马晓霞
- 作品数：43 被引量：49H指数：4
- 供职机构：西北民族大学更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金甘肃省科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 自噬相关蛋白参与抗病原感染机制的研究进展被引量：2
- 2018年
- 细胞自噬(Autophage),是细胞在自噬相关基因(Autophagy—related gene,ATG)的调控下利用溶酶体降解自身受损的细胞器和大分子物质的过程。细胞自噬与细胞凋亡、细胞衰老相似,是十分重要的生物学现象,参与生物的发育、生长等多种生命过程。
- 马鹏常秋燕李林杰郭富城李凌浩张德荣张德荣马忠仁
- 关键词：自噬病原大分子物质细胞器
- 一种多肽纯化装置
- 本实用新型公开了一种多肽纯化装置，涉及纯化装置技术领域，包括底座，所述底座的顶端一侧固定连接有支撑杆，所述支撑杆的一侧固定连接有固定柱，所述固定柱的内侧开设有滑轨，所述固定柱的底端固定连接有电机仓，所述电机仓的内部固定连...
- 赵永清霍生东马晓霞
- 文献传递
- 细胞受体介导的免疫信号通路研究进展
- 2017年
- 免疫系统的细胞是通过其表面多样化受体来实现感知外界环境的变化和其与其他细胞信息交流的。在这些细胞中,淋巴细胞抗原受体已经得到深入研究。目前,其他免疫细胞受体与淋巴细胞上其他受体的分子机制也已经被研究得很清楚了。细胞表面受体所运送的细胞外界信息是通过细胞膜来产生一系列的胞内生物化学事件。信号传输的形式多种多样,这种过程被称为信号转导,它可以将信号传输到细胞的特定部位,并且将其作用维持和调控至特定的部位。大多数信号的终点是细胞核和细胞骨架。信号到达细胞核就改变基因表达,产生一些新的蛋白质,像细胞因子、化学增活素和细胞黏附因子,从而使免疫细胞在机体免疫系统的正确调控下发挥免疫学功能。
- 周小凯徐文凯徐文凯李林杰马晓霞
- 关键词：免疫系统受体细胞膜信号传导信号分子
- 牦牛源BVDV非结构蛋白NS5A的原核表达及抗原表位分析
- 2022年
- 【目的】利用原核表达系统体外表达牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)NS5A基因,获得非结构蛋白NS5A,对其进行核苷酸、氨基酸序列分析,以解析BVDV非结构蛋白NS5A的功能。【方法】参考BVDV-1型毒株V006的NS5A基因序列(GenBank登录号:KX170647)设计并合成1对特异性引物,以分离到的牦牛BVDV GSTZ毒株cDNA为模板,PCR扩增NS5A基因片段,并克隆至表达载体pET-28a(+)中,构建重组原核表达载体pET28a-NS5A。经酶切初步鉴定及测序鉴定正确后,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,然后利用IPTG诱导表达。经10%SDS-PAGE电泳及Western blotting分析鉴定重组蛋白的表达,并根据NS5A基因的序列构建遗传发育进化树,利用DNAStar软件预测NS5A蛋白的亲水性、表面可塑性和抗原性等特性,并结合二级结构的预测对NS5A蛋白的B细胞抗原表位进行预测。【结果】PCR扩增NS5A目的基因片段为1488 bp,双酶切和测序鉴定结果证明,重组质粒pET28a-NS5A构建成功。经10%SDS-PAGE电泳及Western blotting鉴定重组蛋白,表达出了大小为55 ku的目的蛋白,大小与预期结果相符。通过对不同BVDV毒株NS5A基因序列构建遗传发育进化树,显示GSTZ毒株NS5A在遗传进化特征上属于BVDV-1型。NS5A蛋白的亲水性主要位于12—21、32—69、75—113、120—135、143—147、152—163、165—180、215—230、265—274、296—340、348—378、389—447、455—463、469—495位氨基酸处,表面可塑性主要位于14—18、37—42、76—81、86—109、154—160、169—178、218—228、297—309、348—358、365—373、414—442、430—437、454—460位氨基酸处,柔性区域较多,主要位于14—21、37—43、67—82、86—93、97—110、152—158、169—179、218—231、240—255、296—310、313—328、344—359、364—373、413—422和472—483位氨基酸处。NS5A蛋白的B细胞抗原表位主要位于15—18、76—81、154—158、169—178、218—228、297—309、348�
- 王慧慧冯茜莉蒲飞洋李易聪汪梦竹周小凯赵泽阳马忠仁李倬马晓霞
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒非结构蛋白NS5A原核表达
- 一种基于RPA的牛病毒性腹泻病毒检测试剂盒及其应用
- 本发明提供用于检测牛病毒性腹泻病毒的引物对，所述引物对为：UTR‑F：5’‑GAGGCTAGCCATGCCCTTAGTAGGACTAGCAWA‑3’；UTR‑R：5’‑GGYYTCTGCWRCACCCTATCAGGCTG...
- 马忠仁马晓霞马鹏李明生曹欣常秋燕周小凯张德荣
- 文献传递
- 一种永生化小鼠造血干细胞系的制备方法
- 本发明公开了一种永生化小鼠造血干细胞系的制备方法，是采用Tet‑On诱导型逆转录病毒载体，通过添加Doxycycline以诱导Lhx2基因在成年骨髓的血液祖细胞/干细胞中表达，获得造血干细胞系。本发明的有益效果为：本发明...
