龚新勇
- 作品数：46 被引量：104H指数：5
- 供职机构：贵州大学动物科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金博士科研启动基金贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域：农业科学理学生物学医药卫生更多>>
- APOBEC3F的真核表达及其抗猪繁殖与呼吸综合征病毒作用的分析被引量：1
- 2023年
- 为研究载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样3F(APOBEC3F)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)增殖的影响,本研究根据GenBank中登录的猪源APOBEC3F基因序列(EU871586)设计引物,经PCR从苏太猪外周血单个核淋巴细胞中扩增APOBEC3F基因,经测序后构建系统进化树分析其遗传进化特性。结果显示,猪源APOBEC3F基因编码区(CDS)长1257 bp,编码418个氨基酸,与其他物种该基因的同源性在60%~70%。利用扩增的APOBEC3F基因构建真核表达载体pcDNA3.1(+)5'Flag-APOBEC3F经菌液PCR和测序鉴定正确后,转染Marc-145细胞,采用间接免疫荧光试验(IFA)和western blot鉴定重组APOBEC3F蛋白的表达。IFA结果显示,转染pcDNA3.1(+)5'Flag-APOBEC3F的Marc-145细胞质中出现特异性红色荧光;western blot结果显示,转染pcDNA3.1(+)5'Flag-APOBEC3F的细胞样品在44 ku处有特异性条带,表明猪源APOBEC3F在Marc-145细胞中获得了表达。在Marc-145细胞中转染不同剂量的pcDNA3.1(+)5'Flag-APOBEC3F或不同剂量的针对APOBEC3F的siRNA,过表达或抑制APOBEC3F表达后感染PRRSV,通过RT-qPCR检测PRRSV N基因mRNA的转录水平,采用western blot检测细胞中PRRSV N蛋白的表达水平,采用TCID50测定PRRSV滴度。结果显示,在Marc-145细胞中过表达的APOBEC3F可以显著抑制PRRSV N基因mRNA转录水平(P<0.01)和N蛋白的表达水平,降低PRRSV滴度(P<0.01、P<0.001),表明APOBEC3F具有抑制PRRSV增殖的作用,且抑制效率与重组质粒的转染剂量呈正相关。在Marc-145细胞中抑制APOBEC3F的表达后,PRRSV N基因的mRNA转录水平(P<0.01)、N蛋白的表达水平与PRRSV滴度(P<0.05、P<0.001)均显著升高,表明抑制APOBEC3F的表达具有促进PRRSV增殖的作用,且该促进效率与针对APOBEC3F的siRNA转染剂量呈正相关。本研究首次证明APOBEC3F对PRRSV在Marc-145细胞中的增殖有抑制作用,为研究APOBEC3F功能提供实验依据,也为研究抗PRRSV相关机制的研究提供参考。
- 胡璇田浪王怡然温贵兰陈启青陈佳琪陈佳琪龚新勇
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒MARC-145细胞
- 兽医免疫学实验教学改革与探索
- 2023年
- 兽医免疫学是动物医学专业的重要专业课之一,由理论课和实验课2个部分组成,通过该课程学习不仅可以提高学生们的学习兴趣,而且可以为之后学生的就业打下坚实的基础。本文主要分析了当前贵州大学动物科学学院兽医免疫学实验教学中存在的问题,并提出了线上线下混合方式、翻转课堂等现代教学创新模式及融入思政要素等实验教学和考核创新改革,旨在提高兽医免疫学实验教学课程质量,为社会培养合格的兽医专业人才,服务社会。
- 陈佳琪嵇辛勤程振涛程振涛杨颖温贵兰
- 关键词：动物医学专业实验教学改革
- CaBi_2Ta_2O_9:Pr^(3+)黄色荧光粉的制备与性能研究被引量：2
- 2014年
