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- 作品数：60 被引量：87H指数：6
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- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 刚毛柽柳TheIF1A基因的互作蛋白及其表达模式分析
- 2015年
- 翻译起始因子是一类翻译起始所必需的特异蛋白因子,前期研究表明柽柳翻译起始因子(The IF1A)基因能对外界盐和干旱等非生物胁迫做出响应,且过表达The IF1A基因能提高酵母和烟草的抗旱耐盐能力。为进一步研究The IF1A基因的抗逆机制,本研究通过酵母双杂交对柽柳翻译起始因子(The IF1A)基因的互作蛋白进行了筛选,共获得5个互作蛋白,分别为RNA聚合酶βII亚基(RNA polymerase beta II subunit)、ATP合成酶CF1α亚基蛋白(ATP synthase CF1 alpha subunit protein)、细胞色素b6/f复合物亚基IV(cytochrome b6/f complex subunit IV)、核酮糖1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶小亚基蛋白(ribulose 1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase small subunit)和组蛋白乙酰转移酶(histone acetyltransferase)。利用实时荧光定量PCR对这5个蛋白基因及The IF1A基因在盐和干旱胁迫处理下的表达模式进行分析,结果表明:这些蛋白基因在盐和干旱胁迫下的表达模式与The IF1A基因基本一致,表明The IF1A可能通过与这些蛋白相互作用来参与逆境胁迫应答。为进一步研究The IF1A基因的抗逆机理奠定了基础,有利于完善林木抗逆机制的研究,并为通过基因工程手段提高林木抗逆性提供了候选基因。
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- 关键词：刚毛柽柳酵母双杂交植物抗逆性
- 刚毛柽柳TheIF1A基因转入酵母的抗逆能力分析被引量：4
- 2014年
- 翻译起始因子eIF1A基因是蛋白合成的重要调控因子之一,在一些植物中可能参与抗逆调控过程。为了研究刚毛柽柳TheIF1A基因是否参与抗逆过程,将TheIF1A基因插入酵母表达载体pYES2中构建成重组载体,转入酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中获得重组型酵母,分别比较转TheIF1A基因酵母和转空载体对照酵母在山梨醇、H2O2、CdCl2、CuSO4、ZnCl2、KCl、Na2CO3、MgCl2、-20℃和53℃胁迫处理之后的存活能力。结果显示,TheIF1A基因能有效提高转基因酵母的抗干旱、盐碱、氧化、重金属及极端温度的能力,表明TheIF1A可能参与了柽柳多种抗逆调控过程。
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- 关键词：刚毛柽柳酵母表达抗逆性
- 柽柳甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因的克隆与表达分析被引量：12
- 2010年
- 从柽柳(Tamarix hispida)cDNA文库中分离出甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因(ThGAPDH)全长cDNA序列,该基因全长1294bp。其中:5′非翻译区84bp,3′非翻译区184bp,开放阅读框1206bp,编码含341个氨基酸的蛋白质,编码蛋白的相对分子质量为37200,理论等电点(pI)为6.97。采用实时定量RT-PCR方法研究了刚毛柽柳在PEG、NaCl、NaHCO3及CdCl2胁迫下不同时间该基因ThGAPDH的表达模式。结果表明:PEG、NaCl及CdCl2处理均能诱导ThGAPDH基因在根中的表达而抑制其在茎和叶中的表达,而NaHCO3处理均能诱导该基因在根、茎、叶中的表达。基因ThGAPDH的cDNA序列在GenBank中的登录号为GQ478708。
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- 关键词：刚毛柽柳甘油醛-3-磷酸脱氢酶实时定量RT-PCR基因表达
- 不同长度ThVHAc1基因启动子片段分离及活性分析被引量：2
- 2016年
