信息学手段对预测的E2蛋白N-糖基化位点、E2蛋白磷酸化位点和理化特性以及模拟的蛋白空间结构进行了比较,并通过免疫攻毒试验对4个细胞源猪瘟疫苗(C株)的免疫效果进行了验证。结果表明,与猪瘟病毒C株原始种毒相比,尽管中国4个细胞源猪瘟活疫苗的E2基因核苷酸序列、推导的E2蛋白氨基酸序列或模拟的三维结构等发生个别核苷酸变异、个别氨基酸位点突变或缺失,但均不影响猪瘟C株的免疫原性,猪瘟疫苗C株仍然是防控猪瘟的最有效武器。
- 吴华伟陈晓春黄小洁刘丹邓永秦义娴高金源薛青红孙淼陈建陈延飞
- 关键词：猪瘟细胞源活疫苗E2基因同源性免疫原性
- 一种副流感病毒5型TaqMan荧光定量RT-PCR检测试剂盒
- 本发明涉及一种副流感病毒5型的TaqMan荧光定量RT‑PCR检测试剂盒，所述试剂盒含有用于检测副流感病毒5型的一对特异性引物和TaqMan探针。本发明的试剂盒检测结果特异性好，PIV5扩增曲线良好，其他兽用病毒生物制品...
- 吴华伟刘丹秦义娴陈晓春高金源孔冬妮高月异黄小洁
- 文献传递
- 禽网状内皮组织增生症病毒MD-2株感染性克隆的构建与突变分析被引量：1
- 2020年
- 为构建禽网状内皮组织增生症病毒(REV)MD-2株的感染性克隆,将MD-2株的前病毒基因组全长克隆至pMD18-T Simple载体中构建MD-2全长质粒,经转染CEF细胞后进行病毒拯救及鉴定,并对拯救病毒进行了生物学特性研究。结果表明,成功构建了MD-2全长质粒,拯救病毒感染CEF细胞后用间接免疫荧光试验检测到病毒抗原;拯救病毒的生长特性与亲本病毒相比无明显差异。随后对env基因进行了多个位点的定点突变,并拯救出相应的突变株,结果显示env基因第1433位碱基突变后不能拯救出病毒,推断1433位的突变为致死性突变。MD-2株感染性克隆的构建和病毒拯救的研究为继续研究REV基因和蛋白功能提供了技术支持。
- 黄小洁孔冬妮刘丹陈晓春杨飞侯力丹李俊平
- 关键词：禽网状内皮组织增生症病毒感染性克隆突变
- 应用多重Digoxigenin标记探针在核酸斑点杂交检测中识别Ⅰ群禽腺病毒的感染被引量：1
- 2020年
- 禽腺病毒(fowl adenovirus,FAdV)是鸡群中常见的免疫抑制性病毒,其中Ⅰ群FAdV有12个血清型(FAdV1-8a,8b-FAdV11),这为Ⅰ群FAdV检测带来了挑战。为开发一种可以同时检测Ⅰ群FAdV的Digoxigenin标记核酸探针或者其组合,本研究针对Ⅰ群FAdV的hexon基因保守区域设计引物,分别以12个血清型的Ⅰ群FAdV参考毒株DNA为模板合成了12种Digoxigenin标记核酸探针,并将这12种核酸探针及其组合形成的多重探针共13种探针分别与同一杂交膜上的12种不同血清型Ⅰ群FAdV参考毒株的毒株核酸进行杂交,观察各探针或其组合能够识别的最大限度。结果显示,12种血清型对应的单一核酸探针能检测和识别的病毒类型及其灵敏度差异较大,而多重探针组合PM可以同时检测出所有12种血清型毒株并体现出最高灵敏度的优势。本研究建立了应用多重Digoxigenin标记探针组合在核酸斑点杂交检测中识别Ⅰ群FAdV核酸的新方法,为解决类似病毒高通量检测提供了新的思路。
- 侯力丹张亚文苏奇刘丹刘丹毛娅卿王嘉黄小洁赵鹏李俊平
- 关键词：DIGOXIGENIN核酸斑点杂交