- 采用高温固相反应法,制备了系列Pr3+掺杂的CaBi2Ta2O9(CBTO:Pr3+)Bi层状结构铁电氧化物(BLSFs)粉体。利用X射线衍射(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)对样品的晶体结构和形貌进行了表征。利用积分球式分光光度计和荧光光谱仪对样品的光学性能进行了分析。XRD结果表明,所生成的样品均为CBTO纯相。样品的吸收和激发光谱表明,在449~500nm波长范围存在Pr3+的f-f跃迁吸收;样品的发射光谱由绿光(525~575nm)和红光(575~700nm)发射两部分组成,避免了白光LED中再吸收的问题。随着Pr3+掺杂浓度的增加,样品的发光强度先增强后减弱,当Pr3+的掺杂浓度为2mol%时发光强度最大。研究了Ca0.98Pr0.02Bi2Ta2O9的热稳定性,并通过计算得到其热猝灭激活能E=0.24eV。显色指数(CIE)色坐标图表明,所制备的样品可以被蓝光有效激发而发出黄光。研究结果表明,CBTO:Pr3+可以用于蓝光LED芯片激发用的黄色荧光粉。
- 崔瑞瑞龚新勇邓朝勇
- 鱼嗜水气单胞菌疫苗研究进展被引量：10
- 2004年
- 嗜水气单胞菌是一种人兽共患的致病菌,对水产养殖造成巨大危害。已报道的嗜水气单胞菌疫苗有全菌灭活苗、菌体成分 亚单位疫苗、减毒活疫苗和DNA疫苗,现分别综述。
- 龚新勇欧阳岁东主性
- 关键词：鱼用疫苗嗜水气单胞菌疫苗亚单位苗
- 绿壳蛋鸡LSm14A基因克隆与组织分布分析被引量：1
- 2016年
- 为探明绿壳蛋鸡LSm14A分子序列特征与其在绿壳蛋鸡体内不同组织中的分布情况。本研究利用RT-PCR方法扩增LSm14A基因编码区全长序列并进行克隆测序。利用DNAStar软件对LSm14A基因与鸭、人、鼠等其他13个物种的LSm14A基因核苷酸、氨基酸序列进行比对分析,并对绿壳蛋鸡LSm14A基因所编码的蛋白进行了二级结构、B细胞表位、保守结构域、跨膜结构域和信号肤预测。同时采用实时荧光定量PCR方法检测绿壳蛋鸡源LSm14A基因在绿壳蛋鸡不同组织中的转录水平差异。绿壳蛋鸡LSm14A基因克隆结果显示:绿壳蛋鸡LSm14A全长CDS为1386 by,编码461个氨基酸;与原鸡源LSm14A相似性达99.6%,与鸭源的LSm14A相似性为94.7%,与人源、猴源、猪源、爪蟾的LSm14A相似性较低;系统进化树显示其序列与原鸡的亲缘关系最近,且处于同一遗传进化分枝。绿壳蛋鸡LSm14A基因编码蛋白结构预测结果显示:绿壳蛋鸡LSm14A基因编码蛋白亲水性较好,为非分泌蛋白,含有Sm1与Sm2基序和FDF结构域,不存在跨膜结构,荧光定量结果显示:LSm14A分子在绿壳蛋鸡不同组织中均有分布且有不同程度的表达,在免疫器官法氏囊、胸腺中表达较高,而在肝脏中表达最低。本研究结果说明绿壳蛋鸡LSm14A分子具有较高的保守性,在绿壳蛋鸡不同组织中呈广泛性表达,在禽类中枢免疫器官中呈高水平表达,将为研究LSm14A分子在天然免疫中的作用机制、防控禽类病毒性疾病奠定基础。
- 伍昌华温贵兰张升波罗金木林汉卿文明嵇辛勤周碧君王开功程振涛汪德生龚新勇
- 关键词：绿壳蛋鸡
- 黄颡鱼源拟态弧菌的分离鉴定被引量：5
- 2020年
- 采用病理剖检、分离培养、染色镜检、生化试验和16S rRNA基因序列分析等方法对分离菌株进行鉴定,结果显示该分离菌的培养特性、菌落形特征、生理生化特征均与拟态弧菌相同;药敏试验结果表明,该分离菌对链霉素、罗红霉素、丁胺卡那、氧氟沙星高度敏感,对多黏菌素敏感,对青霉素、氟苯尼考、头孢曲松、强力霉素耐药;16S rRNA基因序列同源性分析结果显示,该分离菌与弧菌科弧菌属的同源性为92.8%~99.9%,其中与中国分离的2株拟态弧菌的同源性最高(99.9%)。遗传进化树结果表明,分离株与霍乱弧菌、易北河弧菌、溶藻弧菌、拟态弧菌等自成一个分支,其中在这分支下与中国分离的拟态弧菌SCCF04(KC503059.1)、拟态弧菌XQ(KJ604709.1)单独另成一个小分支。从黄颡鱼中分离出1株拟态弧菌,并将命名为201811,试验结果可为黄颡鱼拟态弧菌病的防控提供参考。
