焦德敏
- 作品数：21 被引量：136H指数：8
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- Rac1-siRNA表达载体调控细胞骨架对肺癌细胞侵袭和转移的影响
- 陈清勇施建国焦德敏王剑吴玉泉严杰吴丽君宋嘉王立峰
- 肺癌是呼吸系统中最为常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率也逐年增高。肿瘤的侵袭和转移是包括肺癌在内的恶性肿瘤最具特征性的生物学行为，也是影响患者预后、治疗效果和生活质量的重要原因之一，因该研究恶性肿瘤的侵袭和转移的机制是...
- 关键词：
- 关键词：肺癌细胞侵袭转移肿瘤治疗
- 姜黄素下调mTOR诱导人肺癌A549细胞自噬的研究被引量：15
- 2014年
- [目的]研究姜黄素诱导人肺癌A549细胞自噬现象及与哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的关系。[方法]采用CCK-8法检测姜黄素对A549细胞增殖的抑制作用;采用吖啶橙染色(AO)及转染GFP-LC3质粒荧光显微镜下观察姜黄素处理后A549细胞的自噬现象;采用Western blot法检测微管相关蛋白轻链Ⅱ(LC3Ⅱ)、微管相关蛋白轻链Ⅰ(LC3Ⅰ)、mTOR表达的变化。[结果]姜黄素对人肺癌A549细胞增殖有明显抑制作用,且成明显的剂量—时间依赖关系。AO染色结果显示,与对照组相比,姜黄素40μmol/L组及Rapa组细胞内酸性滤泡染成亮红色荧光比例增多;与姜黄素40μmol/L组相比,姜黄素40μmol/L+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组及3-MA组亮红色荧光比例下降。细胞转染GFP-LC3后姜黄素40μmol/L组和Rapa组胞浆内点状的绿色荧光斑点明显;与姜黄素40μmol/L组相比,姜黄素40μmol/L+3-MA组及3-MA组胞浆内点状的绿色荧光斑点明显比例有所下降。Western blot法检测结果显示,与对照组相比,姜黄素40μmol/L组作用24h后,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达显著升高(P<0.05),姜黄素40μmol/L+3-MA组LC3Ⅱ/LC3-Ⅰ表达低于姜黄素40μmol/L组(P<0.05)。姜黄素40μmol/L组mTOR表达显著下降(P<0.01),姜黄素40μmol/L+3-MA组mTOR表达高于姜黄素40μmol/L组(P<0.05)。[结论]姜黄素能够明显抑制A549细胞增殖并诱导A549细胞发生自噬,同时还能够明显抑制mTOR蛋白的表达水平,其机理可能与mTOR的信号通路有关。
- 何聪陈清勇王剑唐夏莉焦德敏
- 关键词：姜黄素哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
- 抑制Rho亚家族和埃兹蛋白表达对肺癌细胞侵袭转移和微丝骨架的影响及相关机理研究
- 陈清勇施建国王立峰吴玉泉徐炜焦德敏王剑宋嘉严杰吴丽君
- 肺癌的侵袭转移是受多因素调控的复杂过程，涉及肿瘤细胞恶性增殖、肿瘤组织新生血管形成、肿瘤细胞粘附分泌蛋白降解基质及肿瘤细胞迁移运动、逃避免疫监视等一系列过程，其中Rho亚家族(Rac1和Cdc42)及其下游分子(PAK-...
