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小麦3种病毒病BSMV、BYDV-PAV、WYMV及WBD植原体病害的多重PCR同步检测被引量：23: 2008年; 【目的】通过对检测小麦病毒病和植原体病害的多重PCR体系各成分和循环参数进行摸索和优化,建立了一种同时检测大麦条纹花叶病毒(barley stripe mosaic virus,BSMV)、大麦黄矮病毒PAV株系(barley yellow dwarfvirus,BYDV-PAV)、小麦黄花叶病毒(wheat yellow mosaicvirus,WYMV)和小麦蓝矮植原体(wheatbluedwarf,WBD)的多重PCR技术体系。【方法】运用根据3种病毒核苷酸保守区序列设计的特异性引物对、根据WBD植原体核糖体蛋白基因序列设计特异性引物对rpF1/R1,从影响多重PCR(M-PCR)扩增的引物浓度、Mg2+浓度、TaqDNA聚合酶浓度、dNTPs浓度、退火温度等方面进行多重PCR体系的优化。【结果】成功的在一个体系中对BSMV、BYDV-PAV、WYMV和WBD复合侵染的小麦材料进行多重PCR扩增,得到503、600、898、1240 bp 4条特异性大小与试验设计相符的条带,建立了同时检测4种病原的多重PCR体系。【结论】该体系实现了植原体DNA病原和病毒RNA病原的同时检测,体现了多重PCR的优越性。; 岳红妮吴云锋李毅然魏婷侯伟武科科; 关键词：小麦多重PCR 植原体

介体条沙叶蝉传播小麦蓝矮病植原体特性研究被引量：8: 2007年; 小麦蓝矮病植原体（wheat blue dwaH，WBD）属于翠菊黄化组三叶草绿变亚组植原体（16Sr I—C），由介体条沙叶蝉（Psammotettix striatus L）专化性传播。通过电镜超微结构观察，在接种小麦、长春花和带毒条沙叶蝉体内有大量植原体，而在健康植物组织、无毒条沙叶蝉和带毒条沙叶蝉所产卵中未见植原体的存在。通过介体传毒试验和PCR检测发现，条沙叶蝉最适获毒期为7d，植原体在虫体内的潜育期为15～17d，接毒期为2～3d。条沙叶蝉一旦获毒可终生持毒和传毒。不同虫态的条沙叶蝉带毒率没有明显的差异，但寄生植物的种类影响其带毒率。; 顾沛雯吴云锋武科科郝兴安; 关键词：小麦蓝矮病植原体条沙叶蝉传毒分子检测

甘蔗花叶病毒HC-Pro的GFP标记及其蚜传特性: 甘蔗花叶病毒（SCMV）是引起玉米矮花叶病的主要病原之一,也可以侵染甘蔗、高粱、谷子等禾本科作物和其它多种禾本科杂草。在自然条件下,依靠玉米蚜（Rhopalosiphum maidis （Fitch））、禾谷缢管蚜（Rh...; 武科科; 关键词：GFP 重叠延伸PCR; 文献传递

大麦黄矮病毒PAV株系的CP与GFP融合基因的构建和表达: 2010年; According to the published nucleotide sequences,CP gene of barley yellow dwarf virus PAV(BYDV-PAV) was synthesized by reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR).The reporter gene GFP was put to the downstream of whole CP gene sequence of BYDV-PAV after double enzyme digestion,PCR identification and sequencing.The green fluorescence protein expression system of coat protein of BYDV-PAV was successfully constructed and expressed in Escherichia coli BL21(DE3)plysS.The expression product was confirmed by SDS-PAGE,Western blot analysis and fluorescence microscope.The fusion gene CP-GFP was expressed in the range of 15-22℃,but could not be expressed at 23-37℃.The results provided a base for studying on BYDV-PAV movement in aphid further.; 孙润红吴云锋张银武魏婷武科科赵震杨洋; 关键词：大麦黄矮病毒融合基因株系 GFP 病毒性病害 CP

小麦蓝矮病植原体核糖体蛋白rpl22和rps3的生物信息学分析被引量：3: 2010年; 【目的】将生物信息学方法应用于小麦蓝矮病植原体(WBD)的分类研究,确定了小麦蓝矮病植原体的分类地位。【方法】应用植原体核糖体蛋白(rp)基因通用引物对rpF1/rpR1,对WBD进行PCR扩增并得到特异片段,对特异片段进行测定及同源性分析。【结果】序列测定结果表明,WBDrp基因片段长1 240 bp,包含部分rps19基因和全部的rpl22和rps3基因,且后2个基因为重叠基因,分别编码129和252个氨基酸,rpl22和rps3蛋白的等电点分别为12.605和11.755。【结论】WBD与16SrⅠ-C亚组中三叶草绿变病(Clover phyllody)的KVE、KVG、CPh株系亲缘关系最近,核苷酸同源性依次为99.7%,99.6%和99.0%,WBD与KVE株系的rpl22和rps3基因编码的氨基酸同源性分别为100%和98%,因此将小麦蓝矮病植原体划归到16SrⅠ-C亚组。; 吴宽颜永杰李蓓武科科; 关键词：小麦蓝矮病植原体生物信息学核糖体蛋白

柳树黄化病植原体的分子分类被引量：6: 2009年; 【目的】柳树黄化病是一种重要的植原体病害,本研究旨在明确柳树黄化病植原体(Willow Yellow phytoplasma,WY)的分类地位,为进一步开展致病性和防治研究奠定基础。【方法】采用植原体特异引物通过PCR方法从患病植株DNA中扩增植原体16S rDNA基因和核糖体蛋白基因(ribosomal proteins gene,rp),对所得的序列进行分析,构建同源进化树,并用限制性片段长度多态性(RFLP)对巢式PCR产物进行分析。【结果】首次从柳树黄化病植原体中分离出了16S rDNA基因和rp基因,大小分别为1246bp和1212bp。通过对植原体16S rDNA和rp基因的核苷酸同源性比较和RFLP分析,发现该分离物与16SrI组的核苷酸同源性均在99%以上,与16SrI-C亚组中的小麦蓝矮病植原体同源性高达99.8%(16SrDNA)和99.6%(rp),且RFLP分析与16SrI-C亚组的植原体有相同的酶切条带。【结论】柳树黄化植原体应划分于16SrI-C亚组。; 魏婷吴云锋侯伟武科科李毅然张珏孙润红; 关键词：RFLP分析核糖体蛋白巢式PCR

禾谷缢管蚜体内与传播WYDV-GPV相关的蛋白的筛选和鉴定: 小麦病毒病是全球冬小麦产区小麦上经常发生的一类重要病害，由黄矮病毒（yellowdwarf viruses，YDVs）单一侵染或混合侵染引起。黄矮病毒经由多种麦蚜以持久型方式传播。病毒-蚜虫的互作关系成为病毒-蚜虫-小麦...; 武科科; 关键词：禾谷缢管蚜酵母双杂交免疫共沉淀; 文献传递

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