王培龙
- 作品数：13 被引量：16H指数：3
- 供职机构：东北林业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 刚毛柽柳ThPP2C基因的克隆和表达分析被引量：3
- 2017年
- 蛋白磷酸酶2C(PP2C)是一类丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶,在体内以单体形式存在,由它催化的可逆磷酸化反应是细胞信号转导的重要组成部分,这一过程几乎参与所有的生理和病理过程。本研究从柽柳中克隆获得一条PP2C基因,命名为ThPP2C。该基因开放读码框(ORF)长849 bp,编码282氨基酸,推测蛋白质分子量为30.54 kDa,理论等电点为7.13。qRT-PCR结果显示,0.4 mol·L^(-1)NaCl、20%(w/v)PEG6000、150μmol·L^(-1)ABA和100μmol·L^(-1)JA胁迫处理后,ThPP2C基因在刚毛柽柳根和叶中的表达均发生了明显改变,但时空表达模式不完全相同。NaCl、ABA和JA处理后ThPP2C基因在叶中都表现为下调表达。而根中,NaCl和JA胁迫后主要表现为上调表达。ABA处理早期表达下调,随后表达量逐渐增加。与其他3种胁迫不同的是,PEG6000处理后ThPP2C基因在根中明显下调,而在叶中胁迫早期表现不明显,48 h后被高度诱导。表明ThPP2C基因可能参与了刚毛柽柳高盐、干旱以及激素处理的适应过程,但其功能还有待进一步验证。
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- 关键词：刚毛柽柳盐胁迫
- 一种快速高效的白桦转基因方法
- 一种快速高效的白桦转基因方法，它涉及一种植物转基因的方法。本发明的目的是要解决现有白桦稳定转化效率低和转化周期太长的问题。本发明的方案为：选取苗高为5～6cm的白桦组培苗，诱导培养愈伤组织；转移至含目的基因序列的根癌农杆...
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- 文献传递
- 刚毛柽柳ThDof基因、其编码蛋白及其启动子序列和应用
- 刚毛柽柳ThDof基因、其编码蛋白及其启动子序列和应用，涉及一种Dof基因、其编码蛋白及其启动子序列和应用。本发明的目的在于提供一种刚毛柽柳ThDof基因、其编码蛋白及其启动子序列和应用。ThDof基因序列如序列表中SE...
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- 文献传递
- 刚毛柽柳PHD3转录因子编码基因及其应用
- 本发明涉及刚毛柽柳PHD3转录因子编码基因及其应用，属于植物基因工程育种技术领域。为解决无法利用刚毛柽柳的PHD转录因子编码基因培育优良耐盐植物的问题，本发明提供了刚毛柽柳PHD3转录因子编码基因，即如SEQ ID No...
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- 文献传递
- 刚毛柽柳瞬时转化方法
- 刚毛柽柳瞬时转化方法，涉及一种植物瞬时转基因的方法。本发明是要解决现有刚毛柽柳稳定转化周期太长，刚毛柽柳原瞬时转化方法的转化效率低的问题。方法：一、选取继代培养的刚毛柽柳组培苗，将选取的刚毛柽柳组培苗放入高渗透处理液中浸...
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- 文献传递
- 刚毛柽柳ThPHD3基因调控盐胁迫应答分子机制研究
- 植物在对周围环境的适应过程中，通过调控某些特定转录因子的表达产生特异性的产物来增强植物对逆境条件的适应性。关于转录因子在应对非生物胁迫过程中的功能研究日益受到人们的重视。植物同源结构域（Planthomeodomain,...
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- 关键词：刚毛柽柳盐胁迫转录因子
- 文献传递
- 一种基于愈伤组织分化的柽柳组培分化体系
- 一种基于愈伤组织分化的柽柳组培分化体系，它涉及一种基于愈伤组织分化的柽柳组培分化体系。本发明要解决现有刚毛柽柳愈伤组织分化及再生难的问题。本发明将刚毛柽柳无菌外植体，通过诱导，分化培养建立了基于愈伤组织分化的无性快繁体系...
