刘中原
- 作品数：21 被引量：11H指数：3
- 供职机构：东北林业大学更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金黑龙江省杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 一种利用EMS诱变创制白桦新种质的方法
- 本发明涉及植物种子诱变领域，公开一种利用EMS诱变创制白桦新种质的方法，包括如下步骤:将白桦种子用流水冲洗；将冲洗过的容器中震荡加水，记录此时容器内液体的体积，浸泡后排水；向容器中加入处理液，在振荡器上低温诱变处理；向容...
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- 一种快速高效的白桦转基因方法
- 一种快速高效的白桦转基因方法，它涉及一种植物转基因的方法。本发明的目的是要解决现有白桦稳定转化效率低和转化周期太长的问题。本发明的方案为：选取苗高为5～6cm的白桦组培苗，诱导培养愈伤组织；转移至含目的基因序列的根癌农杆...
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- 文献传递
- 逆境胁迫下山新杨PdbHMGs基因表达模式分析
- 2023年
- 为了初步探究山新杨HMG(High mobility group proteins)基因在非生物胁迫下的功能,本研究从山新杨(Populus davidiana×P.bolleana)中克隆获得HMGs基因,研究HMGs抗逆功能。利用同源序列比对,在山新杨中找到7条拟南芥(Arabidopsis thaliana)HMGs的同源基因(命名为PdbHMG1~7)。利用生物信息学工具对PdbH⁃MG1~7进行序列分析。此外,通过qRT-PCR探究不同逆境胁迫下PdbHMG1~7基因在山新杨根和叶中的表达模式。PdbHMG1-7 ORF长度为456~2004 bp,编码氨基酸残基数为151~667,编码蛋白相对分子质量为16.72~75.54 kDa,理论等电点为5.35~9.36,且7个PdbHMG蛋白均为亲水性蛋白。多序列比对与进化树分析结果表明,7个PdbHMGs基因均含有保守的HMG-box结构域,都属于HMGB亚家族。顺式作用元件的分析结果表明,PdbHMGs基因的启动子序列包含多种响应激素和逆境胁迫元件。高盐、干旱、重金属和激素等胁迫处理后表达模式分析结果显示,7个PdbHMGs基因在山新杨根和叶中的表达至少在一个胁迫处理时间点发生了显著变化。在叶片中,PdbHMG2在NaCl、ABA、PEG_(6000)和CdCl_(2)胁迫下被诱导几乎全部为显著上调表达,而PdbHMG7则全部为下调表达;在NaCl和CdCl_(2)胁迫下,PdbHMG1、PdbHMG3和PdbHMG6在整个胁迫过程中几乎全部为显著上调表达。在根中,NaCl处理整个过程中PdbHMG3和PdbHMG5的表达趋势全部显著上调,而PdbHMG6在NaCl胁迫过程中除9~12 h无明显表达外,其余胁迫时间点全部为显著下调表达;在ABA处理过程中,PdbHMG6在根中全部为下调表达。7个PdbHMGs基因至少能在1种器官中对1种胁迫处理做出应答,但响应的胁迫类型和机制可能不同。本研究为后续进一步研究山新杨PdbHMGs家族基因的功能提供了参考。
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- 关键词：高迁移率族蛋白山新杨非生物胁迫
- 刚毛柽柳ThPP2C基因的克隆和表达分析被引量：3
- 2017年
- 蛋白磷酸酶2C(PP2C)是一类丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶,在体内以单体形式存在,由它催化的可逆磷酸化反应是细胞信号转导的重要组成部分,这一过程几乎参与所有的生理和病理过程。本研究从柽柳中克隆获得一条PP2C基因,命名为ThPP2C。该基因开放读码框(ORF)长849 bp,编码282氨基酸,推测蛋白质分子量为30.54 kDa,理论等电点为7.13。qRT-PCR结果显示,0.4 mol·L^(-1)NaCl、20%(w/v)PEG6000、150μmol·L^(-1)ABA和100μmol·L^(-1)JA胁迫处理后,ThPP2C基因在刚毛柽柳根和叶中的表达均发生了明显改变,但时空表达模式不完全相同。NaCl、ABA和JA处理后ThPP2C基因在叶中都表现为下调表达。而根中,NaCl和JA胁迫后主要表现为上调表达。ABA处理早期表达下调,随后表达量逐渐增加。与其他3种胁迫不同的是,PEG6000处理后ThPP2C基因在根中明显下调,而在叶中胁迫早期表现不明显,48 h后被高度诱导。表明ThPP2C基因可能参与了刚毛柽柳高盐、干旱以及激素处理的适应过程,但其功能还有待进一步验证。
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- 关键词：刚毛柽柳盐胁迫
- 一种利用EMS诱变创制白桦新种质的方法
- 本发明涉及植物种子诱变领域，公开一种利用EMS诱变创制白桦新种质的方法，包括如下步骤:将白桦种子用流水冲洗；将冲洗过的容器中震荡加水，记录此时容器内液体的体积，浸泡后排水；向容器中加入处理液，在振荡器上低温诱变处理；向容...
