陈红英
- 作品数：16 被引量：36H指数：4
- 供职机构：福建医科大学附属协和医院更多>>
- 发文基金：福建省卫生厅青年科研基金国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- HBV X基因与肝细胞凋亡被引量：2
- 2003年
- 陈红英王小众
- 关键词：病毒蛋白质P53病毒蛋白质类肝炎病毒乙型
- 乙肝病毒X基因真核表达载体的构建及人肝细胞株HL-7702转染被引量：11
- 2004年
- 目的:构建表达乙肝病毒(HBV)X基因的人肝细胞株. 方法:用PCR法扩增HBVX基因序列,将其添A后连至PUCmT载体上,用EcolⅠ和Hind Ⅲ双酶切PUCmT-X和PcDNA3载体,连接酶切片段PcDNA3及X片段以构建重组质粒PcDNA3-X.用脂质体转染法将PcDNA3-X及空质粒PcDNA3导入肝细胞HL-7702中,G418选择培养,RT- PCR鉴定其稳定表达. 结果:已构建的PcDNA3-X经序列测定含有完整的HBV X 基因片段,转入HL-7702细胞后经RT-PCR证实该细胞有稳定表达X蛋白. 结论:成功构建了表达HBV X基因的肝细胞株,为进一步探讨HBV X基因在肝炎与肝癌发生中的作用提供了理想的实验模型.
- 陈红英唐南洪张生君陈治新王小众
- 关键词：乙肝病毒X基因真核表达载体脂质体转染法
- 舒林酸对HBV X基因转染的肝癌细胞Wnt信号通路的影响被引量：5
- 2010年
- 目的探讨非甾体类抗炎药舒林酸(Sulindac)对HBV X基因转染的人肝癌SMMC7721细胞系Wnt信号通路的影响。方法用脂质体转染方法将HBx真核表达载体pcDNA3-X瞬时转染SMMC7721细胞(SMMC7721/HBx),以转染空载体pcDNA3的SMMC7721细胞组(SMMC7721/pcDNA3)及未转染质粒的SMMC7721细胞组(SMMC7721)为对照,于转染后72 h用RT-PCR和Western blot检测HBx的表达;并以各种浓度的舒林酸于瞬时转染后24 h干预SMMC7721/HBx组和SMMC7721/pcDNA3组至72 h,Western blot和免疫细胞化学检测β-catenin的表达,Western blot检测cyclinD1的表达。结果RT-PCR和Western blot显示,SMMC7721/HBx组在RNA及蛋白水平均有HBx的表达,而SMMC7721/pcDNA3组及SMMC7721组均无表达。与SMMC7721/pcD-NA3组及SMMC7721组相比,Western blot示SMMC7721/HBx组β-catenin、cyclinD1的表达水平较高,免疫细胞化学显示SMMC7721/HBx组β-catenin的表达水平较高,核染色较深,而SMMC7721/pcDNA3组及SMMC7721组之间则无明显差异。Westernblot和免疫细胞化学示一定浓度的舒林酸干预SMMC7721/HBx组和SMMC7721/pcDNA3组细胞48 h后可下调β-catenin和cy-clinD1的表达,而对SMMC7721/HBx组的下调较SMMC7721/pcDNA3组明显。结论HBx基因成功瞬时转染入SMMC7721细胞,激活Wnt信号通路,并同时上调cyclinD1的表达。舒林酸可通过下调β-catenin抑制肝癌细胞的Wnt信号通路,下调cyclinD1的表达,且HBx阳性的肝癌细胞对舒林酸较敏感。
- 黄伟平黄月红陈治新陈红英王小众
- 关键词：肝癌WNT信号通路舒林酸X基因
- “新医科”背景下互动式临床教学模式的探索
- 2021年
