赵萍
- 作品数：11 被引量：88H指数：7
- 供职机构：西南农业大学蚕学与生物技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 家蚕一种新的胰蛋白酶基因电子克隆和序列分析被引量：10
- 2005年
- 以按蚊胰蛋白酶基因的氨基酸序列为信息探针,对家蚕EST数据库进行同源检索筛选,克隆了家蚕一种新的胰蛋白酶基因。该基因编码2 71个氨基酸,与按蚊胰蛋白酶的一致性为32 % ,含有典型的胰蛋白酶功能结构域Tryp -SPc ,但在催化三联体中His不保守。
- 李娟赵萍
- 关键词：蛋白酶基因电子克隆家蚕EST数据库功能结构域三联体
- 家蚕不同品种与个体的血液胰凝乳蛋白酶抑制剂差异研究被引量：7
- 2003年
- 胰凝乳蛋白酶抑制剂 (Chymotrypsininhibitor,CI)是家蚕血液中主要的蛋白酶抑制因子 ,为其正常生长发育所不可缺少 ,研究CI对阐明家蚕正常生理以及害虫防治等都具有重要意义。采用pH 8 3、4 0聚丙烯酰胺凝胶电泳和CI活性染色法 ,对 6个家蚕品种血液中的蛋白质含量和CI活性进行了测定 ,并对各品种CI活性的个体差异性进行了分析。结果表明 :结合pH 8 3和pH 4 0的电泳条件 ,可检测出Ict D ,Ict E ,Ict A ,Ict B ,Ict H基因所支配的 15种CI;6个品种中有 3个具有CI个体差异性 ,而且Ict E和Ict B在有的品种或个体无活性 。
- 赵萍夏庆友藤井博伴野丰
- 关键词：家蚕血液CI生理害虫防治蛋白质含量
- 家蚕突变矮小卵血液蛋白及卵黄蛋白的研究被引量：5
- 2003年
- 对家蚕突变矮小卵 (emi)品种在卵母细胞形成时期的血液、卵巢及卵中的总蛋白进行SDS PAGE发现 :在emi的卵巢及卵中含有卵黄蛋白 (Vn)、卵特异性蛋白 (ESP)和大部分的低分子量脂蛋白 (LP) ;emi蚕在蛹期和蛾期的血液中有卵黄原蛋白 (Vg)和LP ,蛹后期大部分emi血液中的Vg和LP含量逐渐减少 ,化蛾时血液中仅含少量的Vg和LP ,而少数emi个体的卵母细胞大量退化 ,在蛹后期和蛾期血液中还含有大量的LP和较多的Vg ;emi蚕从吐丝当天到蛾期的血液中的LP中有分子量为 30kD的蛋白带 ,在卵中却没有。以上结果表明 ,emi基因可能不仅决定卵大小 ,还可能对LP的不同成分的吸收 (如不能吸收LP中分子量为 30kD的蛋白 )有关 。
- 林英赵萍侯勇代方银夏庆友
- 关键词：EMI卵母细胞SDS-PAGE卵黄蛋白VN
- 家蚕卵黄原蛋白及其受体基因被引量：13
- 2005年
- 家蚕小卵突变体 (Smalleggmutant ,sm) ,其卵体积仅及正常卵的 2 / 3,不能受精而致死。因其卵母细胞不能正常吸收卵黄原蛋白 (Vg) ,人们认为其原因可能是卵黄原蛋白受体基因 (VgR)突变所致。本研究首先通过克隆筛选和基因组序列分析 ,获得了 2 5 6 4bp含有 ployA的家蚕卵黄原蛋白受体基因 (BmVgR)片段。将该基因片段的预测蛋白与其它物种的VgR/YPR和低密度脂蛋白受体 (LDLR)家族比较 ,发现该基因具有LDLR家族的基本结构特征。其次 ,经RT PCR检测 ,结果表明BmVgR在sm的不同时期的卵母细胞中都能正常转录。最后 ,分别对sm不同发育时期的体液和卵的总蛋白进行SDS PAGE分析 ,发现该突变体的卵母细胞不能正常摄取体液蛋白 (包括Vg)。综合分析 ,sm不能正常摄取Vg ,可能并不是VgR的功能异常导致 。
- 林英赵萍侯勇李娟龚达平孙全夏庆友向仲怀
- 关键词：受体基因低密度脂蛋白受体家蚕卵卵黄原蛋白卵母细胞
- 家蚕chi、gluE和fruA基因与微生物相应基因的同源性及基因水平转移初探被引量：9
- 2004年
- 通过对家蚕 (Bombyxmori)大规模EST的分析 ,发现家蚕的chi、gluE和 fruA基因分别与微生物的相应基因存在高度的氨基酸序列同源性 ,且进化关系很近 ,但与线虫 (Caenorhabditiselegans)、果蝇 (Drosophilamelanogaster)、按蚊 (Anophelesgambiae)以及家蚕近缘昆虫的类似基因之间的相似性却非常低。这表明它们可能分别与微生物的同源基因具有共同的祖先 ,即微生物的基因水平转移给了家蚕 。
- 程廷才夏庆友刘春赵萍查幸福徐汉福向仲怀
- 关键词：基因水平转移几丁质酶基因系统进化家蚕
- 不同SDS电泳法对家蚕低分子Kunitz型抑制剂分子量鉴定的影响被引量：3
