李伟英
- 作品数：27 被引量：41H指数：3
- 供职机构：首都医科大学附属北京胸科医院更多>>
- 发文基金：北京市优秀人才培养资助更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 一种肿瘤细胞恶性表型的分离方法及其应用
- 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种肿瘤细胞恶性表型的分离方法及其应用。所述的方法为：用Matrigel胶和0.2％BSA RPMI‑1640培养基包被Transwell小室，将肿瘤细胞接种在Transwell小室上层，...
- 李伟英肖雨璇王敬慧王子宇顾勐谭金晶
- 原发性肺癌GSTM1基因多态性与化疗效果关系的研究被引量：1
- 2008年
- 背景与目的GSTM1参与环境污染物如苯丙芘和其它多环芳烃及抗癌药等的代谢,其多态性是否会影响肺癌患者的化疗效果及预后,国内相关研究比较少,本研究旨在揭示GSTM1多态性是否与化学药物治疗的敏感性有关以及对患者预后的影响。方法采用聚合酶链反应技术,检测接受化学药物治疗的137例原发性肺癌患者GSTM1基因型频率分布情况。结果137例肺癌患者GSTM1缺陷型频率为58.4%(80/ 137),功能型频率为41.6%(57/137);化疗有效组GSTM1缺陷型频率为69.05%(58/84),化疗无效组GSTM1缺陷型频率为41.51%(22/53),二者有统计学差异(P=0.001)。采用铂类化疗方案的患者,化疗有效组GSTM1缺陷型频率为65.43%(53/81),化疗无效组GSTM1缺陷型频率为42%(21/50),二者有统计学差异(P= 0.0025)。对于进展期患者化疗有效组GSTM1缺陷型频率为70.13%(54/77),化疗无效组GSTM1缺陷型频率为41.51%(22/53),二者有统计学差异(P=0.001)。当化疗有效时携带GSTM1功能型的鳞癌、小细胞癌患者生存时间(中位生存期分别为42个月和14个月)比携带GSTM1缺陷型的鳞癌、小细胞癌患者长(中位生存期分别为6个月和7个月)(P<0.05);而腺癌患者,携带GSTM1功能型和缺陷型的生存时间(中位生存期分别为13个月和11个月)差异无统计学意义(P>0.05)。对于化疗无效的患者,不论GSTM1为何种基因型、病理分型如何,患者中位生存期均比较接近,生存时间没有统计学差异(P>0.05)。结论GSTM1缺陷型的患者接受化学药物治疗的效果比GSTM1功能型的患者好;采用铂类化疗方案时GSTM1缺陷型的患者化疗效果比GSTM1功能型的患者好。当化疗有效时,患者生存时间与病理分型、GSTM1基因型相关。
- 李伟英顾艳斐赖百塘汪惠
- 关键词：谷胱甘肽S-转移酶M1基因多态性肺肿瘤
- RNA干扰环氧化酶-2基因表达对A549细胞体外恶性增殖的影响
- 2008年
- 目的研究不同靶点对环氧化酶-2（COX-2）基因表达的抑制及其对A549细胞体外恶性增殖的影响。方法以COX-2第3、7和10外显子为靶点，构建3个带有人U6启动子的COX-2小干扰RNA（siRNA）表达载体。用脂质体lipofectamine介导，分别将3个siRNA表达载体及2个空载体转染到cox-2表达阳性的A549细胞，建立转染细胞株。采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和Western blot方法检测COX-2表达水平的变化。通过细胞生长曲线、集落形成试验研究COX-2不同干扰靶点对A549细胞体外增殖的影响。结果3个siRNA和u6启动子序列正确并准确克隆到pEGFP载体。转染细胞株分别命名为A549—3，A549—7、A549—10、A549-p和A549-pU6。转染后24、48、72h，A549-p细胞均有绿色荧光表达，而A549-pU6、A549-3、A549—7和A549—10细胞均未观察到绿色荧光。RT—PCR和Western blot结果显示，以COX-2第3、7和10外显子作为靶点进行干扰，COX-2表达均受到抑制。与A549细胞比较，A549—3、A549-7、A549-10细胞的COX-2 mRNA表达量分别降低10．6％、33．4％和61．2％，COX-2蛋白表达量分别降低26．7％、44．7％和56．2％。细胞生长曲线、集落形成试验的结果显示，A549—10细胞生长减慢，集落形成率减少，而3外显子和7外显子两个干扰靶点对A549细胞生长没有明显的影响。结论以COX-2第10外显子为靶点干扰效果最好，对A549细胞的体外恶性增殖有明显的影响。
- 李伟英汪惠赖百塘杨学惠张春彦
- 关键词：环氧化酶-2基因表达RNA干扰恶性增殖
- Si-10靶点对不同COX-2蛋白表达状态肺癌细胞体外恶性增殖的影响
- 2012年