- 契合"新医科"时代要求,文章探索多临床、增情境、富人文的互动式临床教学模式(以下简称"教学新模式"),激发学生的学习兴趣和主动性,以培养卓越的医学职业素养,培育饱满的人文关怀、人道主义信念以及爱国主义情怀;培养综合素质高、职业能力强的合格应用型医学人才。
- 曾嘉霖陈旻苏萍陈红英
- 关键词：临床教学
- HBV X基因对成人肝细胞HL-7702线粒体功能的影响被引量：4
- 2008年
- 目的:研究HBV X基因与线粒体COXⅢ基因相互作用以及对线粒体功能的影响。方法:将HBV X基因真核表达载体pCDNA3-X及空载体pCDNA3转染成人肝细胞HL-7702细胞,经过2周G418筛选,获得稳定表达的新细胞株,分别命名为HL-7702/HBx和H-7702/pcDNA3,RT-PCR和Western blot方法证实HBV X基因在HL-7702/HBx细胞内的稳定表达。抽提细胞总RNA进行半定量RT-PCR及分离细胞线粒体进行Western blot检测COXⅢ表达水平变化,并通过酶动力学方法检测线粒体细胞色素氧化酶活性。结果:重组质粒pcDNA3-X转染后经G418筛选,RT-PCR和Western blot分析结果显示HL-7702-HBx细胞能够稳定表达HBV X基因。RT-PCR和Western blot结果发现HBV X基因下调COXⅢ蛋白表达而不影响mRNA水平表达。酶动力学检测发现线粒体细胞色素C氧化酶活性降低。结论:HBV X基因通过转录后水平调节COXⅢ表达,HBx通过与COXⅢ相互作用抑制线粒体细胞色素氧化酶活性。
- 林纳李丹陈红英陈治新王小众
- 关键词：HBXCOX
- 乙肝病毒X基因的转染及表达对HL-7702肝细胞凋亡的影响
- 2004年
- 陈红英王小众
- 关键词：肝细胞凋亡脂质体转染法PCDNA3
- HBV X基因转染对HepG2肝癌细胞凋亡的影响及其机制被引量：3
- 2005年
- 目的 :研究HBVX基因转染对HepG2肝癌细胞凋亡及凋亡相关因子表达的影响。 方法 :用脂质体转染法将HBx真核表达载体pcDNA3 /HBx瞬时转入HepG2细胞 ,以未转染的HepG2细胞及转染空载体 pcDNA3 的细胞为对照。RT PCR法检测HBx基因的表达 ;MTT法检测各组细胞的增殖活性 ;TUNEL法检测各组的凋亡情况。β actin为内参 ,半定量RT PCR法检测凋亡相关基因Bax、Bcl xL、c myc的表达量变化。结果 :pcDNA3 X转染HepG2细胞后 ,RT PCR扩增出HBVX片段 ,空质粒组及正常对照组均未扩增出相应片段。HepG2细胞转染HBx基因后 ,相对于对照组细胞增殖能力明显下降 ,凋亡增多 ,差异有显著性意义 (P <0. 0 1) ;转染HBx的细胞Bax、Bcl xL、c mycmRNA相对表达量较转染空质粒组和未转染质粒组明显增高 ,差异有显著性意义 (P <0 . 0 5 )。结论 :成功将HBx基因转染入HepG2细胞 ,并在细胞中表达 ,转染HBx基因可同时上调Bax、Bcl xL、c mycmRNA表达 ,促进HepG2细胞凋亡 ,抑制增殖。
- 林纳陈红英张生君李丹陈治新王小众
- 关键词：HBX基因BCL-XL肝癌细胞凋亡PCDNA3脂质体转染法
- 老年慢性乙肝患者服药依从性影响因素现状调查被引量：6
- 2017年
- 目的:探讨老年慢性乙肝患者服药依从性的影响因素。方法:采用慢性病患者服药依从性测量量表,对收治的80例老年慢性乙肝患者进行调查。结果:受教育程度、医保情况、病程、诊疗流程、并发症是影响老年慢性乙肝患者依从性的主要因素(P<0.05)。结论:通过四因、三勤的健教方法,一标识、一闹铃双提醒的综合性护理措施,从而提高老年慢性乙肝患者的依从性。
- 刘榕华陈红英
- 关键词：老年慢性乙肝服药依从性
