余泽华
- 作品数：40 被引量：121H指数：5
- 供职机构：华中师范大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 棉铃虫核多角体病毒泛素基因的克隆表达及抗体制备被引量：4
- 2005年
- 昆虫杆状病毒和痘病毒是目前已知唯一编码泛素基因的病毒。通过PCR方法,克隆了棉铃虫核多角体病毒(HaSNPV)泛素基因(Ubiquitin,Ubi)。序列分析表明,该基因编码区全长252bp,编码83个氨基酸残基,预计分子量为9.24kDa。将泛素基因克隆到原核表达载体pET28a上,构建重组质粒pETUbi,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,IPTG诱导表达融合蛋白。用Histag抗体检测目的蛋白,Westenblot实验证明所表达的蛋白是带有Histag的重组融合蛋白。通过改变IPTG浓度和诱导时间对表达条件进行了优化。利用NI琼脂糖凝胶亲和层析柱纯化目的蛋白,SDSPAGE鉴定为单一条带,同时用提纯蛋白制备了特异性抗体,为进一步的研究打下基础。
- 李京京姚青杨东叶余泽华陈新文
- 关键词：棉铃虫核多角体病毒泛素克隆原核表达抗血清
- 对虾白斑症病毒体内外感染的研究被引量：4
- 2001年
- WSSV可经注射、投喂或共居感染克氏螯虾和日本沼虾 ,病毒感染的组织匀浆物注射后发病很快 ,但蔗糖介质纯化的 WSSV注射后发病较慢 ,Ficoll-4 0 0介质纯化的 WSSV注射后发病时间介于前二者之间 .中国对虾细胞内 WSSV一般每个囊膜只含一个核衣壳 ,但此毒种经克氏螯虾反复增殖后 ,多粒包埋的病毒粒子明显增多 .从病虾的每克鳃可提出约 0 .66mg的 WSSV.含WSSV的血淋巴或组织匀浆液感染 8种昆虫细胞后 ,传代
- 余泽华刘凯于杨凯王家坤虢华珊邱宝国姚汉超陈曲侯
- 关键词：对虾白斑症病毒WSSV体外感染发病情况
- 泛素化途径与细胞周期的关系被引量：9
- 2003年
- 泛素化途径(the ubiquitin pathway)是一种有高度选择性的蛋白水解途径,是细胞周期调控的基础。本文主要论述了依赖 SCF(skp-cullin-F-box protein)和APC/C(anaphase-promoting complexor cyclosome)的两种泛素化途径对细胞周期不同时期的调控作用及其研究进展。
- 周蕊余泽华
- 关键词：细胞周期SCFAPC/C
- 肌动蛋白抑制了杆状病毒多角体蛋白基因的转录与表达被引量：1
- 2005年
- 为进一步研究肌动蛋白在杆状病毒感染晚期的作用,利用Bac-to-Bac系统构建了表达多角体基因、肌动蛋白与绿色荧光蛋白融合基因的重组病毒vAc-ph/70GA,同时构建对照病毒vAc-ph.实验发现,重组病毒vAc-ph/70GA感染Sf9细胞后能持续表达肌动蛋白,但不能形成多角体,vAc-ph则能形成多角体.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示,vAc-ph/70GA感染晚期,细胞内没有多角体蛋白的表达;RT-PCR的结果进一步表明多角体基因的转录被抑制.肌动蛋白的表达并没有影响vAc-ph/70GA对细胞的感染力.结果表明,晚期表达的外源肌动蛋白抑制了多角体基因的转录和表达,从而导致多角体不能正常产生.
- 贾蕴莉余泽华陈新文
- 关键词：肌动蛋白多角体
- 昆虫细胞系的建立
- 陈曲候李琮池刘秉正王家坤余泽华姚汉
- 该校于１９７５年开始进行昆虫细胞培养工作，先后对棉铃虫等不同昆虫的蛹、卵、成虫卵巢等组织进行了原代培养，先后建成了中国棉铃虫、黄条行军虫、小菜蛾、棉实夜蛾、家蚕等五种昆虫的六个细胞系。对这些细胞系的形态特征、染色体、生长...
- 关键词：
- 关键词：小菜蛾细胞昆虫细胞昆虫细胞系细胞系昆虫
- 病毒极早期基因表达产物与宿主细胞因子相互作用分子机制的研究进展
- 本文以三种具代表性的病毒HSV-1、HCMV、昆虫杆状病毒ACNPV为例介绍极早期蛋白与宿主细胞因子相互作用分子机制研究近况.
- 王颖余泽华
- 关键词：病毒基因表达产物病毒复制
- 文献传递
- 苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒的感染对Sf9细胞周期的影响被引量：5
- 2002年
- 病毒的感染导致细胞内部发生一系列变化。应用流式细胞仪FACS的荧光检测 ,测出Sf9细胞完成整个周期循环大约需要 18h ,G1、S、G2 /M各时相的时间间隔约为 6h ;AcNPV感染Sf9细胞 12 18h ,细胞被抑制于G2 /M期 ;Sf9细胞同步于G1/S期后释放细胞并用AcNPV感染 ,12h后 ,2 / 3的细胞处于G2 /M期 ,1/
- 王颖余泽华姚汉超陶德定陈曲侯
- 关键词：多角体病毒流式细胞仪分析
- 苜蓿银纹夜蛾多核衣壳核型多角体病毒AcMNPVP78/83蛋白初步研究被引量：1
- 2004年
- AcMNPVORF9编码病毒核衣壳蛋白P78/83,该蛋白在宿主细胞内以磷酸化和去磷酸化两种形式存在,能够与细胞骨架成分肌动蛋白相互作用,序列分析表明其具有与WASP蛋白类似的结构,推测可能在病毒粒子的包装、运输等过程中起重要作用。本文利用Bac-to-Bac系统构建了P78/83与绿色荧光蛋白融合表达的重组AcMNPV,激光共聚焦显微镜观察表明,重组病毒感染Sf21细胞12h后绿色荧光主要集中分布于细胞质中,24h及以后绿色荧光主要集中分布于细胞核中。感染试验表明,超表达P78/83对病毒的生长无明显的影响。
- 聂英超方明刚王倩余泽华陈新文
- 关键词：绿色荧光蛋白
- 蓖麻蚕NPV感染离体细胞的研究
- 1991年
- 蓖麻蚕核型多角体病毒(NPV)是杆状病毒典型代表之一。建立蓖麻蚕NPV-昆虫细胞系统,对于研究病毒的增殖规律,阐述基因表达与调控等基础理论研究具有重要价值。特别是杆状病毒载体系统已成为杆状病毒分子生物学研究领域的热门课题。国内已开始构建蓖麻蚕NPV表达载体,期望在细胞和活体水平表达外源基因。因此,选择和建立适宜的病毒宿主离体系统。
- 彭建新余泽华姚汉超陈曲侯
- 关键词：蓖麻蚕NPV离体细胞
- 家蚕胚胎细胞系BM-21E-HNU5的生物学特征研究被引量：5
- 1991年
- 细胞抽提物经等电聚焦电泳分析显示6条酯酶同工酶带。等电点分别为pH5.25,5.33,5.40,5.50,5.65和5.70。病毒感染实验结果表明,该细胞系可以支持VHA-273,PcrNPV,AcNPV和PXGV等四种杆形病毒的复制增殖。
- 黎路林余泽华彭建新陈曲侯
- 关键词：细胞系昆虫
