郭莹
- 作品数：63 被引量：148H指数：8
- 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划上海市现代生物与新药产业发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 重组人白介素-15理化对照品的分析鉴定被引量：1
- 2016年
- 目的为了对产品质量进行有效的控制,根据《中国药典》要求,对重组人白介素^(-1)5理化对照品进行分析鉴定。方法参照2010年版《中国药典》三部,测定该样品的生物学活性、蛋白含量、纯度、等电点等指标;通过测定N-末端氨基酸序列、质谱相对分子质量与液质肽图,确证其一级结构。结果该样品的比活性为1.03×107IU·mg^(-1);蛋白含量为(0.879±0.065)mg·m L^(-1);非还原SDS-PAGE纯度为100.0%;分子排阻色谱纯度为100.0%;等电点测定结果为5.2;以上结果均符合质量标准要求。实测质谱相对分子质量(12 900.80)与理论值(12 900.71)一致;氨基酸序列与理论一致,氨基酸覆盖率100%;二硫键连接方式为Cys36-Cys86、Cys43-Cys89,与文献报道相符。结论该理化对照品质量合格、氨基酸序列正确,可用于白介素^(-1)5的常规质量控制。
- 郭莹陶磊韩春梅杨靖清秦玺饶春明
- 关键词：白介素-15氨基酸序列二硫键
- 2012年重组人干扰素α2a评价性抽验结果与质量分析
- 裴德宁付志浩杨靖清饶春明李永红郭莹丁有学韩春梅李响毕华范文红陶磊
- 关键词：重组人干扰素Α2A评价性抽验
- 重组天花粉蛋白突变体质量标准的研究和建立被引量：3
- 2006年
- 目的：建立重组天花粉蛋白突变体（MTCS）的质量控制标准和检测方法。方法：用HL-60细胞株／MTT比色法定量测定MTCS体外生物学活性；用C4-HPLC和非还原型SDS—PAGE测定蛋白纯度；用毛细管电泳法测定等电点；用胰酶消化／RP—HPLC测定肽图；用还原型SDS—PAGE测定蛋白分子量等。结果：MTCS原液和成品对HL-60细胞的反应曲线与参考品的反应曲线一致，都呈现典型的S型曲线并且符合四参数方程式Y=（（A—D）／（1＋（X／C）^B））＋D，相关系数大于0．99；蛋白质纯度大于95．0％；等电点为9．16；蛋白原液的肽图与参考品肽图图形一致；分子量为2．72×10^4。结论：建立的MTCS质量控制标准和检测方法可以有效控制该制品的质量，并用于该制品的常规检定。
- 韩春梅袁力勇饶春明李响丁有学郭莹王军志
- 关键词：HL-60细胞株HPLC等电点
- 重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子活性测定标准品的研制被引量：6
- 2001年
- 目的 :建立效价测定用的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)国家标准品。方法 :标准品按WHO有关要求进行制备、分装、冻干、检测 ,用GM CSF国际标准品为标准进行协作标定。结果 :冻干重组GM CSF标准品经检测外观 ,无菌实验合格 ,水分为 0 .93% ,加速热稳定实验表明其生物学活性在温度为 - 2 0℃ ,4℃和 2 5℃ ,37℃条件下 2 3个月保持稳定。该标准品经 3家实验室协作标定共 2 1次测定 ,几何平均效价为 1.77× 10 5IU/支。实验均数的 95 %可信区间为(1 6 4～ 1.90 )× 10 5IU/支 ,单次实验的 95 %参考值范围为 (1.2 3～ 2 .34 )× 10 5IU/支 ,平均可信限率为 6 .96 2 %。结论 :该批重组GM CSF国家标准品各项指标均符合要求 ,可作为国家标准品使用 ,效价定为 1.8× 10 5IU/支 ,编号为 98/ 0 1。
- 赵阳饶春明张翊郭莹丁有学王军志
- 关键词：GM-CSF国家标准品活性测定重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子
- 运用优化的毛细管等电聚焦电泳方法评价叶酸受体α单抗电荷不均一性被引量：1
- 2011年
- 目的:用优化的cIEF方法分析叶酸受体α单抗(McAb)及其参照品的异构体分布,根据等电点差异,将样品带电荷的异构体分离开来,更好地评价叶酸受体α单抗电荷不均一性。方法:毛细管等电聚焦电泳条件:中性涂层的毛细管50μm×30cm(有效长度为20cm);阳极电泳缓冲液200mmo·lL-1磷酸,阴极电泳缓冲液300 mmo·lL-1氢氧化钠;聚焦电压25 kV,迁移电压30 kV,温度20℃检测波长280 nm。结果:用优化后的方法使样品的电荷异构体能够有效分离,电泳图谱与参照品电泳图谱一致。样品主峰峰面积百分比为60.59%,等电点为7.78,次主峰面积百分比为24.38%,等电点为7.59,主峰与次主峰分离度为1.185(USP)。连续5针进样,主峰面积百分比的RSD为7.05%,等电点的RSD为0.31%;次主峰面积的百分比RSD为5.99%,等电点的RSD为0.69%;待测样品在12 h内稳定。结论:采用优化的cIEF方法分析叶酸受体α单抗的电荷不均一性,具有更高的分离度,更好的重现性,为质量控制提供了更准确的手段。
