石建斌
- 作品数:9 被引量:30H指数:4
- 供职机构:青海大学更多>>
- 发文基金:国家现代农业产业技术体系建设项目国家重点基础研究发展计划更多>>
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- 马铃薯T-DNA插入拷贝数的检测及对农艺性状的影响研究被引量:1
- 2015年
- 以转基因马铃薯株系为材料,采用Real-time PCR方法,以SYBR Green I为荧光染料,以马铃薯块茎贮藏蛋白基因(Patatin)作为内参基因,以植物表达载体上的潮霉素抗性基因(HPT)为筛选标记基因,建立目的基因CT值与起始模版的相关性标准曲线,通过实时荧光定量PCR分别获得每个样品中内参基因和外源基因的CT值,根据Pfaffl法计算获得了T-DNA在转基因马铃薯中的拷贝数,且与Southern blot方法进行了比较,并结合田间农艺性状,分析了外源基因拷贝数马铃薯株高及薯块产量的影响。结果表明,内参基因和外源基因标准曲线的相关系数分别为R2=0.996、R2=0.995和R2=0.990。在所测的23株转基因株系中,12株为单拷贝插入,6株为双拷贝,5株为多拷贝。Real-time PCR比Southern blot方法结果更准确、操作更简便快捷、成本更低。且插入拷贝数的多少与马铃薯田间农艺性状变化有一定的关系,发现2拷贝以上的T-DNA插入较容易引起部分性状的改变。
- 石建斌杨永智王舰
- 关键词:马铃薯实时荧光定量PCR拷贝数农艺性状
- 蚕豆种质资源清蛋白遗传多样性分析被引量:6
- 2012年
- 利用SDS-PAGE对101份蚕豆种质资源进行了清蛋白遗传多样性分析,共检测出蛋白带2625条。除共有带外,迁移率不同的谱带类型36种,其中相对分子量为92kD、75kD、62kD、40kD、34kD、17kD、13kD的谱带在检测的种质材料中出现的频率最高,分别为92.08%、90.10%、99.01%、95.05%、95.05%、98.02%、95.05%。其余29种谱带类型具有较强的多态性,多态性谱带平均为16.09条,多态性比例为44.69%。每份种质材料的清蛋白谱带数介于21~31条之间,平均25.99条;供试种质间遗传相似系数0.6111~0.9722,平均0.7122。3个地理类群内多样性指数0.9879,类群间多样性指数0.0121,表明蚕豆清蛋白的变异主要来源于类群内。聚类分析将参试种质分为6类,与以往蚕豆种质分类研究结果类似,表明清蛋白能在一定程度上反映种质间的亲缘关系。研究结果对于蚕豆蛋白质品质育种具有一定的参考价值。
- 石建斌侯万伟刘玉皎马晓岗
- 关键词:蚕豆清蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳遗传相似系数
- 蚕豆种子贮藏蛋白质组分的比较研究被引量:8
- 2012年
- 以10份蚕豆品种为材料,利用SDS-PAGE方法,对其种子贮藏蛋白亚基组成进行了分析,结果表明:不同品种间的种子贮藏蛋白具有一定的差异,表现出一定的多态性;共分离出23条迁移率不同的亚基条带,13条具有多态性;利用贮藏蛋白亚基条带的信息,分析了品种间的蛋白相似度,相似度指数0.619~0.947,平均0.744;并通过聚类分析,在遗传相似系数0.8260水平上,将供试材料分为了3类,其中第2类具有较丰富的多样性,多样性指数达3.9296;共筛选出7对亲缘关系较远的杂交组合,可为蚕豆品种选育提供一定的科学依据。
- 石建斌侯万伟刘玉皎
- 关键词:蚕豆种子贮藏蛋白SDS-PAGE亲缘关系
- 青海不同基因型蚕豆蛋白质组成及其亚基的遗传变异分析
- 蚕豆(ViciafabaL.)是一种重要的豆类作物,也是我国西部干旱、半干旱地区种植的主要豆类之一,其含有比较丰富的蛋白质、纤维素、维生素及许多矿物质。前期对蚕豆的研究多集中在形态结构方面,表明蚕豆在形态结构上存在着较为...