- 2003年
- 采用 15 %SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳和tricine -SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分别对家蚕血液中低分子Kunitz型胰凝乳蛋白酶抑制剂CI - 13的分子量进行了检测 ,SDS -PAGE结果为12 .5kDa ,而tricineSDS -PAGE结果为 7.3kDa。另根据CI - 13的氨基酸组成 ,算出分子量为 7,113Da ,这表明tricineSDS -PAGE的结果与氨基酸组成测定值接近 。
- 赵萍林英夏庆友李娟
- 关键词：家蚕影响因素
- 与家蚕细胞凋亡相关的Caspase基因BmIce的克隆和序列分析被引量：13
- 2005年
- DrIce基因在果蝇的细胞调亡代谢途径中起着重要作用。采用tblastn程序将DrICE在家蚕EST数据库中进行同源性检索,检索到的EST序列进行电子延伸,根据延伸结果设计引物,用RT-PCR检测和克隆测序验证,成功地克隆到家蚕第二种Caspase基因的全长cDNA(GenBank登录号为:AY885228)。克隆的cDNA长1410bp,ORF长825bp,编码275个氨基酸残基,预测分子量为31.8kD,等电点为6.15,基因名定为BmIce。将BmIce的cD-NA与家蚕基因组序列进行比对,结果表明该基因具有6个外显子,外显子/内含子边界处均符合GT-AG规则。BmICE在氨基酸水平上与果蝇DrICE、线虫的CED-3的一致性分别为34%和29%,在第169个氨基酸残基处具有QACRG的五肽活性位点,该活性位点是Caspase家族的典型结构。与果蝇Caspase家族聚类分析中,BmICE与果蝇中具有短的N端结构域的DrICE、DCP-1及DECAY聚为一类,根据其结构分析和聚类分析,推测家蚕BmIce基因可能参与细胞凋亡的执行作用。
- 段军朱虹查幸福赵萍夏庆友
- 关键词：细胞凋亡CASPASE家蚕
- 家蚕Fhx/P25基因的一种新的转录模式分析研究(英文)被引量：13
- 2005年
- 家蚕Fhx/P25蛋白是丝素蛋白的主要成分之一,过去报道只在家蚕后部丝腺特异的转录表达.通过对大规模的家蚕EST序列分析发现,Fhx/P25基因不仅在家蚕后部丝腺高效转录,而且在家蚕幼虫五龄第三天的卵巢组织及其他组织也有转录;分析还发现Fhx/P25基因在丝腺和卵巢组织中有不同的转录起始位点,在卵巢组织中的转录起始位点比在丝腺中的至少要提前115bp左右.用RT-PCR和FQ-PCR进一步验证,以上分析结果均正确.分析还发现Fhx/P25mRNA存在选择性拼接.以上结果表明Fhx/P25基因并不是组织特异转录基因,它的转录表达存在复杂的调控机制,可能还有其他功能.
- 刘春赵萍程廷才查幸福夏庆友向仲怀
- 关键词：家蚕转录起始位点
- 家蚕血液中胰凝乳蛋白酶抑制剂研究——品种间的多态型
- 2002年
- 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和胰凝乳蛋白酶抑制剂 (CI)活性染色 ,对 9个家蚕品种血液中CI种类的分布进行了调查。结果 :在碱性电泳条件下可检测出 12种以上的CI,品种间CI分布存在多态型 ,根据结果筛选出作为分离纯化家蚕胰凝乳蛋白酶抑制剂的理想品种材料。
- 赵萍夏庆友
- 关键词：家蚕血液多态型
- 家蚕转基因载体pBacA3EG的构建及其表达被引量：7
- 2005年
- 以家蚕Bombyxmori肌动蛋白A3(actin3)启动子、增强性绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)基因及SV40的多聚腺苷酸识别序列为元件,经多次克隆,将其插入到piggyBac转座载体中。经PCR、酶切鉴定及测序表明各元件已按正确的方式插入到piggyBac载体中。将构建好的piggyBac表达载体显微注射到胚盘形成前期的蚕卵中,在胚胎早期发育的第3天,通过体视荧光显微镜检测到蚕卵内发出较强的绿色荧光。结果表明该载体构建正确且能在蚕卵中进行表达。家蚕转基因载体的体外瞬时表达不但是成功进行家蚕转基因所必需的第一步,而且其自身也可以应用于基因的功能研究,为家蚕后基因组研究奠定了基础。
- 徐汉福夏庆友刘春吴雪峰杨远萍赵萍向仲怀
- 关键词：家蚕转基因PIGGYBAC绿色荧光蛋白
