李艳
- 作品数：11 被引量：13H指数：3
- 供职机构：复旦大学上海医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中华医学会医学教育分会医学教育研究立项课题上海市教育发展基金会“曙光计划”项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 预防与临床医学本科生学习策略实验研究
- 2021年
- 为了比较预防和临床医学本科生在学习组织胚胎学时采用的学习策略是否有差异,两组采用相同教学方案,收集与分析学生成绩、慕课资源使用情况和调查问卷。结果表明预防组学生比临床组学生欠缺分析归纳的策略、较少使用课外资源和偏好于合作学习策略。
- 李艳
- 受损视网膜细胞的再生修复研究
- 2021年
- 院视网膜属于中枢神经组织,是视觉功能的核心结构,受损之后难以再生。通过激活内在干细胞潜能,或移植外源性细胞,为受损视网膜的再生修复带来了希望。课题组前期研究证实大鼠Müller细胞具有干细胞潜能,并能分化为视细胞和内核层细胞,但分化细胞数量非常有限。为此,本研究开展了人胚胎干细胞诱导分化及移植研究。研究发现人胚胎干细胞在体外能诱导分化形成视网膜类器官,不仅具有视网膜的分层结构,还分化出RPE、视细胞、内核层细胞、节细胞和Müller细胞等细胞的前体细胞。
- 周国民周国民王晓冰王松涛顾丹丹熊凯郑华李艳马丽香张帅郑华
- 关键词：视网膜细胞中枢神经组织视细胞人胚胎干细胞再生修复
- bFGF诱导人胚视网膜色素上皮细胞转分化的研究被引量：3
- 2007年
- 目的探讨bFGF体外诱导早期人胚视网膜色素上皮(RPE)细胞转分化现象及其分子机制,为视网膜发育的进一步基础研究和临床RPE细胞移植奠定基础。方法取4~6代人胚(6w^10w)RPE细胞,bFGF(20 ng/ml)诱导培养(4 d^6 d)后观察RPE细胞形态学的改变,用免疫细胞化学作转分化RPE细胞鉴定。RT-PCR分析转分化RPE细胞小眼畸形基因(MITF)的表达。结果bFGF诱导培养后的人胚RPE细胞呈现类神经样细胞表型,不仅表达自身上皮细胞标记物角蛋白(Keratin),同时还表达多种神经视网膜上皮细胞标记物(MAP2、GS、GFAP、Peripherin、Opsin,但不表达NCAM);用RT-PCR方法没有检测到转分化RPE细胞MITF-A mRNA表达。结论早期人胚RPE细胞的发育具有一定的可塑性,bFGF可以诱导早期人胚RPE细胞表达多种神经视网膜上皮细胞标记物,可能是通过抑制MITF-A的分子信号通路。
- 高静琰靳磊李艳佘振珏周国民
- 关键词：人胚视网膜色素上皮转分化
- 胚胎大鼠视网膜超微结构与Nestin表达的增龄变化被引量：4
- 2004年
- 目的 研究在体视网膜祖细胞分布及分化发育规律。方法 运用透射电镜观察E18(E :胚胎 )视网膜超微结构 ,采用免疫组化了解Nestin在不同发育时期视网膜的表达变化。结果 E18视网膜超微结构 :①在神经母细胞层中、外侧 ,大多数细胞核浆比例大 ,核呈纺锤形或椭圆形 ,染色较深 ,常染色质细小 ,异染色质少 ,胞质内含丰富核糖体及少量线粒体。②在近巩膜侧的神经母细胞层可见有丝分裂细胞。 2 .Nestin表达丰富的部位主要集中在E16和E18的神经母细胞层 ;P4和P7(P :出生后 )发育期内网层和神经纤维层 ,但在P2 1,Nestin在视网膜包括睫状体边缘区均呈阴性。结论 1.E18视网膜祖细胞主要位于神经母细胞层。 2 .Nestin阳性细胞产生视网膜细胞的顺序是先产生节细胞 ,感光细胞和内核层细胞次之 ,最后为米勒细胞。
- 李艳佘振珏俞彰周国民
- 关键词：超微结构巢蛋白
- 视网膜干细胞研究
- 作为中枢神经系统的一部分,视网膜具有明确界限、高度有序的结构、包含较少基本类型细胞,常被作为研究中枢神经系统发育的模型。视网膜祖细胞存在于所有脊椎动物胚胎时期视杯的上皮细胞中,具有增殖,自我更新和多向分化的潜能,在低等动...