- 李响王兰陶磊裴德宁郭莹饶春明
- 关键词：毛细管电泳等电聚焦叶酸受体
- 首批重组人干扰素α2b活性测定国家标准品的研制被引量：1
- 2014年
- 目的研制首批重组人干扰素α2b（rhIFNα2b）活性测定国家标准品。方法按《中国药典》三部（2010版）相关要求,进行rhIFNα2b活性测定标准品的制备、检验,以rhIFNα2b国际标准品为标准进行协作标定,并使用热加速试验进行稳定性考察。结果制备的rhIFNα2b活性测定标准品外观、无菌检查合格,水分含量为0.6%,分装精度为0.3%;经5个实验室协作标定共25次,几何平均生物学活性为4.27×105 IU/支,平均生物学活性的95%置信区间为4.13×105-4.42×105 IU/支,单次测定的95%参考值范围为3.65×105-5.00×105 IU/支,平均可信限率为3.32%;在-20℃下,生物学活性降低10%需19.6年,稳定性较高。结论该批rhIFNα2b活性测定标准品各项指标均符合《中国药典》三部（2010版）相关要求,已被批准为国家标准品,规格为：4.27×105 IU/支。
- 裴德宁郭莹丁有学史新昌韩春梅毕华饶春明
- 关键词：干扰素Α2B国家标准品生物学活性
- 重组人白介素2梯度胶的肽图分析被引量：1
- 1998年
- 肽图分析是验证rhIL-2的重要手段之一.rhIL-2具有133个氨基酸,在其一级结构的序列中有四个甲硫氨酸切点,可用化学裂解的方法将甲硫氨酸肽键打开,进行肽谱分析,以对其进行验证.为了有效地对甲硫氨酸进行裂解,我们用70%甲酸溶解CNBr^2,保持CNBr的高浓度小体积,使rhIL-2在1.5mlEppedorf管中,室温条件下有效地打开甲硫氨酸肽键.同时比较了CNBr浓度、裂解时间以及在不同浓度的梯度胶中作SDS-PAGE对实验结果的影响,确定了最佳的实验条件,获得了良好的实验结果.本文虽以rhIL-2为例,但对所有带甲硫氨酸的细胞因子均可用本方法进行肽图分析.
- 张占全郭莹饶春明张丽娜
- 关键词：白细胞介素2RHIL-2
- 我国生物技术药物的质控标准、标准品的研究和制订
- 王军志饶春明张翊丁锡申刘长暖韩春梅刘兰李永红高凯丁有学郭莹赵阳田登安林建伟纪宏
- 该项目属生物高技术领域，近年来中国生物技术创新药物的研究开发非常活跃，建立完善的质控标准是保证新药批准上市的必要条件，因此需要建立相应的质控体系，通过研究建立符合国际标准的质量控制体系，保证中国生物技术药物质量。主要研究...
- 关键词：
- 关键词：生物制品生物技术药物
- 重组人脑利钠肽质量标准与检定方法研究被引量：7
- 2002年
- 目的:建立重组人脑利钠肽(rhBNP)质量标准与检定方法,用于该产品的质量控制。方法:用离体动脉条测定法测定rhBNP的生物活性;用反相HPLC和SDS-PAGE分析蛋白纯度;用肽图、免疫印迹及N-端氨基酸序列测定分析、鉴定产品特性;用固相斑点杂交法测定残余外源DNA含量;用ELISA测定残余工程菌蛋白含量;用《中国生物制品规程》的方法对,rhBNP成品进行无菌、热原、细菌内毒素和异常毒性等常规试验等。结果:用建立的方法对连续3批rhBNP原液和成品进行检定,结果各项指标均符合《重组DNA制品质量控制要点》和《中国生物制品规程》的要求。结论:建立的rhBNP质量标准与检定方法,具有保证产品安全、有效、质量可控等特点,可用于该产品的常规检定。
- 饶春明王军志赵阳韩春梅郭莹高凯
- 关键词：重组人脑利钠肽检定方法
- 重组人表皮生长因子生物活性国家标准品的研制被引量：6
- 2002年
- 【摘 要】目的 建立测定重组人表皮生长因子（rhEGF）活性用国家标准品。方法 按WHO有关要求，制备并检测标准品，以EGF国际标准品为标准进行协作标定。结果 冻干EGF标准品经外观、无菌、水分检测均符合规定，在-20、4、25和37℃保持33个月生物活性稳定，协作标定几何平均效价为6823IU/支。实验均数的95％可信区间为5958～7812IU/支，单次实验的95％参考值范围为2241～12056IU/支，平均可信限率为14．64％。结论 该批EGF标准品可作为国家标准品，效价定为6800IU/支，批号为97/01。
- 刘兰饶春明丁有学郭莹田登安王军志
- 关键词：重组人表皮生长因子生物活性国家标准品RHEGF
