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猪流行性腹泻病毒S蛋白主要抗原表位区的原核表达及间接ELISA检测方法的建立: 引言猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种以腹泻、呕吐、脱水和哺乳仔猪高致死...; 华耀王玮李郁孙裴魏建忠

2014-2015年安徽地区猪流行性腹泻病毒分子特征和遗传进化分析: 引言猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种以腹泻、呕吐、脱水和哺乳仔猪高致死...; 华耀李郁孙裴魏建忠

安徽部分地区规模化猪场伪狂犬病血清流行病学调查被引量：14: 2017年; 为了解安徽地区不同规模猪场猪伪狂犬野毒(PRV-gE)的感染情况,为防控猪伪狂犬病(PR)提供科学依据,本调查应用ELISA方法,对2012年8月~2015年12月来自224个不同规模猪场的11 855份血清样品进行PRV-gE抗体检测。结果显示,血清样品总阳性率为14.03%,2012年8月~2015年12月分别为2.76%、5.12%、11.61%、26.61%;育肥猪、哺乳仔猪、母猪、保育猪、后备母猪及公猪依次为31.02%、29.27%、27.46%、22.29%、22.22%、18.52%,皖北、皖南和江淮地区分别为28.59%、9.59%、6.49%。猪场总阳性率为41.96%,大型规模场、中等规模场、小型规模场及散养户分别为4.74%、17.00%、23.15%,皖北、皖南和江淮地区分别为48.48%、35.71%、38.53%。结果表明,安徽地区猪群中PRV感染逐年上升,皖北地区样品阳性率显著高于其他地区,其中小型规模场及散养户的感染尤为严重,育肥猪和种猪带毒是伪狂犬病持续存在的重要原因,养殖方式、疫苗免疫、生物安全等因素均对PR的流行产生影响。; 黄晓慧吴华健华耀魏建忠孙裴李郁; 关键词：伪狂犬病酶联免疫吸附试验血清学调查

2014-2015年安徽地区猪流行性腹泻病毒分子特征和遗传进化分析: 为分析2014-2015年安徽地区猪流行性病毒(PEDV)的变异情况,本研究设计合成3对特异性引物,利用RT-PCR方法对2014-2015年分离的15株PEDV毒株的S基因全序列进行扩增,克隆和测序,并对其进行遗传进化...; 华耀王玮李郁孙裴魏建忠; 关键词：猪流行性腹泻病毒 S基因分子特征遗传进化分析

种猪群猪圆环病毒病的净化技术研究被引量：2: 2015年; 为探究种猪群猪圆环病毒病(PCVD)的净化控制措施,通过对种猪群实施猪圆环病毒2型(PCV-2)灭活疫苗免疫(基础免疫2次,以后每隔4个月加强免疫1次),检测(基础免疫前、二免后20d和二免后3个月、加强免疫后3个月分别采集前腔静脉血,分离血清,采用ELISA检测PCV-2抗体、猪瘟抗体,PCR方法检测PCV-2核酸),淘汰加强免疫后PCV-2核酸仍为阳性的种猪,结合分析母猪PCV-2疫苗免疫前后繁殖性能的差异。为期1年净化措施实施的结果显示,种猪群的PCV-2核酸阳性率从33.33%显著下降到3.42%,其中后备猪的PCV-2核酸阳性率从39.02%下降到8.57%,种公猪从33.33%下降到0、经产母猪从15.38%下降到1.56%;母猪窝产仔数增加0.52头(P<0.05),窝产活仔数增加0.78头(P<0.01),窝产木乃伊胎数减少0.3头(P<0.01);种猪群猪瘟免疫抗体合格率从53.73%提高到83.49%,平均阻断率从43.31%升高到63.46%,与种猪群PCV-2核酸检测阳性率呈现负相关。结果表明,实施免疫、检测、淘汰措施对于种猪群PCVD的净化成效明显,该技术可为规模化猪场开展PCVD的净化提供科学依据,具有推广应用价值。; 管亮华耀施雷李郁魏建忠; 关键词：猪圆环病毒2型种猪免疫猪瘟抗体

猪流行性腹泻病毒S蛋白主要抗原表位区的原核表达及间接ELISA检测方法的建立被引量：12: 2016年; 【目的】建立一种快速、特异、敏感的检测血清中猪流行性腹泻病毒(PEDV)抗体的方法。【方法】利用生物学软件对PEDV S蛋白进行抗原位点分析,选择S蛋白的主要抗原表位区进行原核表达。采用SDS-PAGE和Western-blot对重组蛋白进行鉴定及抗原性分析。用纯化的重组蛋白作为包被抗原,经过条件优化、特异性和重复性试验,建立一种针对血清中PEDV抗体的间接ELISA检测方法。【结果】表达了重组S蛋白,重组的S蛋白能与PEDV阳性血清发生特异性反应,并建立一种基于重组S蛋白的间接ELISA检测方法。组内及组间变异系数均小于10%,重复性较好。建立的间接ELISA检测方法分别与商品化PEDV抗体检测试剂盒和Western-blot鉴定结果相比,两者符合率分别为86.67%和88.89%。【结论】建立的间接ELISA方法可以用于PEDV抗体的检测。; 华耀王玮李郁孙裴魏建忠; 关键词：猪流行性腹泻病毒 S基因原核表达

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华耀