- 鸡产蛋下降综合征病毒间接免疫荧光检测方法的建立及应用
- 2024年
- 为建立检测鸡产蛋下降综合征病毒(EDSV)的间接免疫荧光方法,并对该检测方法的各个步骤进行优化,以鸡产蛋下降综合征病毒多抗血清和FITC标记的兔抗鸡IgG为组合,对一抗和二抗的最适工作浓度和孵育时间进行了优化,对IFA方法进行了敏感性、特异性和重复性试验。结果表明,检测接种EDSV的96孔细胞培养板时,多抗血清的最适工作浓度为1∶320,孵育时间为45 min;FITC标记的兔抗鸡IgG的最适工作浓度为1∶200,孵育时间为30 min;病毒敏感性试验表明,该方法可以检测到10-2 TCID 50/mL的病毒;多抗血清敏感度试验表明,当多抗血清稀释到1∶1280时仍可见较明显的特异性荧光;特异性试验表明,该方法只针对EDSV,而不与禽副流感病毒4型、鸡新城疫病毒等其他病原反应;批内重复性试验和批间重复性试验结果表明,该方法具有较好的重复性和可靠性。结果表明,建立的间接免疫荧光方法具有较高的灵敏度和较好的稳定性,可为我国禽源性生物材料EDSV的检测提供技术支持,有巨大的市场需求。
- 孔冬妮王嘉邓永翟天舒刘丹黄小洁薛琪候力丹吴华伟薛青红李俊平毛娅卿
- 关键词：间接免疫荧光
- 高效液相色谱法测定奶牛乳汁中恩诺沙星与环丙沙星残留量被引量：5
- 2010年
- 恩诺沙星又名乙基环丙沙星,是第三代氟喹诺酮类抗菌药,为动物专用;在临床上诸多恩诺沙星类产品被广泛应用于奶牛乳房炎的治疗。但食品动物中的药物残留会对消费者的健康造成危害，并且长期用药会产生耐药菌株，从而影响该类药物的临床疗效，国家农业部235号公告规定恩诺沙星（恩诺沙星的主要活性代谢产物为环丙沙星）在牛奶中的最高残留限量（MRL）量不得超过100μg/L。
- 欧阳迪勇黄小洁
- 关键词：恩诺沙星环丙沙星高效液相色谱法奶牛乳汁
- 一种马立克氏病病毒血清1型荧光定量PCR试剂盒及其应用
- 本发明涉及一种检测马立克氏病病毒血清1型毒株的荧光定量PCR试剂盒及其在禽用生物制品质量控制中的应用。所述试剂盒含有用于检测马立克氏病病毒血清1型毒株的一对特异性引物和相应的Taqman探针。本发明用于检测马立克氏病病毒...
- 陈晓春苏佳赵炜吴华伟黄小洁曹明慧邓永孔冬妮薛青红
- 文献传递
- 运用实时荧光定量PCR法检测感染鸡种蛋中的REV被引量：1
- 2017年
- 为研究通过种蛋检测的方法监测SPF鸡群REV感染情况,运用已建立的荧光定量PCR方法检测攻毒母鸡种蛋中REV,并与血清REV水平进行比较。人工感染12月龄母鸡,从种蛋中提取蛋清,接种正常鸡胚成纤维细胞后传代一次,之后石蜡密封孵化至9日龄制成鸡胚成纤维细胞(CEF),运用荧光定量PCR方法检测蛋清,并和血清的检测结果进行比较,结果显示:83份蛋清,3份阳性样品分别收集自攻毒后的第8、11、14天;46份CEF,2份阳性样品分别收集自攻毒后的第11天和第14天,阳性的蛋清和CEF呈对应关系,说明两种方法的检测结果一致。攻毒后的6~15 d是病毒血症持续期,阳性鸡蛋均采集自这段时间,表明通过种蛋REV检测能反映SPF鸡的急性感染状态。本研究为通过种蛋抗原检测从而监测SPF鸡REV感染奠定基础。
- 黄小洁杨承槐刘丹侯力丹李慧姣李俊平陈晓春
- 关键词：网状内皮组织增生症病毒蛋清鸡胚成纤维细胞
