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羊水1q12．1微缺失细胞的诱导多能干细胞系的建立: 2015年; 目的建立1q21．1微缺失的多能干细胞系，为进一步探讨该疾病的发病机制提供模型。方法采用逆转录病毒介导4种基因（Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc，简称OSKM）诱导1q21．1微缺失羊水细胞，建立1q21．1微缺失羊水诱导性多能干细胞系（human amniotic fluid-derived cells induced pluripotent stemcells，hAF-IPsCs），并对其进行多能性、核型、芯片、体内外分化能力等鉴定。结果所建立的1q21．1微缺失的hAF-iPSCs在体外能维持自我更新和多能性的状态，可表达多能标志基因，在体外长期培养能维持正常核型，在体内、体外均可向三个胚层分化。芯片结果显示仍具有1q21．1微缺失。结论1q21．1微缺失hAF-iPSCs具有正常多能干细胞所有的各种特性。可用于体外定向诱导分化，模拟疾病发病过程，可为1q21．1微缺失疾病机制的研究提供模型。; 龚亚飞李颖宋艳琴孙筱放宋兵孙雯陈欣洁; 关键词：诱导性多能干细胞多能性

植物凝集素刺激外周血单个核细胞增殖及分泌因子表达的变化被引量：3: 2014年; 背景:植物凝集素可以刺激外周血单个核细胞分裂并引起免疫细胞的活化,是常用的细胞增殖模型。但是全血中的非外周血单个核细胞成分(血浆和无核细胞)在植物凝集素参与的体外培养过程中起到什么作用,以及内皮分泌因子的表达情况尚不明确。目的:在体外单独培养或全血培养外周血单个核细胞过程中,观察植物凝集素对其增殖和凋亡的影响,以及相关炎症因子以及内皮分泌因子的表达变化。方法:分离正常核型成人的外周血单个核细胞,应用无植物凝集素培养基和加入植物凝集素培养基分别进行单独培养,观察细胞形态学变化。收集全血培养或不同条件单独培养的外周血单个核细胞,提取mRNA,荧光定量RT-PCR检测细胞增殖、凋亡,以及炎症因子和内皮分泌因子的表达变化,并进行统计学分析。结果与结论:外周血单个核细胞单独培养和全血培养存在差异,植物凝集素会促进外周血单个核细胞Ki67、增殖细胞核抗原、蛋白水解酶3、γ-干扰素、肿瘤坏死因子β和白细胞介素6的基因表达,抑制蛋白C表达。提示植物凝集素促进体外培养外周血单个核细胞的增殖及凋亡,促使炎症因子表达上调,部分血液生物学相关的内皮分泌因子下调。; 王鼎宋兵钟旋孙筱放范勇; 关键词：植物凝集素外周血单个核细胞细胞增殖荧光定量RT-PCR

Cytoprotective autophagy in a mouse spermatocyte cell line(GC-2spd) exposed to cadmium: Cadmium(Cd)is an environmental and industrial pollutant that induces a broad spectrum of toxicological effects...; 欧展辉牛晓华何文茵陈玉嫦宋兵范狄孙筱放; 文献传递

Autophagy in the human induced pluripotent stem cells of spinocerebellar ataxia 3 differentiation into neuron: Spinocerebellar ataxia 3(SCA3),also known as Machado-Joseph disease(MJD),is the most common dominant inherited...; 欧展辉罗敏牛晓华何文茵陈玉嫦宋兵范狄孙筱放; 文献传递

建立非基因整合iPSCs体系及提高体外造血分化体系的研究: 2016年; 诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,i PSCs)在体外可被诱导分化为多种细胞,该项技术在细胞治疗、药物筛选及疾病研究上具有广阔的前景。体外定向诱导其向造血分化可为临床上使用的造血干细胞提供一种新的来源,提高i PSCs的造血分化效率将是i PSCs临床前治疗要解决的关键问题。该研究采用非整合型病毒重编程正常人的外周血来源的单个核细胞(peripheral blood-derived mononuclear cells,PBMCs),诱导生成i PSCs后对其进行体外造血分化实验。结果显示,通过此种方法进行重编程的i PSCs可稳定传代,体内外均可向三胚层分化。使用OP9细胞与i PSCs共培养可分化为造血干/祖细胞,且添加细胞因子可有效提高分化效率。该研究为进一步提高i PSCs造血分化效率提供了重要的实验依据。; 范荻何文茵宋兵牛晓华欧展辉陈玉嫦孙筱放; 关键词：诱导多能干细胞重编程造血分化

脊髓小脑共济失调3型诱导多能干细胞系的建立和神经分化被引量：3: 2015年; 背景:脊髓小脑共济失调3型(spinocerebellar ataxia type 3,SCA3)是一种典型的遗传相关的神经退行性疾病。建立患者遗传背景的特异的疾病模型有利于研究疾病的发病机制,探讨针对疾病的治疗手段。目的:观察脊髓小脑共济失调3型诱导多能干细胞系的神经分化效率以及CAG拷贝数的稳定性。方法:临床获取脊髓小脑共济失调3型患者皮肤组织,分离培养患者特异的皮肤成纤维细胞,重编程成纤维细胞获得诱导多能干细胞。对患者特异的诱导多能干细胞和正常人的诱导多能干细胞(NHF)和胚胎干细胞(ES-10)进行神经诱导分化,通过流式细胞术比较分化效率,Western Blot检测神经元中ataxin-3的聚集,PCR检测培养过程SCA3/ATXN3基因CAG重复数目。结果与结论:成功获得与成纤维细胞相同遗传背景的诱导多能干细胞,具有与人胚干细胞相似的形态学及多向分化潜能,各细胞系都能定向分化为神经干细胞,重编程前后和诱导神经分化前后的CAG数目无明显改变。来源于脊髓小脑共济失调3型患者的诱导多能干细胞分化为神经干细胞的效率低于正常人诱导多能干细胞(NHF)和胚胎干细胞(ES-10)。这些结果说明通过重编程技术可以成功建立人诱导多能干细胞并将其定向诱导分化为神经干细胞,整个实验过程CAG数目无明显改变,与患者的体细胞相一致。; 罗敏胡丹牛晓华宋兵欧展辉范迪王鼎何文茵孙筱放; 关键词：干细胞分化诱导多能干细胞神经分化国家自然科学基金

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宋兵

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