- 陈彦希杨佰启温贵兰田浪张升波徐丽李昌红龚新勇汪德生文明程振涛
- 关键词：拟态弧菌黄颡鱼RRNA基因
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒GZZJ201711株全基因组序列分析被引量：2
- 2020年
- 为了解贵州省毕节地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因变异情况,于2017年从贵州毕节地区某疑似感染PRRSV猪群分离到1株PRRSV,将其命名为GZZJ201711毒株。采用RT-PCR分段扩增出PRRSV GZZJ201711株13个基因片段,分别连接到pMD19-T载体上进行测序,拼接后得到PRRSV GZZJ201711株全基因组长15 322 bp (去除polyA尾),包括5’UTR、ORFla-ORF7、3’UTR。序列分析表明,GZZJ201711株与欧洲型Lelystad virus(LV)株核苷酸同源性为60.3%,与美洲型毒株代表株ATCC VR-2332核苷酸同源性为89.2%,与HP-PRRSV(HUN4、JXA1、TJ)等毒株同源性在98.8%~98.9%之间。GZZJ201711株与高致病性毒株JXA1、HUN4、TJ属于同一小分支,其中与XJu-1、GDHY毒株遗传关系最近。GZZJ201711毒株的NSP2基因有30个氨基酸缺失,与JXA1、HUN4、TJ等HP-PRRSV毒株缺失位置一致。
- 陈广张升波温贵兰李昌红徐丽田浪张喜懿龚新勇陈彦希文明王开功
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒全基因组
- 肉牛产业项目投资估算与效益分析智能系统的研究
- 本研究以国家农业产业化项目投资估算和效益分析所规定的指标为依据，建立了关系数据库，采用三层的B/S结构和基于J2EE标准的开发模式，将肉牛场建设与养殖生产、投资估算与效益分析专家知识和经验。行业定额与国家有关农业投资项目...
- 龚新勇
- 关键词：肉牛产业养殖生产项目投资估算智能系统
- 文献传递
- 一种可单手操作的采血装置
- 本实用新型公开了一种可单手操作的采血装置，属于采血技术领域，解决了现有采血装置因需要拉动针管内的活塞杆以产生负压故不便于单手操作的问题；其包括用于连通针筒与真空管的采血开关组件，采血开关组件的两端分别与用于抽血的针筒和真...
- 苏芝乾温贵兰张霞龚新勇张军曹登友何贤海徐飞罗东还曾熙雯
- Marc145细胞源LSm1基因的巢式PCR扩增及生物信息学分析
- 2017年
- 为分析LSm1基因的特点,预测其编码蛋白的生物学功能,试验利用巢式PCR方法对Marc145细胞源LSm1基因进行扩增、克隆及序列测定,应用生物信息学方法对Marc145细胞源LSm1基因进行序列分析,并对其编码蛋白进行二级结构、B细胞表位、保守结构域、跨膜结构域和信号肽预测。结果显示,经过两轮的PCR扩增,成功获得402bp的Marc145细胞源LSm1基因,编码133个氨基酸。Marc145细胞源LSm1基因核苷酸序列与人类、灵长类同源性较高,其次是海洋哺乳动物类,最后是陆地野生动物及家畜,同源性为92.8%~99.8%,而其编码的氨基酸虽没有此规律,但氨基酸序列同源性均较高,为97.8%~99.3%。系统进化树结果显示,Marc145细胞源LSm1基因与人类LSm1基因亲缘关系较近,处在同一分支,其次是灵长类。LSm1蛋白二级结构中α-螺旋和无规则卷曲所占比例较大,分别为45.11%和24.06%。预测此蛋白存在4个B细胞优势抗原表位,具有Sm超家族保守结构域,无跨膜区域,无信号肽区域。结果表明,LSm1蛋白在细胞内转录及表达水平可能较低,细胞cDNA需通过巢式PCR扩增两轮才能出现目的条带,本试验方法为LSm1基因的扩增提供了参考。同时,LSm1生物学功能预测结果为获得LSm1人工表达蛋白与针对LSm1蛋白的特异性抗体制备,以及在细胞水平研究LSm1的功能机制及其在病毒复制中的作用奠定基础。
- 陈绍品林汉卿温贵兰张升波李昌红徐丽龚新勇汪德生文明周碧君程振涛
- 关键词：巢式PCR克隆生物信息学分析