- 关键词：
- 关键词：肺癌细胞侵袭转移细胞增殖基因表达
- LIMK-1/cofilin在姜黄素抑制人肺癌细胞增殖和转移中的作用被引量：14
- 2014年
- 目的探讨姜黄素对人肺癌细胞株(801D)增殖和转移的影响,并通过检测姜黄素对细胞内LIMK-1/cofilin蛋白表达及细胞骨架重组的影响,揭示LIMK-1/cofilin在姜黄素抑制肺癌转移中的作用。方法应用MTT法检测姜黄素对人肺癌细胞株增殖能力的影响,体外侵袭实验和迁移实验观察姜黄素对肺癌细胞转移能力的影响。Western blot法检测姜黄素对与细胞骨架重组相关的LIMK-1/cofilin及磷酸化LIMK-1/cofilin蛋白表达的影响。激光共聚焦扫描显微镜观察姜黄素对细胞骨架重组的影响。结果姜黄素能够抑制人肺癌细胞801D增殖,抑制率均随处理浓度增大和作用时间延长而增加。与对照组比较,10μmol/L、20μmol/L的姜黄素处理24小时后的801D细胞体外侵袭和迁移能力均显著下降(P<0.01)。姜黄素能显著下调LIMK-1/cofilin蛋白的磷酸化水平(P<0.05),并能影响细胞内微丝骨架的结构和分布。结论姜黄素抑制肺癌细胞体外增殖和转移能力与姜黄素调控LIMK-1/cofilin信号通路与肺癌细胞微丝骨架结构有关。
- 徐炜陈清勇陈方园焦德敏
- 关键词：肺肿瘤肿瘤转移姜黄素COFILIN微丝骨架
- 自噬在姜黄素诱导人肺癌细胞凋亡中的作用及相关机理研究
- 陈清勇马炬明施建国徐立群焦德敏宋嘉严杰吴丽君王剑
- 该研究旨在明确在姜黄素处理的肺癌A549细胞过程中是否存在着自噬现象，研究自噬在姜黄素诱导A549细胞凋亡中的作用，并探讨该相关的作用机制。通过该课题的研究不但可以更深入的了解自噬与肿瘤的发生和发展的相关性，并且可为肿瘤...
- 关键词：
- 关键词：肺癌细胞凋亡姜黄素肿瘤治疗天然药物
- RNA干扰c-Met基因表达对非小细胞肺癌侵袭和迁移及顺铂敏感性的影响被引量：2
- 2014年
- [目的]研究c-Met基因干扰后对肺癌细胞株95D侵袭、迁移能力和化疗药物敏感性的影响。[方法]分别采用免疫组化SP法和Western Blot技术检测肺癌组织及不同肺癌细胞株中Met蛋白的表达情况。将c-Met shRNA质粒转染人肺癌细胞株95D,通过Western Blot检测转染效率;Transwell小室和划痕愈合实验测定细胞体外侵袭和迁移能力;四甲基偶氮唑法(MTT法)检测细胞的增殖情况及顺铂敏感性。[结果]Met蛋白在NSCLC组织中的表达明显高于癌旁正常组织,同时高侵袭性的肺癌细胞株(95D、801D)中Met蛋白的表达也较高。c-Met基因干扰能明显降低95D细胞的侵袭和迁移能力,并显著提高其对顺铂的敏感性。[结论]c-Met基因可作为一个重要的靶点应用于非小细胞肺癌治疗。
- 沈青徐立群陈清勇焦德敏
- 关键词：RNA干扰顺铂
- 阿尔茨海默病患者血清miR-19b-3p表达与认知功能的关系被引量：9
- 2017年
- 目的探索阿尔茨海默病（Alzheimer’sdisease，AD）患者血清差异表达的miRNAs及其与认知功能的关系。方法采用Illumina／Solexa高通量测序技术分析AD患者和健康体检老年人两组（各30例）血清miRNA表达谱；构建miRNA慢病毒质粒，注射至造模成功的AD大鼠静脉内，采用水迷宫实验分析大鼠的认知功能；合成miRNA模拟剂（nfimics）、抑制剂（inhibitor），转染至SH—SY5Y细胞系中，采用Westernblot法检测细胞中β-淀粉样前体蛋白裂解酶1（BACEl）的表达。结果与正常对照组（contr01）相比，AD组血清中miR-146a-5p（10g2AD／Control=2．3）、miR-195—5p（10g2AD／Con-trol=10．2）、miR-20b-5p（10g，AD／Control=15．1）表达上调，miR-19b-3p（10g2AD／Control=-8．0）、miR-125b-3p（10g，AD／Control=-153）表达下调，差异有统计学意义（P〈0．05）；与AD组[（26．50±3．12）s]相比，AD＋miR-19b-3p组[（15．33±2．78）S]的大鼠逃避潜伏期明显缩短，差异具有统计学意义（P〈0．05）；与正常对照相比，miR-19b-3p模拟剂组BACEl蛋白表达减少，抑制剂组BACEl蛋白表达增加。结论nliR-19b-3p可能通过调节BACEl的表达改善AD患者的认知功能。
- 徐静吴玉泉许娟戴毅焦德敏胡金华陈晓娜
- 关键词：阿尔茨海默病血清
- 上调miR-125a对肺癌A549细胞凋亡的影响及其机制研究被引量：2
- 2013年
