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与幽门螺杆菌CagA相互作用的胃黏膜蛋白筛选及二者相互作用的功能研究: 幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp），全球约一半人口感染，我国人群感染率更是高居不下。Hp感染与人类慢性活动性胃炎、消化性溃疡、胃癌和黏膜相关淋巴组织淋巴瘤（MALT）的发生密切相关。该菌已被明确列...; 张晓艳; 关键词：幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白酵母双杂交技术

基于网络药理学探讨槲皮素治疗肺癌的分子作用机制被引量：1: 2022年; 目的探讨槲皮素治疗肺癌(LC)的作用靶点及分子作用机制。方法利用TCMSP和SwissTargetPrediction数据库获得槲皮素相关靶点,利用GeneCards和OMIM数据库获得LC相关靶点,借助在线Venn网站得到槲皮素与LC交集靶点,通过STRING数据库构建PPI网络后导入Cytoscape 3.7.2软件得到槲皮素治疗LC的核心靶点,使用DAVID数据库进行基因本体(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果共筛选出101个槲皮素治疗LC的作用靶点,其中槲皮素治疗LC的潜在核心靶点有23个,包括TP53、AKT1、EGFR、CASP3和VEGFA等;GO富集分析共得到880个条目,包括695个生物过程,64个细胞组成,121个分子功能;KEGG通路富集分析共得到156条通路,包括PI3K-AKT信号通路、MAPK信号通路以及microRNAs在癌症中的调控等。结论槲皮素可能通过TP53、AKT1、EGFR、CASP3和VEGFA等核心靶点介导PI3K-AKT、MAPK等信号通路及参与microRNAs调控发挥对LC的治疗作用。; 吴程谢李华郑晨华林任玺林伟彬张晓艳; 关键词：网络药理学槲皮素肺癌分子作用机制

蛇毒金属蛋白酶抑制剂基因的合成及杆状病毒表达载体的构建被引量：11: 2006年; 研究蛇毒金属蛋白酶抑制剂(BJ46a)基因的合成及杆状病毒表达载体的构建。根据GenBank中查找的BJ46a基因序列(AF294836),将其分为20个片段,通过缓慢退火PCR法使之拼接为完整的BJ46a基因,经SacⅠ及XhoⅠ双酶切后定向克隆到载体pET-42a(+)中,PCR扩增、酶切及测序鉴定;根据测序结果用定点突变法逐一改正错误位点。随后将该基因插入到转座载体pFastBac HT C的MCS中,转化大肠杆菌DH5-αT1,以LB/AP平板筛选阳性重组子,PCR扩增、酶切鉴定,提取pFastBac HT C-BJ46a重组体进一步转化DH10Bac感受态细胞,48h后通过蓝白筛选,挑取单个白色菌落划线,证实所得菌落均为白斑,挑克隆PCR鉴定。结果表明成功构建杆状病毒重组转座载体、重组穿梭载体。含BJ46a基因的重组杆状病毒感染Sf 9昆虫细胞,获得目的蛋白的表达。BJ46a基因的合成及杆状病毒表达载体的成功构建,为进一步研究其生物学功能奠定了坚实的基础。; 徐剑文林建银林旭齐元麟张晓艳; 关键词：基因合成基因克隆基因突变

蛇毒cystatin在Bac to Bac杆状病毒表达系统的表达与鉴定: 2006年; 目的探讨蛇毒cystatin在Bac to Bac杆状病毒表达系统中的表达。方法PCR扩增蛇毒cystatin基因,将其克隆到pFastBacHTc中,通过转化E.coliDH10Bac筛选克隆,抽提重组Bacmid/cystatin,后者经Cell-fectin介导转染Sf9细胞,获取重组病毒,扩增病毒并感染Sf9细胞进行表达,SDS-PAGE、Western-blot分析鉴定表达蛋白66。结果获得重组cystatin的杆状病毒,Sf9细胞能表达出与蛇毒cystatin单抗、5×His单抗结合的蛋白,相对分子质量约15 kD。结论蛇毒cystatin在Bac to Bac杆状病毒表达系统中成功表达。; 张晓艳林旭林建银; 关键词：西司他汀类克隆细胞细胞基因表达蛇毒液类

蛇毒金属蛋白酶抑制剂抗小鼠黑色素瘤肺转移: 2009年; 探讨蛇毒金属蛋白酶抑制剂BJ46a抗肿瘤侵袭转移作用。以BJ46a为目的基因,选择杆状病毒表达系统生产重组BJ46a蛋白,ProBondTM亲和层析纯化后处理黑色素瘤细胞B16,经尾静脉接种C57BL/6小鼠,建立B16细胞实验性肺转移模型,20天后以颈椎脱臼法处死小鼠,观察肺组织病理学变化。结果表明:不同浓度重组BJ46a蛋白处理组肺部转移瘤数分别为1.1±0.83、0.9±0.7,明显低于对照组(6.3±3.00,P<0.001)和空白对照组(10.7±5.73,P<0.001),光镜下对照组肿瘤病理学征象明显,而重组BJ46a蛋白处理组瘤结节小。研究结果首次证明了重组BJ46a蛋白能抑制小鼠黑色素瘤细胞的侵袭转移,为其作为抗肿瘤侵袭转移药物的进一步研制和开发应用提供理论依据和前提条件。; 徐剑文林建银林旭齐元麟张晓艳朱进伟胡建石; 关键词：杆状病毒表达系统重组蛋白 B16