- 目的研究si-10靶点对不同环氧化酶-2（COX-2）蛋白表达状态肺癌细胞干扰效果及对肺癌细胞恶性增殖的影响。方法将psi-10及空载体（pEGFP）分别转染到不同COX-2表达状态的肺癌细胞，建立转染细胞株。采用反转录聚合酶链反应和蛋白质印迹方法检测COX-2表达水平的变化。通过细胞生长曲线、集落形成验研究这-靶点对肺癌细胞体外恶性增殖的影响。结果转染后24、48和72h，转守载体的细胞均有绿色荧光表达，转染psi-10的801D、A549和LTEP-A2细胞均未观察到绿色荧光。在A549和IJTEP-A2细胞中COX-2表达均受到抑制，但抑制效果不同，与A549细胞比较si-10对LTEP-A2细胞COX-2表达抑制更为明显。与其母系比较，LTEP-A2-10和A549-10细胞COX-2mRNA表达量分别降低64．2％和61．2％；COX-2蛋白表达量分别降低60．2％和56．2％。LTEP-A2-10和A549-10细胞生长明显减慢，集落形成率减少。与A549-10细胞比较，LTEP-A2-10细胞生长更慢，集落形成率更低，集落更小。si-10靶点对COX-2不表达的801D细胞生长没有抑制作用。结论si10对不同COX-2基因表达的肺癌细胞有不同的干扰效果，而不同干扰的效果对细胞的恶性增殖有着不同的抑制作用。
- 李伟英汪惠赖百塘杨学惠张春彦
- 关键词：肺肿瘤逆转录聚合酶链反应印迹法
- ANXA6表达抑制剂在制备治疗肺癌的药物中的应用
- 本发明提供一种ANXA6表达抑制剂在制备治疗肺癌的药物中的应用。本发明研究发现：ANXA6表达受抑制后，肺癌细胞的增殖受到显著抑制，肺癌细胞的集落形成能力受到抑制，肺癌细胞的皮下成瘤能力显著下降，且肿瘤的生长速度受到显著...
- 李伟英李嘉恒王子宇顾勐谭金晶张丽娜
- 文献传递
- Ⅰ、Ⅱ相代谢酶基因多态性与肺癌易感性关系的研究被引量：16
- 2004年
- 目的探讨Ⅰ相代谢酶CYPlA1、2E1、2D6和Ⅱ相GSTM1基因多态性与肺癌遗传易感性的关系及吸烟与基因之间的交互作用。方法 采用病例对照研究和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性等技术,检测217例肺癌患者和200例对照CYPlA1、2E1、2D6和GSTM1基因型频率分布以及与吸烟的关系。结果 肺癌组GSTM1缺陷型频率为58.5％,与对照组(47.5％)比较差异有统计学意义(P=0.02);CYPlA1、2E1、2D6在肺癌组和对照组分布差异无统计学意义(P>0.05)。吸烟与GSTM1有协同作用,与CYPlA1、2E1、2D6未见明显的协同作用。结论 吸烟和GSTM1缺陷型均是肺癌的危险因素,GSTM1缺陷型有吸烟行为的人更易患肺癌,是肺癌的高危人群。
- 李伟英赖百塘湛秀萍
- 关键词：肺癌CYP1A1GSTM1基因缺陷型代谢酶基因
- 制备两种P53重组腺病毒和流式细胞仪定量外源绿荧光蛋白表达
- 2010年
- 目的P53作为转录因子在细胞应激时呈活化型，调控细胞周期和程序性死亡抑制肿瘤生长，通常，通过各种机制P53呈非活化状态，其中包括P53C-末端负调控序列的作用。该研究目的是制备携带垒长和缺失这些负调控序列P53两种重组腺病毒和用流式细胞仪散点图（Flow cytometry scatter plot，FCM）检测人肺癌细胞外源绿荧光蛋白（Green fluorescence protein，GFP）表达。材料和方法利用pAdEasy-Track载体系统，构建两种P53重组质粒并在细菌中产生重组体，转染L293细胞产生三种重组腺病毒。三种不同浓度病毒分别感染人肺癌801D细胞，FCM分析GFP表达。结果测序证明重组腺病毒：Ad—P53（del）缺失p53C-末端终止密码子前111个碱基和非编码区，Ad—P53（wtp）没有P53碱基缺失。Ad（empty carrier）无P53。FCM scatter plot显示三种病毒感染801D细胞表达GFP百分率接近并随病毒浓度递增。801D包含了不同荧光强度比率的细胞。结论构建和制备了去C-末端P53和全长p53两种重组腺病毒，Ad—p53（del），Ad-p53（wtp）及空载体Ad-（empty）。流式细胞仪散点图证明该病毒试验系统可靠，可定量外源GFP表达，为病毒感染细胞选择浓度提供准确方法。
- 汪惠赖百塘李伟英杨学惠张春燕韦攀健李金照
- 关键词：野生型P53重组腺病毒
- ANXA6<Sup>+</Sup>肿瘤相关成纤维细胞在EGFR突变介导的疾病治疗中的应用
- 本发明属于生物医学，具体涉及成纤维细胞在疾病治疗中的应用；具体公开了一种ANXA6基因在制备治疗EGFR突变介导的疾病的诊断制剂中的应用，所述应用为当检测到有ANXA6基因在CAF细胞中过表达时，则EGFR突变介导的疾病...