- 目的探讨上调microRNA-125a(miR-125a)对肺癌A549细胞凋亡的影响及可能机制。方法人工合成miR-125a基因序列,将miR-125a基因克隆至真核表达载体pGenesil-1质粒,构建重组质粒pGenesil-miR-125a,同时设计并构建阴性对照质粒pGenesil-control。将以上载体经脂质体介导转染肺癌A549细胞并分为3组:成功转染pGenesil-miR-125a的A549细胞(A549-miR-125a组),成功转染pGenesil-control的A549细胞(A549-control组),以及未进行转染的A549细胞(A549组)。采用实时定量PCR技术(QPCR)检测各组细胞的miR-125a表达水平,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫印迹法检测p53基因的蛋白水平。结果经酶切和测序鉴定证明pGenesil-miR-125a重组质粒构建成功。A549-miR-125a组的miR-125a水平为2.72±0.41,高于A549-control组的0.97±0.16和A549组的0.96±0.11(P<0.01);A549-miR-125a组的细胞凋亡率为(31.04±2.48)%,高于A549-control组的(6.91±0.72)%和A549组的(6.73±0.56)%(P<0.05);A549-miR-125a组的p53蛋白水平为3.91±0.46,高于A549-control组的1.01±0.06和A549组的0.99±0.04(P<0.01)。结论上调miR-125a可促进肺癌细胞的凋亡,提示其在肺癌的发生、发展中有重要作用,可能的机制是上调p53的蛋白表达。
- 胡金华吴玉泉陈清勇赵园园焦德敏
- 关键词：肺癌P53细胞凋亡
- 埃兹蛋白的表达与非小细胞肺癌转移和预后的关系被引量：18
- 2012年
- 目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）组织和不同转移潜能肺癌细胞系中埃兹蛋白（ezrin）的表达，以及NSCLC组织中ezrin与E-钙黏蛋白（E—cadherin）和CD44V6蛋白表达之间的关系。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Westernblot法，检测不同肺癌细胞系中ezrinmRNA和蛋白的表达水平。采用免疫组织化学SP法，检测150例NSCLC组织中ezrin、E-cadherin和CD44V6蛋白的表达，并联合应用Westernblot法对30例新鲜NSCLC组织及相应癌旁正常组织中ezrin蛋白的表达进行分析。结果高转移性肺癌细胞系中ezrinmRNA和蛋白的表达明显高于低转移性肺癌细胞系。150例NSCLC组织中，ezrin、E—cadherin和CD44V6蛋白的阳性表达率分别为61．3％、54．0％和58．7％。ezrin蛋白的表达与NSCLC患者的性别、年龄、肿瘤大小、组织类型、临床分期以及病理分级均无关（均P〉0．05），仅与淋巴结转移情况有关（r=9．013，P〈0．01）。Westernblot检测结果显示，ezrin蛋白在30例新鲜NSCLC组织中的相对表达量为1．12±0．41，明显高于相应的癌旁正常组织（0．61±0．28，P〈0．01）。ezrin蛋白阴性表达患者的5年生存率为29．3％，明显高于ezrin蛋白阳性表达患者（15．2％，P=0．042）。Cox多因素分析的结果显示，淋巴结转移和ezrin蛋白的表达是影响NSCLC患者预后的危险因素（均P〈0．05）。ezrin蛋白在NSCLC组织中的表达与E-cadherin蛋白的表达呈负相关，与CD44V6蛋白的表达呈正相关（均P〈0．05）。结论ezrin、E-eadherin和CD44V6在NSCLC的生长和转移过程中发挥着重要的调控作用，联合检测ezrin、E-eadherin和CD44V6蛋白的表达可作为判断NSCLC转移和预后的重要生物学指标。
- 陈清勇严杰胡慧珍陈方园宋嘉江中勇焦德敏吴玉泉
- 关键词：埃兹蛋白E-钙黏蛋白CD44V6预后
- 肿瘤转移相关因子在肺癌侵袭转移作用中的系列研究
- 陈清勇吴玉泉徐立群周建英焦德敏胡慧珍严杰詹建伟江中勇宋嘉方睿
- 该研究的核心内容《肿瘤转移相关因子在肺癌侵袭转移作用中的系列研究》，属于临床应用基础研究，主要是应用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪免疫荧光标记法、免疫组织化学法、小干扰RNA技术、酶免疫法等方法系统地研究了组织蛋白酶家族、...
- 关键词：
- 关键词：肺癌肿瘤转移肿瘤诊断