- 石建斌
- 关键词:蚕豆蛋白质组成
- 文献传递
- 蚕豆蛋白质亚基分析与特异种质鉴定被引量:7
- 2012年
- 采用SDS-PAGE方法,对112份不同基因型蚕豆的清蛋白和球蛋白亚基的差异性进行分析。结果显示:(1)蚕豆清蛋白和球蛋白亚基的有效等位变异分别为1.750 0±0.452 3、1.545 5±0.522 2,多态性比率分别为75.00%、54.55%,清蛋白的亚基遗传多样性指数较球蛋白亚基高。(2)蚕豆清蛋白和球蛋白分别含有在不同基因型蚕豆中构成不同的12和10个亚基,其中清蛋白含有9个基本亚基,116kD、96kD、45kD为清蛋白的3个特异亚基;球蛋白含有8个基本亚基,58kD、35kD为球蛋白的2个特异亚基;研究共鉴定筛选出42个含有清蛋白特异亚基和21个含有球蛋白亚基的种质资源。(3)清蛋白的97kD、63kD基本亚基和球蛋白的97kD、56kD、47kD基本亚基存在一定的缺失现象,共鉴定出19个清蛋白亚基和21个球蛋白亚基缺失的优异种质。研究表明,蚕豆清蛋白和球蛋白亚基构成在不同种质之间具有差异性,除基本亚基外,部分种质还含有特异亚基或缺失亚基。
- 刘玉皎侯万伟石建斌
- 关键词:蚕豆蛋白亚基多样性种质鉴定
- 青海不同基因型蚕豆蛋白组成及清蛋白和球蛋白亚基的SDS-PAGE分析被引量:7
- 2012年
- 采用连续提取蛋白法和SDS-PAGE技术分析了青海省11个不同基因型蚕豆的蛋白质组成以及清蛋白、球蛋白亚基的差异.结果表明:蚕豆蛋白主要由清蛋白、球蛋白、谷蛋白、醇溶蛋白和其他蛋白组成,不同基因型蚕豆的蛋白质含量及其组成存在一定的变异,其中清蛋白和球蛋白是蚕豆蛋白主要组成部分,占总蛋白的75.08%.不同基因型蚕豆的清蛋白和球蛋白亚基存在一定的差异,蚕豆清蛋白亚基由97、66+67、63、50、45、38+41、22ku等7个基本亚基组成外,还有96ku特异亚基;球蛋白亚基由63、56、52、47、22ku等5个基本亚基组成外,还有46ku的特异亚基.
- 刘玉皎侯万伟李萍石建斌
- 关键词:蚕豆蛋白亚基SDS-PAGE
- 马铃薯赤霉素合成代谢途径关键酶基因GA2ox1、GA20ox1的克隆与功能分析
- 赤霉素(GA)作为植物体内一种内源激素,在高等植物生长的整个生命周期,起着重要的调控作用。GA-20氧化酶和GA-2氧化酶是赤霉素合成途径中第三阶段的关键酶,它们均由多基因家族编码,参与着赤霉素水平的调控。GA-20氧化...
- 石建斌
- 关键词:马铃薯种植良种培育转基因技术内源激素
- 青海不同生态环境下蚕豆蛋白亚基差异性研究被引量:1
- 2011年
- 以青海不同生态环境条件下的青海13号蚕豆为材料,利用SDS-PAGE电泳技术分离清蛋白和球蛋白各主要亚基,通过Band Scan 5.0软件得出各亚基的相对含量。结果表明,蚕豆清蛋白和球蛋白亚基构成具有差异性,发现2个99 ku、61 ku的清蛋白特异亚基和3个94 ku、64 ku、39 ku的球蛋白特异亚基,57 ku、47 ku等2个清蛋白亚基和61 ku、51 ku等2个球蛋白亚基具有一定的缺失现象。各亚基在含量上也各不相同,存在一定差别,可以看出,蚕豆蛋白亚基的增失及含量随生态环境的不同存在一定的变异。本研究对蚕豆品质育种具有一定的参考价值。
- 石建斌侯万伟刘玉皎马晓岗
- 关键词:蚕豆蛋白亚基SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳生态环境
- 马铃薯突变体赤霉素代谢关键酶基因差异表达分析被引量:4
- 2016年
- 为揭示马铃薯株高突变与赤霉素代谢途径关键酶基因的关系,以马铃薯株高突变株系4P2-9为材料,利用实时荧光定量PCR方法中的相对定量RT-PCR建立双标准曲线,以Actin基因为内参基因,对高原4号及其株高突变材料4P2-9中的赤霉素代谢相关基因的表达情况进行了检测。结果显示,4P2-9的株高及节间数显著低于对照材料(P<0.05),节间长度显著高于对照(P<0.05),赤霉素代谢的关键酶基因KS、KO和GID1表达量显著下调,分别为对照材料的0.725倍、0.657倍和0.890倍;GA20ox1和GA2ox1基因的表达量表现为上调,分别为对照材料的1.557倍和1.425倍。结果表明,赤霉素代谢过程中关键酶基因表达量的改变是造成4P2-9材料株高变化的原因之一,而GA20ox1和GA2ox1基因的表达量的上调是促使株高降低的主要因素。
- 石建斌杨永智王舰
- 关键词:马铃薯赤霉素基因表达量