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- 白桦HSFA4转录因子的克隆及耐盐功能分析被引量：5
- 2020年
- 【目的】热激转录因子(HSF)在植物对非生物胁迫应答中起重要的调节作用。本研究拟从白桦中克隆获得HSFA4基因(命名为BpHSFA4),研究该基因的抗逆功能,为该基因用于林木基因工程育种奠定理论基础。【方法】在白桦转录组中筛选获得1条HSFA4基因,通过RT-PCR克隆获得BpHSFA4基因序列。利用生物信息学工具进行序列分析。利用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)分析不同逆境胁迫下BpHSFA4基因在白桦叶、茎和根中的表达模式。构建植物过表达载体pROKⅡ-BpHSFA4和抑制表达载体pFGC5941-BpHSFA4,进行白桦瞬时转化,同时以pROKⅡ瞬时侵染白桦作为对照。分析NaCl胁迫下不同瞬时转化白桦株系的MDA、H2O2、SOD、POD、相对电导率及二氨基联苯胺(DAB)、氯化硝基四氮唑蓝(NBT)及伊文思蓝(Evans blue)染色情况,以综合评定BpHSFA4基因的耐盐功能。【结果】BpHSFA4基因cDNA全长为1170 bp,编码389个氨基酸,编码蛋白的相对分子量为44.15 kDa,理论等电点为5.14,具有典型HSF结构域。非生物胁迫(NaCl、PEG6000、镉、高温和低温)条件下和激素(ABA、GA3和JA)处理下,BpHSFA4基因的表达均发生了不同程度的改变,且每种处理后至少有1个时间点发生了明显上调或者下调,其中盐胁迫下表达变化尤为明显。3种瞬时表达白桦株系中的BpHSFA4基因的表达分析结果显示成功获得了瞬时过表达转基因株系(OE)和抑制表达转基因株系(SE)。进一步对不同转基因白桦株系的生理指标和生理染色进行分析,结果显示:NaCl胁迫条件下,过表达BpHSFA4植株H2O2含量、MDA含量和相对电导率明显低于对照植株,抑制表达BpHSFA4植株的H2O2含量、MDA含量和相对电导率则明显高于对照植株;过表达BpHSFA4植株的SOD活性和POD活性明显高于对照植株,而抑制表达BpHSFA4植株的SOD活性和POD活性明显低于对照株系;NBT、DAB染色结果与H2O2含量测定结果一致,显示OE植株的着色明�
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- 关键词：白桦基因表达耐盐
- 一种基于愈伤组织分化的柽柳组培分化体系
- 一种基于愈伤组织分化的柽柳组培分化体系，它涉及一种基于愈伤组织分化的柽柳组培分化体系。本发明要解决现有刚毛柽柳愈伤组织分化及再生难的问题。本发明将刚毛柽柳无菌外植体，通过诱导，分化培养建立了基于愈伤组织分化的无性快繁体系...
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- 文献传递
- 一种山新杨PdbGRF1基因及其应用
- 本发明涉及一种山新杨PdbGRF1基因及其应用，属于植物基因工程育种技术领域。为解决现有技术无法将山新杨的GRF转录因子应用于耐盐木本植物的培育的问题，本发明提供了一种山新杨PdbGRF1基因，其基因的cDNA序列如SE...
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- 刚毛柽柳MYB转录因子编码基因及其应用
- 本发明属于植物基因工程育种技术领域，尤其涉及刚毛柽柳MYB转录因子编码基因及其应用。本发明提供的刚毛柽柳ThMYB基因可用于提高植物耐盐性或选育耐盐性转基因植物。分别构建ThMYB基因的过表达和抑制表达载体，通过瞬时侵染...
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- 刚毛柽柳MYB转录因子编码基因及其应用
- 本发明属于植物基因工程育种技术领域，尤其涉及刚毛柽柳MYB转录因子编码基因及其应用。本发明提供的刚毛柽柳ThMYB基因可用于提高植物耐盐性或选育耐盐性转基因植物。分别构建ThMYB基因的过表达和抑制表达载体，通过瞬时侵染...
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- 文献传递