- 周国民万瑾李艳胡宝洋刘坤靳磊
- 文献传递
- 早期人胚胎视网膜色素上皮细胞的体外培养及生物学特性被引量：4
- 2007年
- 目的探索早期人胚视网膜色素上皮(RPE)细胞体外培养以获得高纯度的RPE细胞的方法,并进一步研究其生物学特性。方法取意外流产4h以内人胚(6～10周)眼球,通过混合酶消化法获取RPE细胞。用F12培养液体外培养并作细胞形态学、S-100和Keratin免疫组织化学鉴定;通过Trizol一步法提取总RNA,逆转录聚合酶反应(RT-PCR)分析体外培养RPE细胞酪氨酸酶基因的表达。结果用F12培养液可获得纯度高、活性好的人胚RPE细胞;体外培养的RPE细胞不表达酪氨酸酶基因。结论早期人胚RPE细胞具有在体RPE细胞的部分特征;体外培养的RPE细胞未检测到酪氨酸酶RNA表达,故随着细胞分裂增殖,色素颗粒逐渐减少,提示体内外RPE细胞在功能上存在某些差异。
- 高静琰靳磊李艳佘振珏周国民
- 关键词：人胚胎视网膜酪氨酸酶生物学特性
- 大鼠胚胎视网膜祖细胞分离培养及其分化特性被引量：3
- 2005年
- 目的:建立大鼠胚胎视网膜祖细胞体外培养方法并观察其分化特性。方法:取孕18d大鼠胚胎,用无血清培养技术扩增视网膜祖细胞;用免疫细胞化学、扫描电镜与透射电镜技术对祖细胞的特性及诱导分化的细胞类型进行鉴定。结果:从胚胎大鼠视网膜神经部分离的细胞具有增殖能力,可进行传代培养,获得的细胞球能表达Nestin并具有掺入BrdU的能力。诱导分化后的细胞表达,其中,Thy1.1+细胞最多,Opsin+细胞次之,GS+细胞较少,PKC+细胞少,Syntaxin+及Peripherin+细胞极少,不表达CalbindinD28K。结论:从胚胎大鼠分离的细胞具有自我增殖能力和多向分化潜能,属于视网膜祖细胞;诱导分化产生5种视网膜细胞,以节细胞最多,未见水平细胞。
- 李艳佘振珏周国民
- 关键词：大鼠胚胎细胞分离培养CALBINDIN胚胎大鼠视网膜神经
- BMP-4在视网膜与视神经中的分布及对少突胶质前体细胞分化的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:研究骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein4,BMP-4)在视网膜与视神经上的表达情况及其对少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)分化的影响,进一步探讨视神经乳头处无髓鞘形成的原因。方法:取生后7d SD大鼠视神经,用免疫组织化学方法研究BMP-4的表达情况。采用恒温振荡法和差速贴壁法分离纯化新生SD大鼠OPCs。用BMP-4诱导OPCs分化,通过免疫细胞化学方法研究OPCs的分化方向。通过Western Blot方法研究BMP-4浓度与OPCs细胞体系内Olig2蛋白表达水平之间的相互关系。结果:(1)在发育过程中,BMP-4仅选择性表达在视神经乳头处;(2)成功纯化的OPCs在PDGF和bFGF撤除后自发分化为少突胶质细胞;(3)OPCs经BMP-4诱导后向II型星形胶质细胞分化;(4)OPCs内Olig2蛋白的表达量随着BMP-4浓度的逐渐增高而逐渐降低。结论:在视神经乳头表达的BMP-4蛋白有可能作用于迁移至此处的OPCs,通过激活相关信号途径以下调OPCs内Olig2蛋白的表达水平,抑制OPCs向少突胶质细胞方向分化,从而抑制视神经乳头髓鞘形成。
- 刘培培陈园园郑华李艳佘振珏肖虹蕾周国民
- 关键词：BMP-4少突胶质前体细胞OLIG2视神经乳头
- 纤溶酶原激活剂及其相关分子在小鼠视神经损伤再生中的变化
- 2010年
- 目的:检测细胞外基质(ECM)中各蛋白酶在视神经损伤后的变化,分析ECM蛋白酶活性的变化与小鼠视神经损伤和损伤后再生之间的关系。方法:本实验采用建立小鼠视神经钳夹伤的动物模型,用WesternBlot方法检测小鼠视神经损伤后不同时间点神经丝(NF)、金属基质蛋白酶-9(MMP-9)、IgG的表达变化。同时采用原位酶谱分析法检测纤溶酶原激活剂(PA)活性在视神经损伤后各阶段的变化,并分析这种变化与纤维蛋白(原)沉积、髓鞘碎片清除等影响神经再生的因素之间的关系。结果:小鼠视神经损伤后发生进行性Wallerian变性,血-神经屏障(BNB)修复迟缓,沉积的纤维蛋白(原)于损伤后第2d清除。MMP-9在损伤后2d达到高峰,以后仍呈现高水平的表达,且均以前体形式出现。PA活性在损伤后第7d达到高峰,并持续至第28d。结论:视神经损伤后,损伤部位BNB重建、PA激活、纤维蛋白(原)的清除以及MMP-9的表达与周围神经截然不同,正是由于微环境的迥然差异,导致了中枢神经系统(CNS)髓鞘碎片清除不利、轴突再生障碍。
- 陈园园刘丽芸刘培培李艳肖虹蕾佘振珏陈祖林周国民
- 关键词：纤溶酶原激活剂视神经华勒变性金属基质蛋白酶-9
- 视网膜祖细胞分离培养及鉴定
- 2004年
- 目的：探讨体外胚胎视网膜祖细胞的增殖与分化特性。方法：运用无血清培养技术，从培养第2～3代后的神经干细胞，按Lipofeefin?Reagent转染试剂盒的步骤，将CDK5-EGFP重组子和pEGFP-N1空载体分别转染进神经干细胞集落内，24h后加入5％胎牛血清，继续培养。于24h、48h、72h分别观察两组分化神经细胞的形态特征并计算细胞的突起长度。
- 李艳佘振珏周国民
- 关键词：祖细胞神经干细胞集落CDK5重组子EGFP