- 曹欣蔡葵蒸马晓霞薛宇佳许强任瑞
- 文献传递
- 一株牦牛源牛病毒性腹泻病毒毒株的分离鉴定及其遗传特性分析被引量：1
- 2022年
- 通过病毒分离培养技术,从牦牛血清中分离获得一株致细胞病变的牛病毒性腹泻病毒(BVDV),命名为GSTZ毒株。经电镜观察,GSTZ毒株的直径在50~60 nm。按Karber法测算,该病毒滴度为5.0×10^(6.5) mL^(-1)[以组织半数感染量(TCID_(50))计]。利用反转录PCR(RT-PCR)测定GSTZ毒株的完整开放阅读框(ORF),全长11691 nt,将其与参考毒株ORF在核酸序列和同义密码子使用模式等方面进行分析,确定GSTZ毒株在遗传学特性上属于基因1型家族成员。在GSTZ毒株的完整ORF中,A+U的出现频率要高于G+C,而且,病毒同义密码子的使用模式体现出对U/A结尾同义密码子使用偏嗜性高的遗传学特征。GSTZ毒株明显降低了使用含有CpG二联核苷酸的同义密码子的频率。这有助于降低病毒对宿主细胞免疫系统的刺激强度,从而促进病毒的复制增殖。研究成果可为进一步研究BVDV的相关分子机制提供试验材料,并为BVDV不同基因型的抗原关系分析与BVDV疫苗的研制奠定基础。
- 王慧慧冯茜莉汪梦竹赵泽阳李易聪蒲飞洋马鹏李勇龚真莉马忠仁马晓霞
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒牦牛同义密码子
- BVDV SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法与RT-PCR方法的建立与应用被引量：3
- 2017年
- 利用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法和RT-PCR方法建立2种有效地实验室检测牛病毒性腹泻病毒的方法。根据Gen Bank中登录的牛病毒性腹泻病毒基因序列,选取14株BVDVⅠ型和7株BVDVⅡ型,经序列比对后,设计合成1对特异性引物,建立了检测BVDV的RT-PCR方法和SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法。通过对RT-PCR方法和SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法的特异性、灵敏性和重复性进行检测。结果显示,该方法可从BVDV标准毒株Oregon C24V中扩增出250 bp的特异性片段,对牛细小病毒、牛副流感病毒、牛腺病毒、呼肠孤病毒的扩增结果均为阴性,对BVDV C24V株、GSTZ株、Av69株、S183株和BVDVⅡ型扩增结果为阳性。经对标准毒株的细胞毒进行检测,RT-PCR的灵敏性为10-1TCID_(50)/mL,SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法的灵敏性为3.4×102copies/μL。应用2种方法对临床血清样本进行检测,结果比病毒分离方法更为敏感,操作简便。表明建立的RT-PCR方法和SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法具有特异、灵敏、高效、快速的特点,可用于BVDV的流行病学监测、实验室检测以及诊断。
- 马鹏李林杰常秋燕王悦萦郭富城刘萍马晓霞马晓霞
- 关键词：RT-PCRSYBR
- 宿主体内基因调控为导向的抗流感机制
- 2023年
- 流感病毒的复制会同时受到宿主细胞因子的协助与拮抗。宿主细胞因子在应对流感病毒所表现出来“顺从与反抗”的两面性是未来针对宿主而非病毒本身的抗病毒药物设计的理论基础。这一概念也被称为宿主导向疗法(host-directed therapeutics, HDTs)。利用基因筛查技术已经筛选出能够调节流感病毒感染的宿主因子,这些因子可作为宿主导向抗病毒策略的候选靶点。然而,尽管在了解宿主靶点方面取得了进展,但是目前还没有可用于临床中针对流感病毒的宿主导向干预措施。就上述存在的问题,本篇综述将系统阐述基于基因敲除/敲低以及过表达筛选中发现的一些宿主因子的生物学特性,并且讨论分析这些因子用于宿主导向的抗流感策略中的潜在价值。
- 胡欣妍杨宣叶吴玉湖王进千高明阳马忠仁马晓霞
- 关键词：流感病毒靶点
- 牛病毒性腹泻病毒GSTZ株E1基因原核表达载体的构建及表达
- 2017年
- 为研究牛病毒性腹泻病毒的囊膜糖蛋白E1的抗原性,参考了Oregon C24V BVDV毒株的基因组序列(AF091605.1),并设计一对特异引物(上游引物5’-CCC GGA TCC ATG GCC TCT CCC TAC TGT-3’,下游引物5’-GGG CTC GAG TTA CCC TTG TGC TCC TGT T-3’),利用RT-PCR从病毒基因组中扩增E1基因609 bp全长片段,测序结果表明,与C24V株核苷酸同源性达100%.扩增产物经BamHI和XhoI双酶切,亚克隆至原核表达载体,双酶切鉴定表明成功构建了重组表达载体pET-32a(+)-E1.重组表达载体转化BL21(DE3)宿主菌,IPTG诱导表达,经SDSPAGE和Western-blot检测,成功诱导表达出25ku E1蛋白.实验结果为进一步研究BVDVE1蛋白的功能提供了参考.
- 谢军周昌娈周小凯周小凯马忠仁马晓霞
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒E1基因原核表达
