董鲁
- 作品数：4 被引量：26H指数：3
- 供职机构：暨南大学医学院生殖免疫研究中心更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 重组人巨细胞病毒(HCMV)嵌合肽在毕赤酵母中的表达被引量：4
- 2003年
- 目的:在巴斯德毕赤酵母中表达人巨细胞病毒gp52C末端和pp150C末端串联片段的嵌合肽.方法:用SacⅠ和BglⅡ分别酶切CMVp-pPIC9K重组质粒,电打孔法导入毕赤酵母GS115后,在缺组氨酸的MD板上筛选出转化子,然后根据甲醇利用快速型(Mut+)和甲醇利用缓慢型(Muts)菌株的不同生长特点,筛选出Mut+和Muts型转化子,用PCR法进一步鉴定阳性克隆.分别用甲醇诱导Mut+和Muts型转化子表达目的蛋白4d,取培养产物冻干浓缩,进行SDS-PAGE和Westernblotting,筛选出能特异表达目的蛋白的菌株,分析蛋白的含量及纯度.结果:重组人巨细胞病毒可在甲醇利用快速型毕赤酵母中有效表达,其表达量约占培养上清分泌蛋白的76 5%.结论:重组人巨细胞病毒(HCMV)嵌合肽可在真核细胞毕赤酵母中成功表达.
- 董鲁谢琪璇潘善培肖銮娟刘红军
- 关键词：HCMV毕赤酵母基因表达基因工程病毒检测
- 重组人巨细胞病毒（HCMV）嵌合肽在毕赤酵母中的表达及高密度培养的研究
- 为了在巴斯德毕赤酵母中表达人巨细胞病毒gp52C末端和pp150C末端串联片段的嵌合肽，将构建好的hCMVp-pPIC9K重组质粒分别经Sac Ⅰ和Bg1 Ⅱ酶切，电打孔法导入毕赤酵母GS115后，在缺组氨酸的MD板上筛...
- 董鲁
- 关键词：巴斯德毕赤酵母
- 文献传递
- 重组人卵透明带ZP3蛋白在毕赤酵母中的表达被引量：16
- 2003年
- 利用P .pastoris表达人卵透明带ZP3蛋白。设计特定引物从全长hZP3cDNA上扩增含跨膜区序列的人卵透明带ZP3基因片段 ,并在N末端接上串联组氨酸编码序列的重组基因序列 ;扩增片段插入表达载体pPIC9K中 ;线性化后的重组质粒转入P .pastoris中 ,用高浓度G4 18筛选高拷贝菌株 ,然后甲醇诱导目的蛋白表达。用SDS PAGE和Westernblot分析表达产物。结果发现P .pastoris表达的人ZP3蛋白可以分泌到培养液中 ,并且可溶性好。纯化前后的重组人ZP3蛋白均能与兔抗猪ZP3蛋白抗体发生交叉反应 ,证实表达的目的蛋白具有反应原性。
- 唐键谢琪璇潘善培肖銮娟董鲁张春雪孙彩军
- 关键词：毕赤酵母
- 卵透明带DNA避孕疫苗pVAX1-pZP3α的构建及其在体外的表达被引量：7
- 2003年
- 目的:构建pVAX1-pZP3α,探讨其在体外的表达,研制卵透明带DNA避孕疫苗.方法:利用基因工程的方法构建卵透明带DNA避孕疫苗pVAX1-pZP3α,用脂质体法转染Hela细胞并采用RT-PCR和Westernblot检测卵透明带抗原pZP3α的体外表达.结果:构建了卵透明带DNA避孕疫苗pVAX1-pZP3α,并在体外表达系统检测到卵透明带抗原pZP3αmRNA和pZP3α的表达.结论:正确构建了卵透明带DNA避孕疫苗pVAX1-pZP3α.
- 刘红军潘善培谢琪璇肖銮娟董鲁
- 关键词：猪卵透明带DNA疫苗避孕疫苗抗原免疫