- [目的]VHAc基因(V-ATPase c亚基)是V-ATPase的重要亚基,能响应盐、重金属等胁迫,过表达刚毛柽柳ThVHAc1基因的酵母能提高抗CdCl_2耐NaCl能力。本研究拟通过分离ThVHAc1基因不同长度启动子片段并对其胁迫后活性进行分析,以进一步探讨ThVHAc1基因响应CdCl_2和NaCl胁迫的机制。[方法]根据ThVHAc1基因启动子中含有的Dof顺式作用元件的分布,将ThVHAc1基因上游启动子分为205 bp(-1—-205),504 bp(-1—-504)和781 bp(-1—-781)3个不同长度片段。将这些不同长度启动子片段分别替换p CAMBIA1301载体上的CaMV35S启动子,以驱动GUS基因表达,构建植物表达载体,利用农杆菌介导法转化拟南芥。对4周龄的T4代转基因拟南芥分别进行H_2O(非胁迫处理,对照)、100 mmol·L^(-1)NaCl和150μmol·L^(-1)CdCl_2胁迫处理,比较不同转基因株系的GUS染色和GUS酶活性。[结果]正常生长条件下,CaMV35S株系在根、茎、叶中均有GUS染色;3个启动子片段转基因株系均能在不同组织观察到GUS染色,且在根、茎、叶中有一定差异,但整体上GUS酶活性表现为781>504>205。NaCl胁迫下,CaMV35S株系的GUS染色及酶活性与正常生长条件相比无明显变化,但3个启动子片段转基因株系的GUS染色及酶活性均显著降低,且781株系的GUS酶活性分别为205和504株系的2.73和2.07倍;同时,3个启动子片段转基因株系的组织表达特性发生了一些改变,如,504株系在老叶中表达明显增强,嫩叶中减弱,根中无明显变化。CdCl_2胁迫下各转基因株系的GUS染色和酶活性变化趋势与NaCl胁迫相似。CdCl_2胁迫下,205,504,781株系的GUS酶活性分别为非胁迫时的52.4%,57.9%和80.9%;胁迫后的组织表达活性也发生了一些改变,205株系的GUS染色在老叶较深、嫩叶较浅,504株系则在各部分的表达较均匀,781株系大多叶片的GUS表达减弱;但781株系的GUS酶活性仍然最高,分别为205和504株系的2.67和2.07倍。[结论]ThVHAc1基因启动�
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- 关键词：刚毛柽柳拟南芥启动子NACL胁迫
- 翻译起始因子（eIF1A）基因的获得及抗旱性分析
- 从柽柳cDNA文库中测序得到一条长度为631 bp,编码113个氨基酸的全长cDNA基因序列,利用生物信息学软件对该基因进行分析,确定其属于eIF1A家族。采用农杆菌介导法进行烟草的遗传转化,通过分子检测证明eIF1A基...
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- 关键词：柽柳抗旱转基因
- 文献传递
- 一种利用EMS诱变创制白桦新种质的方法
- 本发明涉及植物种子诱变领域，公开一种利用EMS诱变创制白桦新种质的方法，包括如下步骤:将白桦种子用流水冲洗；将冲洗过的容器中震荡加水，记录此时容器内液体的体积，浸泡后排水；向容器中加入处理液，在振荡器上低温诱变处理；向容...
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- 一种快速高效的白桦转基因方法
- 一种快速高效的白桦转基因方法，它涉及一种植物转基因的方法。本发明的目的是要解决现有白桦稳定转化效率低和转化周期太长的问题。本发明的方案为：选取苗高为5～6cm的白桦组培苗，诱导培养愈伤组织；转移至含目的基因序列的根癌农杆...
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- 文献传递
- 刚毛柽柳谷胱甘肽-S转移酶基因及其应用
- 刚毛柽柳谷胱甘肽-S转移酶基因及其应用，涉及一种谷胱甘肽S-转移酶GST基因及其应用。本发明的柽柳谷胱甘肽-S转移酶基因，cDNA全长1048bp，cDNA序列编码的氨基酸序列包括221个氨基酸，可用于培育抗旱耐盐转基因...
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- 文献传递
- 柽柳dir基因的克隆及序列分析
- 柳cDNA文库测序中获得了dir基因的全长cDNA序列，去除PolyA后，该基因全长724bp。其中5′非翻译区26bp，3′非翻译区143bp，开放阅读框(ORF)长555bp，编码184个氨基酸。基因编码蛋白的分子量...
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- 关键词：柽柳
- NaHCO<,3>胁迫下刚毛柽柳基因表达谱的建立及相关基因的克隆
- 刚毛柽柳(Tamarix hispid)为灌木或小乔木，具有强的抗旱、耐盐、耐水湿、抗沙埋能力，是优良的防风固沙、水土保持和盐碱地造林树种。而且能在含盐量1％的盐碱地上形成自然林，为盐碱土指示植物，是进行植物抗盐碱研究的...
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- 关键词：柽柳基因表达谱盐碱胁迫分子遗传基因育种