寄生虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂的类型及生物学功能被引量：5: 2005年; 寄生虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂具有独特的酶抑制活性 ,并且在寄生虫逃避宿主免疫应答适应寄生生活中发挥重要作用。该文就寄生虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂的类型、结构特征以及免疫调节生物学功能方面的研究进展作一综述。; 张晓艳林建银; 关键词：半胱氨酸蛋白酶抑制剂生物学功能寄生虫宿主免疫应答酶抑制活性结构特征

蛇毒cystatin在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的表达与鉴定: 目的:探讨蛇毒cystatin在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的表达。方法:根据中华眼镜蛇蛇毒cystatin蛋白的氨基酸序列合成cystatin基因的四个片段，通过缓慢退火PCR的方法将其拼接为完整...; 张晓艳; 关键词：CYSTATIN 基因克隆 SF9细胞杆状病毒表达系统生物学活性; 文献传递

QQ网络平台在医学微生物学教学中的应用被引量：17: 2009年; 通过校园网,在师生间搭建QQ网络平台辅助教学。实践证明,该平台扩展了有限的课堂,进一步增进了师生的情感,激励了教师工作的热情。该教学平台的运用,应注意不能喧宾夺主,并要坚持及时有效的管理、维护和更新。; 张晓艳佘菲菲; 关键词：网络平台教学医学微生物学

幽门螺杆菌侵袭细胞刺激AID表达: 2014年; 目的探讨幽门螺杆菌(Hp)侵袭内化对细胞AID表达的影响及相关机制。方法选择不同侵袭力的Hp,分别感染AGS细胞,以抗β1整合素抗体抑制侵袭为对照组,经庆大霉素保护性侵袭实验,用real-time RT-PCR和细胞免疫荧光分别检测AID mRNA和蛋白表达水平。用SN-50抑制AGS细胞NF-κB活性,同法检测Hp对AID表达的影响。结果高侵袭力的Hp诱导的AID蛋白和mRNA的表达量均高于低侵袭力的Hp,P<0.05;抗β1整合素抗体处理后各组AID蛋白表达均减少(P<0.05),高侵袭力组mRNA的表达也均减少(P<0.05),低侵袭力组mRNA的表达呈下降趋势;SN-50处理后各组AGS细胞AID蛋白和mRNA表达水平均降低,P<0.05。结论侵入胞内的Hp可刺激AGS细胞诱导AID的异常表达,这种诱导涉及NF-κB信号通路,细菌的诱导能力与内化细菌的数量呈正相关。Hp内化诱导宿主细胞异常表达AID可能是导致Hp相关肿瘤发生的机制之一。; 张晓艳林允斌张杰陈豪佘菲菲; 关键词：幽门螺杆菌 AID NF-ΚB

靶向YWHAE基因shRNA慢病毒表达质粒的构建及功能验证被引量：1: 2017年; 目的构建靶向YWHAE基因的shRNA慢病毒表达质粒,并验证其对AGS胃癌细胞增殖的影响。方法设计并合成5对针对人YWHAE基因的shRNA序列,分别克隆入pLentiLox3.7(pLL3.7)慢病毒表达质粒,接着将重组的慢病毒表达质粒和包装质粒PHR、包膜质粒VSVG一起采用磷酸钙法转染293T细胞包装慢病毒,收集制备的慢病毒感染AGS细胞,用抗生素Puromycine进行筛选。Western-blot检测感染细胞YWHAE蛋白的表达。选取干扰效率最高的慢病毒表达质粒,针对性设计siRNA的点突变引物,重叠延伸PCR法扩增获得点突变的YWHAE基因,克隆入pcDNA3.1/myc-His(-)A载体,构建YWHAE点突变的表达质粒,转染YWHAE沉默效果最好的AGS细胞株,Western-blot检测转染细胞YWHAE蛋白的回复表达。采用MTS法检测YWHAEshRNA慢病毒对AGS细胞增殖的影响。结果5对针对人YWHAE基因的shRNA序列构建的慢病毒中,pLL3.7-siYWHAE-5包装成的慢病毒抑制AGS细胞的YWHAE蛋白表达的效果最明显,仅为对照组相对表达量的(0.269±0.083)倍;pLL3.7-siYWHAE-5包装的慢病毒,其干扰效应可经由YWHAE点突变表达质粒回复。与对照组比较,YWHAE-shRNA组AGS细胞增殖能力明显下降。结论成功构建了靶向YWHAE基因的shRNA慢病毒表达质粒,获得YWHAE基因表达显著下调的AGS细胞株;探明YWHAE表达的下调可有效抑制AGS细胞的增殖,提示YWHAE在胃癌中的致癌潜能。; 张晓艳温春燕吕玉华陈豪佘菲菲; 关键词：慢病毒属 RNA干扰胃肿瘤细胞增殖

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张晓艳

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