刘大飞
- 作品数:85 被引量:206H指数:8
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划黑龙江省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- Ⅰ型犬腺病毒弱毒疫苗株及其应用
- 本发明公开了I型犬腺病毒弱毒疫苗株及其应用。本发明将所分离的I型犬腺病毒强毒株在MDCK上传代、克隆,培育了致弱毒株(CAV-HR),安全性和免疫原性试验结果表明,本发明的弱毒株CAV-HR株对同源强毒攻击的犬可以提供很...
- 刘大飞张洪英曲连东王牟平刘立奎
- 文献传递
- SLA-1不同等位基因与病毒CTLs表位特异性结合的研究
- 高彩霞姜骞刘家森郭东春刘大飞刘春国李志杰仇铮田进曲连东
- 用于可视化检测猪瘟病毒野毒株的RT-LAMP引物
- 本发明公开了一套用于可视化检测猪瘟病毒野毒株的RT-LAMP引物,所述RT-LAMP引物由一对外围引物和一对内引物组成,其中,这一对外围引物的序列为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示,一对内引物的序列分别...
- 仇华吉张兴娟孙元刘大飞
- 文献传递
- 用于犬瘟热病毒野毒株与疫苗株鉴别诊断RT-LAMP检测引物及其应用
- 本发明公开了一套用于区分犬瘟热病毒野毒株与疫苗株的RT-LAMP引物及其应用,所述RT-LAMP引物包括一对外引物和一对内引物,其中,外引物的序列为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示;内引物的序列分别为S...
- 刘大飞张洪英曲连东戚亭刘春国
- 北方地区犬细小病毒分离鉴定与VP2基因序列分析
- 犬细小病毒(CPv)是一种感染犬和野生犬科动物而导致急性接触性传染病的重要病原,对中国乃至世界的养犬业造成了较大的危害,为此在初生幼犬的免疫程序中免疫犬细小病毒病是必不可少的.
本研究旨在探讨犬细小病毒(CPV...
- 仇铮张晓战李志杰刘大飞刘春国郭冬春刘培欣田进曲连东
- 关键词:犬细小病毒基因序列
- 文献传递
- 同时检测犬瘟热病毒和犬细小病毒双重PCR方法的建立被引量:7
- 2012年
- 为建立可以同时检测犬瘟热病毒(CDV)和犬细小病毒(CPV)的双重PCR方法,本研究根据GenBank登录的CDV N蛋白序列和CPV NS基因保守序列,设计合成2对特异性引物。通过优化反应条件,对CDV阳性病毒株反转录后的cDNA模板和CPV的DNA模板进行双重PCR扩增,同时得到2条与试验设计相符的669 bp(CDV)和392 bp(CPV)特异性条带,建立了同时检测CDV和CPV的双重PCR方法。实验结果表明:在同一PCR反应体系中可以同时检测这2种病毒,而对犬腺病毒Ⅰ型、犬腺病毒Ⅱ型、狂犬病毒检测均为阴性;CDV和CPV的最低检出限分别为101.8TCID50和101.4TCID50。采用该方法对在黑龙江省不同地区所采集的30份犬病料样品进行检测,CDV阳性率为30%;CPV阳性率为23.33%,表明建立的PCR方法可以用于临床诊断。
- 刘大飞姜一曈杨天阔林欢刘春国柴洪亮王翀崔英玲姜晓飞马旭青刘大程华育平曲连东张洪英
- 关键词:犬瘟热病毒犬细小病毒聚合酶链式反应
- 猪、鸡与貂源肠外致病性大肠杆菌群型、耐药性与致病性分析被引量:16
- 2018年
- 为检测不同动物源肠外致病性大肠杆菌(ExPEC)的耐药及致病性差异,本研究从132份鸡、猪和水貂等动物肠道外组织中分离鉴定大肠杆菌,并对分离菌株进行了16S rRNA基因测序、毒力基因检测、药敏试验、O抗原鉴定、系统进化群分析及动物致病性试验。实验结果显示:分离出53株ExPEC,且至少携带特异性毒力基因pap、sfa/foc、afa/dra、iutA、kpsMTII中的两种基因,并携带fimH、ibeA、hlyA、malX、iss、iroN等其它相关毒力基因。53株ExPEC分离株对氯霉素、卡那霉素、头孢噻吩、四环素、多粘菌素B、氨苄青霉素等呈现不同程度的多重耐药性;O抗原主要分布于O1、O2、O8、O11、O38、O78、O120血清型;系统进化群分析结果显示:28株属于A群,19株属于B1群,1株为B2群,5株属于D群。选取20株ExPEC分离菌株按照6×10~6cfu/只对小鼠进行腹腔注射,验证其致病性;并测定ExPEC6、ExPEC42、ExPEC52、ExPEC53菌株对BALB/c小鼠的LD_(50),其结果分别为3.49×10~6cfu/mL、9.49×10~5cfu/mL、9.48×10~6cfu/mL、2.38×10~7cfu/mL。本研究为动物源性ExPEC的预防诊断提供依据,并为下一步研究其致病机理等奠定基础。
- 许腾林邢桂玲姜成刚刘家森刘大飞姜骞李志杰康洪涛郭东春曲连东
- 关键词:耐药性
- H1亚型猪流感病毒血凝素基因在昆虫细胞中的表达及其间接ELISA方法的初步建立被引量:9
- 2008年
- 根据GenBank发表的H1亚型猪流感HA基因序列设计引物,扩增出HA基因片段,将其克隆到pFastBacGP67B杆状病毒载体上,筛选阳性重组转座载体pFastBacGP67B-H1,转化含有杆状病毒穿梭载体(bacmid)的DH10Bac感受态细胞,构建杆状病毒表达载体获得重组转座子(rBacmid-H1),在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒(rBV-H1),再感染细胞,收获目的蛋白。通过血凝试验、免疫印迹法、免疫组化分析表明该蛋白得到表达,且具有良好的生物学活性。利用表达的蛋白作为猪流感间接ELISA的抗原,初步建立H1亚型猪流感的间接ELISA检测方法,并对内蒙古、辽宁和黑龙江等地送检的93份猪血清进行了检测,阳性率为31.18%,为研制开发快速、准确、简便的H1亚型猪流感鉴别诊断试剂盒奠定基础。
- 万春和刘明刘春国张晓霁杨涛刘大飞陈浩齐金龙乔传玲
- 关键词:血凝素基因间接ELISA
- 猪流感疫苗的研究进展
- 2009年
- 猪流感(swine influenza,SI)是由流感病毒引起的一种严重呼吸道疾病,临床以突发、高热、咳嗽、呼吸困难、衰竭、高发病率、低死亡率为特征。迄今已发现的A型猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)有H1N1、H1N2、H1N7、H3N1、H3N2、 H3N3、H3N6、H4N6、H5N1和H9N2等10种不同血清亚型。自被发现以来,猪流感已成为严重危害猪群的疾病之一,已遍及亚洲、欧洲、非洲、南美洲、北美洲等,可谓全球流行。目前,世界范围内流行的猪流感血清型主要有人源H3N2、经典猪H1N1和类禽源H1N13种。
- 刘大飞刘明刘春国杨涛刘大程
- 关键词:猪流感病毒流感疫苗血清亚型H9N2H5N1
- 一种鉴别空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌双重PCR引物及其鉴别方法
- 一种鉴别空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌双重PCR引物及其鉴别方法,它涉及一种双重PCR引物及其检测方法。本发明的引物为:hipOF?ATCAACATTGCGAGATAC;hipOR?TAGACTTACAAGGCGAAT;cd...
- 郭东春曲连东刘家森刘春国刘大飞
- 文献传递