李毅然
- 作品数：4 被引量：35H指数：3
- 供职机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划国家自然科学基金高等学校学科创新引智计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 柳树黄化病植原体的分子分类被引量：6
- 2009年
- 【目的】柳树黄化病是一种重要的植原体病害,本研究旨在明确柳树黄化病植原体(Willow Yellow phytoplasma,WY)的分类地位,为进一步开展致病性和防治研究奠定基础。【方法】采用植原体特异引物通过PCR方法从患病植株DNA中扩增植原体16S rDNA基因和核糖体蛋白基因(ribosomal proteins gene,rp),对所得的序列进行分析,构建同源进化树,并用限制性片段长度多态性(RFLP)对巢式PCR产物进行分析。【结果】首次从柳树黄化病植原体中分离出了16S rDNA基因和rp基因,大小分别为1246bp和1212bp。通过对植原体16S rDNA和rp基因的核苷酸同源性比较和RFLP分析,发现该分离物与16SrI组的核苷酸同源性均在99%以上,与16SrI-C亚组中的小麦蓝矮病植原体同源性高达99.8%(16SrDNA)和99.6%(rp),且RFLP分析与16SrI-C亚组的植原体有相同的酶切条带。【结论】柳树黄化植原体应划分于16SrI-C亚组。
- 魏婷吴云锋侯伟武科科李毅然张珏孙润红
- 关键词：RFLP分析核糖体蛋白巢式PCR
- 小麦3种病毒病BSMV、BYDV-PAV、WYMV及WBD植原体病害的多重PCR同步检测被引量：23
- 2008年
- 【目的】通过对检测小麦病毒病和植原体病害的多重PCR体系各成分和循环参数进行摸索和优化,建立了一种同时检测大麦条纹花叶病毒(barley stripe mosaic virus,BSMV)、大麦黄矮病毒PAV株系(barley yellow dwarfvirus,BYDV-PAV)、小麦黄花叶病毒(wheat yellow mosaicvirus,WYMV)和小麦蓝矮植原体(wheatbluedwarf,WBD)的多重PCR技术体系。【方法】运用根据3种病毒核苷酸保守区序列设计的特异性引物对、根据WBD植原体核糖体蛋白基因序列设计特异性引物对rpF1/R1,从影响多重PCR(M-PCR)扩增的引物浓度、Mg2+浓度、TaqDNA聚合酶浓度、dNTPs浓度、退火温度等方面进行多重PCR体系的优化。【结果】成功的在一个体系中对BSMV、BYDV-PAV、WYMV和WBD复合侵染的小麦材料进行多重PCR扩增,得到503、600、898、1240 bp 4条特异性大小与试验设计相符的条带,建立了同时检测4种病原的多重PCR体系。【结论】该体系实现了植原体DNA病原和病毒RNA病原的同时检测,体现了多重PCR的优越性。
- 岳红妮吴云锋李毅然魏婷侯伟武科科
- 关键词：小麦多重PCR植原体
- 植物源病毒抑制物WCT化学成分初步研究
- WCT为利用萃取,重结晶的方法从植物中提取出的一种天然抗病毒物质。生物活性较高,对动植物无毒,无残留。本研究对已知WCT的提取过程进行了优化并对该物质的部分理化性质进行了测定。发现在20-25℃恒温避光条件下,其容易有晶...
- 李毅然
- 关键词：WCT西瓜花叶病毒化学成分
- 文献传递