- 李伟英肖雨璇王子宇张同梅王敬慧顾勐
- 干扰COX-2基因表达对人肺腺癌A2细胞体外恶性增殖的影响被引量：2
- 2009年
- 背景与目的COX-2在多种肿瘤组织中高表达,参与了肿瘤的发生发展,RNA干扰(RNAi)技术是一种经济、快捷、高效的抑制特异基因表达的技术手段。本研究应用RNAi技术研究干扰COX-2基因表达的抑制效果及抑制COX-2基因表达对A2细胞体外恶性增殖的影响。方法以COX-2为靶点,构建3个带有人U6启动子的COX-2小干扰RNA(short interfering RNA,siRNA)表达载体。用脂质体lipofectamine介导,分别将3个siRNA表达载体及空载体转染到COX-2表达阳性的A2细胞,建立转染细胞株。采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测COX-2表达水平的变化。通过细胞生长曲线、集落形成试验研究干扰COX-2基因表达对A2细胞体外增殖的影响。结果经过PCR扩增、内切酶鉴定、DNA测序和BLAST比对证实3个siRNA和U6启动子序列正确并准确克隆到pEGFP载体。转染细胞株分别命名为A2-3、A2-7、A2-10和A2-p。转染后24h、48h、72h,A2-p细胞均有绿色荧光表达,而A2-3、A2-7、A2-10细胞均未观察到绿色荧光。RT-PCR和Western blot结果显示,3个siRNA表达载体均发挥作用,COX-2表达受到抑制,与A2细胞比较,A2-3、A2-7、A2-10细胞的COX-2 mRNA表达量分别降低15.6%、20.4%和64.2%,COX-2蛋白表达量分别降低23.7%、36.7%和60.2%。细胞生长曲线、集落形成试验的结果显示,A2-10细胞生长减慢,集落形成率减少,而A2-3和A2-7细胞生长没有明显的改变。结论应用RNAi技术熄灭COX-2基因表达对A2细胞的体外恶性增殖有明显的抑制作用。
- 李伟英汪惠赖百塘杨学惠张春彦
- 关键词：CYCLOOXYGENASE-2RNA干扰体外肺肿瘤
- 多肽微阵列筛选技术在肺结核诊断中的应用
- 2018年
- 目的血清免疫学技术广泛用于肺结核检测，但已有的血清标志物其敏感性和特异性还有待提高，需要发掘新的血清标志物。方法利用多肽微阵列技术解析结核菌抗原PPE．FAMILY（RV2430c），SodC（Rv0432）和TrxC（Rv3913）全长蛋白质多肽序列，获得蛋白抗原表位多肽。进行两轮筛选，寻找结核病优势抗原多肽。利用ELISA进行验证，并将多肽与融合全蛋白进行检测效能的比较。结果筛选和验证出一条来自TrxC的抗原多肽，用于ELISA检测肺结核的敏感性和特异性分别是65％和80％，ROC曲线下面积为O．789，比用融合蛋白检测效果更优。结论多肽微阵列在寻找新的肺结核血清标志物方面具有很强的应用前景。
- 谭金晶顾勐张丽娜王玥李伟英
- 关键词：肺结核血清标志物抗原表位