- 靶向乙型肝炎病毒X蛋白小干扰RNA对稳定表达X基因的正常人肝细胞株线粒体功能的影响
- 2009年
- 目的构建并鉴定靶向HBVX蛋白（HBx）小干扰RNA（siRNA）重组表达质粒，观察其对稳定表达HBx基因的正常人肝细胞株HL-7702／HBx线粒体功能的影响。方法设计合成两条针对全长HBx基因具有短发夹结构的siRNA序列，克隆至载体psiRNA—Hh1GFPzeo中，构建重组表达质粒pX1和pX2，并以不针对任何序列的重组质粒pScr作为对照。通过脂质体介导转染入HL-7702／HBx肝细胞株，RT—PCR及Western印迹检测其对HBx的阻抑效应。流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）和线粒体膜电位（Δψm）水平的变化。采用方差分析对实验结果进行统计分析。结果酶切鉴定和测序结果证实pX1和pX2构建成功。pScr、pX1、pX2分别转染入HL-7702／HBx细胞48h后，空白对照组HBxmRNA和蛋白表达水平分别为0．65±0．12和0．62±0．09，pX1组分别为0．33±0．10和0．19±0．08，明显低于空白对照组（t=4．73，P〈0．05；t=7．53，P〈0．05），pX2组分别为0．48±0．10和0．37±0．11，亦明显低于空白对照组（t=2．39，P〈0．05；t=4．43，P〈0．05），但pXl组抑制效果强于pX2组（t=2．28，P〈0．05）。RNA干扰后细胞内ROS水平为5．00±0．38，Aqrm水平为33．864-0．50；空白对照组ROS为72．10±0．55，AWm为3．57±0．26（t=276．22，P〈0．05；t=107．15，P〈0．05）。结论靶向HBx的siRNA能特异性抑制HBx在HL-7702／HBx细胞中的表达，并降低细胞内ROS水平，提高AWm水平，减轻细胞内氧化应激反应。
- 黄嵘峰林纳陈红英陈治新王小众
- 关键词：病毒蛋白质类膜电位
- 乙肝病毒X蛋白对肝星状细胞的增殖及其表达TGFβ1和CTGF的影响
- 2013年
- 目的研究乙肝病毒X蛋白(HBx)对肝星状细胞(HSC)增殖的影响及其可能的分子机制。方法运用分子生物学方法构建稳定表达HBV X基因的HL-7702肝细胞株(L02/x)。RT-PCR、Western blot鉴定L02/x细胞HBV X基因的稳定表达。将HSC细胞分别与L02/x、转染空质粒和未转染的肝细胞共培养36h,分别命名为HSC/x、HSC/ctr和HSC/NC。CCK-8法检测各组HSC增殖,Real-time PCR法检测在HSC增殖中起重要作用的TGFβ1和CTGF基因在各组HSC中的mRNA表达。结果 RT-PCR和Western blot结果显示,L02/x细胞中有HBV X基因mRNA和蛋白的表达。CCK-8法检测显示,HSC/x的增殖(0.737 7±0.014 2)显著高于HSC/ctr(0.497 0±0.008 5)和HSC/NC(0.491 3±0.018 6),差别具有统计学意义(P<0.01)。Real-time PCR显示,HSC/x细胞中的TGFβ1和CTGF mRNA相对表达量(3.146 1±0.070 5,2.982 9±0.031 5)均显著高于HSC/ctr(1.004 6±0.004 0,1.022 2±0.062 7)和HSC/NC(1.000 0±0.000 0,1.000 0±0.000 0),差别具有统计学意义(P均<0.01)。结论肝细胞中表达的HBV X基因可以上调HSC细胞TGFβ1和CTGF基因的表达,促进共培养的HSC增殖。
- 陈红英陈治新王小众
- 关键词：病毒蛋白质类星形细胞即早蛋白质类
