王敬琦
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
- 供职机构：北京林业大学生物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程农业科学石油与天然气工程更多>>
- 基于PMA-PCR法筛查重点流域典型水源地的三种病原病毒
- 当前,我国最新颁布实施的饮用水标准所包含的6项微生物学指标,无法全面反映水中病原微生物的污染状况,尤其缺少病原病毒类微生物指标.PMA(propidium monoazide)是一种具有高亲和性光敏型核酸染料.它能够选择...
- 韦玉梅王敬琦何晓青王子健
- 关键词：轮状病毒星状病毒
- 基于流式细胞术研究管网水中细菌的稳定性被引量：2
- 2016年
- 为了更准确地研究管网水中细菌的稳定性,利用流式细胞术（Flow cytometry,FCM）和异养菌平板计数法（Heterotrophic plate count,HPC）检测北京市12处管网末梢水中细菌数量,并将两种方法的检测结果进行对比.进一步将FCM应用于细菌的再生长潜能和一天中细菌稳定性的研究中.结果显示,HPC对12处管网水中细菌的检测结果在0-23 CFU/m L间,而FCM测得活细菌数为2.2×10^3-1.6×10^4 cells/m L,细菌总数在22℃下培养7 d能生长到10^6-10^7 cells/m L.一天中不同时间用水量不同,细菌总数也不同.本研究表明,FCM测定方法明显优于HPC法,且能够快速准确地反映细菌的再生长潜能及短时间内细菌的稳定性特征.
- 刘婷婷陈南孔维文王敬琦何晓青
- 关键词：管网水流式细胞术生物稳定性
- 可同化有机碳和余氯对饮用水中细菌活性的共同影响被引量：3
- 2014年
- 对饮用水中可同化有机碳和游离余氯对细菌生长的共同影响进行了研究。以添加有大肠杆菌的管网水为试验对象,加入不同质量浓度次氯酸钠溶液,结合流式细胞仪检测了72 h内不同时间点可同化有机碳(AOC)质量浓度和活性细菌浓度的变化情况。结果表明:在AOC初始质量浓度为168.44μg/L的条件下,添加次氯酸钠后可同化有机碳质量浓度出现波动,是其他有机物氧化造成的;活细菌浓度在未添加余氯的情况下呈增长趋势,而在添加余氯的情况下整体呈下降趋势,且最终的活性细菌浓度与初始余氯质量浓度呈负相关。研究表明,在添加适量余氯的情况下,细菌活性主要受到余氯的抑制作用,而AOC导致的细菌再生长能力相对较弱。
- 刘晓露王敬琦张柏林何晓青
- 关键词：微生物学饮用水可同化有机碳流式细胞仪
- 基于esp基因和JCV标记的MST方法在五大流域典型水源地中的应用被引量：1
- 2015年
- 非点源污染目前已经成为影响水体环境的重要污染。微生物源示踪技术(microbial source tracking,MST)是解决非点源污染的一项新技术,它可以确定污染的宿主来源。肠球菌esp基因和多瘤病毒JCV可以作为检测水体中人源粪便污染的分子标记,其灵敏度和特异性都很高。为分析五大流域水源地是否受到人源粪便的污染,对辽河、海河、淮河、长江和黄河五大流域典型水源地水样进行采集和检测,选取人源粪便特异病原微生物肠球菌的esp基因和多瘤病毒JCV建立了相应的MST分子检测方法。结果表明,五大流域的典型水源地采样点均有可能受到了人源粪便的污染,可为当地相关部门提供技术支持和数据参考。
- 王敬琦孔维文刘婷婷陈南杨柏云何晓青
- 关键词：水源地MST
- 黄瓜细菌性角斑病PMA-qPCR检测方法的建立和应用被引量：7
- 2016年
- 黄瓜细菌性角斑病为黄瓜常见的一种细菌病害,其致病菌为丁香假单胞菌黄瓜致病型。目前该病在全球范围内已经造成严重的经济损失。针对于PMA染料能够区分细胞死活的特性将其与荧光定量PCR技术结合。(1)通过比对分析Gen Bank中该菌种不同株的gap1基因序列,找出gap1基因的保守区并根据保守区基因序列设计了一对特异性引物Dxf1和Dxr1,以其他5种非丁香假单胞菌基因组为模板进行实时定量PCR扩增,只有丁香假单胞菌有扩增曲线,证明引物非常特异。(2)以gap1基因为目的基因构建其克隆载体,将克隆载体导入到大肠杆菌感受态细胞中进行培养,使其大量复制。再将质粒提取,以提取的质粒作为标准品,根据其浓度将其稀释为5×101-5×107 7个梯度绘制标准曲线,获得的扩增效率为96.6%,并做组内重复和组间重复,变异系数均在2%内,证明标准曲线重复性良好。(3)将构建好的方法用于实际样品的检测,得到的Ct值为27.99,根据标准曲线所得的起始模板与Ct值之间的线性关系公式,检测到100 mg患病叶片中含有的菌体为7.69×102拷贝。研究表明,该方法可以快速鉴定并检测实际样品中的活的致病菌的数量,为黄瓜细菌性角斑病的防控提供技术支持。
- 孔维文李云龙王敬琦刘婷婷陈南金一何晓青
- 关键词：黄瓜细菌性角斑病丁香假单胞菌