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- 刚毛柽柳ThPCS1基因克隆与镉胁迫应答分析被引量：1
- 2021年
- 【目的】探究刚毛柽柳(Tamarix hispida)植物络合素合酶(phytochelatin synthase,PCS)基因ThPCS1的镉胁迫应答功能。【方法】通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)对刚毛柽柳ThPCS1基因进行克隆;通过BioEdit、MEGA 5.0等软件对ThPCS1蛋白进行生物信息学分析;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术分析镉(Cd)胁迫条件下ThPCS1基因在柽柳根和叶中的表达水平;构建pROKII-ThPCS1过表达载体,通过瞬时侵染技术获得转ThPCS1基因柽柳,分析比较转基因和对照柽柳Cd胁迫应答相关生理指标和生理染色情况。【结果】从刚毛柽柳转录组数据中分离出ThPCS1基因的全长转录组序列,预测该基因的开放阅读框为1581 bp,编码526个氨基酸,编码蛋白质的分子质量为130.75 ku,理论等电点pI为5.0。保守结构域的多重比对分析结果均显示ThPCS1蛋白在N端具有PCS结构域。RT-qPCR结果显示在镉胁迫条件下,ThPCS1基因在柽柳根中被诱导表达,且呈现出组织特异性的表达模式。对镉胁迫处理后的刚毛柽柳ThPCS1转基因植株和对照植株相关生理指标进行测定,结果显示,同对照植株相比,转基因植株的活性氧和镉离子含量降低,细胞膜损伤减小。【结论】刚毛柽柳ThPCS1基因在根中的表达明显受到镉胁迫诱导,可能参与了刚毛柽柳对镉胁迫的应答。本研究初步证明刚毛柽柳ThPCS1基因可能提高了转基因植物的耐镉能力,是一个耐镉分子育种的候选基因。
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- 关键词：刚毛柽柳镉胁迫基因表达实时荧光定量PCR
- 刚毛柽柳PHD3转录因子编码基因及其应用
- 本发明涉及刚毛柽柳PHD3转录因子编码基因及其应用，属于植物基因工程育种技术领域。为解决无法利用刚毛柽柳的PHD转录因子编码基因培育优良耐盐植物的问题，本发明提供了刚毛柽柳PHD3转录因子编码基因，即如SEQ ID No...
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- 刚毛柽柳ThP5CR基因的克隆及抗逆功能分析被引量：8
- 2017年
- 【目的】脯氨酸在植物对盐和干旱胁迫应答中起重要的渗透调节作用,增加植物体内脯氨酸含量可以提高植物抗逆性。吡咯啉-5-羧酸还原酶(P5CR)是合成脯氨酸的重要还原酶,本研究拟从抗旱耐盐植物刚毛柽柳中克隆获得1个ThP5CR基因,研究该基因的抗逆功能,为该基因用于林木基因工程育种奠定理论基础。【方法】以"Pyrroline 5 Carboxylate Reductase"作为关键词,对实验室前期构建的刚毛柽柳转录组序列进行比对查找获得ThP5CR基因c DNA序列,并通过RT-PCR和测序验证克隆获得的ThP5CR基因序列。利用生物信息学工具进行序列分析。利用Real time RT-PCR分析不同逆境处理下ThP5CR基因在刚毛柽柳根和叶中的表达情况。为了进一步分析ThP5CR基因的抗逆功能,构建了植物过表达载体pROKⅡ-ThP5CR,并进行刚毛柽柳瞬时转化,同时以pROKⅡ瞬时侵染刚毛柽柳作为对照。分析比较Na Cl和甘露醇胁迫后2种瞬时转化刚毛柽柳的脯氨酸、MDA、H2O2含量和二氨基联苯胺(DAB)、氯化硝基四氮唑蓝(NBT)及伊文思蓝(Evans blue)染色情况,以综合评定ThP5CR基因的抗逆功能。【结果】ThP5CR基因编码273个氨基酸,编码蛋白分子量为28.29 k Da,理论等电点为9.22。含有典型的NADP结构域和P5CR二聚体结构域。2种胁迫(Na Cl和PEG6000)和3种激素(ABA、GA3和JA)处理后,刚毛柽柳ThP5CR基因的表达都发生了不同程度的改变,且每种处理后至少有1个时间点发生了明显改变。此外,Na Cl胁迫、PEG6000胁迫和ABA激素处理对ThP5CR基因的表达产生的影响更为显著。对2种瞬时表达刚毛柽柳植株中ThP5CR基因的表达分析显示成功获得瞬时过表达转基因株系(标记为OX)。进一步的生理指标和生理染色结果显示,非胁迫条件下,过表达植株脯氨酸含量高于对照植株(标记为Con);150 mmol·L-1Na Cl和200 mmol·L-1甘露醇胁迫后,2种转基因株系脯氨酸含量差异则更显著;NBT、
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- 关键词：刚毛柽柳基因表达耐盐抗旱
