王旭东
- 作品数：8 被引量：9H指数：2
- 供职机构：南京农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- c--di--GMP代谢基因及STING--IRF3信号通路在奶牛乳腺源大肠杆菌感染过程中的作用研究
- 大肠杆菌是引起急性奶牛乳腺炎的主要病原菌之一,其致病机制仍需进一步研究。环鸟苷二磷酸（cyclic guanosine diphosphate,c-di-GMP）作为细菌中普遍存在的第二信使,不仅可以调控包括细菌的胞外多...
- 王旭东
- 关键词：C-DI-GMP大肠杆菌
- 文献传递
- 传染性法氏囊病病毒超强毒地方株HN01的分离鉴定及分子系统进化分析被引量：2
- 2005年
- 用分离的疑为鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)超强毒(vvIBDV)地方分离株HN01,经处理后接种SPF鸡,36h后接种鸡开始发病,发病率为100%,死亡率为70%以上。剖检可见与野外病例相同的病理变化,如肌肉、腺胃、心脏出血,法氏囊水肿且多呈"紫葡萄"样外观。经血清学试验、毒力试验、鸡胚接种试验、分子生物学和电镜形态学观察均证明该分离物为超强毒株,从而证明河南省鸡群中存在不同于IBDV一般强毒株、经典株和变异株的超强毒株。通过对IBDV不同毒株VP2基因高变区氨基酸序列的聚类分析发现,HN01与华南超强毒株G9201、欧洲超强毒株UK661关系最接近,而与HK46,OKYM,D6948,UPM92-04和KS等毒株关系依次渐远。
- 贾赟张素芳周斌王旭东王川庆赵玉军陈溥言
- 关键词：传染性法氏囊病病毒超强毒株VP2系统进化树
- 传染性腔上囊病病毒HN01超强毒株VP2基因的克隆和序列分析被引量：1
- 2004年
- 根据GenBank中登录的传染性腔上囊病病毒(IBDV)标准强毒株52 70株基因组序列,设计并合成了1对扩增IBDVVP2基因的特异性引物。以IBDV超强毒分离株HN01感染发病鸡腔上囊组织中提取的病毒RNA为模板,用RT PCR扩增出了1.45kb的cDNA产物,将扩增的IB DVHN01株VP2基因克隆于pMD18 T载体上,获得了pMD18 T VP2重组质粒。将IBDVHN01株VP2基因序列测定结果与已发表的其他IBDV毒株VP2基因序列进行分析比较,绘出系统进化树。结果表明,HN01株与欧洲超强毒株UK661、日本超强毒株OKYM、香港超强毒株HK46等非常相似,而与经典强毒株、弱毒株和变异株相差较大。
- 贾赟王旭东赵玉军陈溥言
- 关键词：传染性腔上囊病病毒VP2基因克隆
- 猪α<,1>-干扰素全基因大肠杆菌偏嗜性密码子改造及高效原核表达
- 为了比较研究本组已克隆和表达的poIFN-α(另文发表)与poIFN-α1的抗病毒等生物学特性的差异,本研究人工合成了密码子改造的poIFN-α1基因,在大肠杆菌中进行表达,并测定其抗病毒活性.
- 曹瑞兵王旭东王敏秀郑其生李学仁陈德胜陈溥言
- 关键词：干扰素大肠杆菌原核表达
- 文献传递
- 猪α1-干扰素全基因大肠杆菌偏嗜性密码子改造及高效原核表达
- 干扰素(interferon,IFN)是一类具有抗病毒、抗肿瘤和免疫激活功能的细胞因子。IFN可分为两个型,IFN-α多基因家族属于Ⅰ型干扰素,目前已知人类IFN-α可分为2个亚型,20多种。IFN-α因具有显著的抗病毒...
- 曹瑞兵王旭东王敏秀郑其生李学仁陈德胜陈溥言
- 文献传递
- 猪瘟病毒保护抗原E2和猪IgG重链基因的合成及其表达蛋白被引量：2
- 2004年
- 根据已发表文献及DNAstar软件分析 ,选取双拷贝Shimen株猪瘟病毒E2基因A ,D区和猪IgG重链中可与SPA非特异性结合的区域作为目的基因进行串联表达。根据GenBank发表的序列 ,Primer5 0软件的辅助下分别设计三对引物 ,并在扩增第二条和第三条片段的上游引物 5′端分别设计一个长 5个氨基酸的Linker,将扩增的三片段串联克隆入原核表达载体pET 32a中 ,构建成重组质粒pET 2eh ,对重组质粒诱导表达 ,表达蛋白经纯化后标记于CowanⅠ株金黄色葡萄球菌SPA上 ,与收集的 80份待检血清进行平板凝集试验 ,结果与现有诊断试剂盒检测结果具有较好的符合性。该方法具有简单 ,快速 ,敏感 ,易于操作的特点。
- 王海震李学仁刘文波周斌苏鑫铭冯秀丽王旭东陈溥言
- 关键词：猪瘟病毒IGG
- 丙型肝炎病毒基因和蛋白结构研究进展被引量：1
- 2004年
- 王旭东贲昆龙陈溥言
- 关键词：丙型肝炎病毒基因蛋白结构传染病HCV
- 奶牛γ干扰素基因的高效表达及活性测定被引量：3
- 2004年
- 经刀豆素(conA)刺激诱导奶牛外周血淋巴细胞,应用RT-PCR方法从其总RNA中对奶牛γ干扰素基因cDNA进行扩增,然后将特异性片段连接到pMD18-T载体,测序结果表明,与已知序列同源性为100%。然后将特异性片段连在pRLC载体上进行表达,经SDS-PAGE分析,原核表达产物为16kDa的重组蛋白,占菌体总蛋白的42%,表达产物以包涵体形式存在。经7mol/L盐酸胍的变性液溶解及0.5mol/L盐酸胍复性液处理,表达产物进行脱盐、凝胶层析纯化,细胞病变抑制法结果表明,重组牛IFN-γ具有较高的干扰素活性,约为6.0×105U/mg。
- 李学仁王海震葛菲菲王旭东曹瑞兵陈溥言
- 关键词：奶牛Γ干扰素基因活性
