刘永巧
- 作品数：14 被引量：54H指数：5
- 供职机构：教育部更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 辅助降糖片对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响
- 2019年
- 目的以HepG2细胞为实验对象,探讨辅助降糖片的体外降糖效果及胰岛素传导关键信号胰岛素受体(insulin receptor,InsR)、丙酮酸脱氢激酶-1(phosphoinositide-dependent protein kinase-1,PDK1)的影响。方法培养HepG2细胞,CCK-8法检测辅助降糖片对HepG2细胞增殖的影响以确定其可作用于HepG2细胞的的浓度,采用高浓度胰岛素刺激建立胰岛素抵抗模型,用葡萄糖检测试剂盒检测辅助降糖片对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗的影响,Western Blot法探讨其可能的作用机制。结果辅助降糖片浓度高于300μg/mL时对HepG2细胞有较强的抑制作用,300、150与模型组相比葡萄糖消耗量具有极显著差异(P<0.05)。Western Blot显示与正常组相比,模型组PDK1、InsR蛋白表达显著降低(P<0.05),与模型组比较给药组,PDK1、InsR表达显著升高(P<0.05)。结论辅助降糖片对HepG2细胞胰岛素抵抗有改善作用,其作用机制可能是通过PI3K/Akt通路来改善2型糖尿病的胰岛素抵抗。
- 刘永巧魏颖孙巍巍王扬何乐毅凡刘铜华徐暾海
- 关键词：HEPG2细胞胰岛素抵抗胰岛素信号通路
- 胡凯文运用壁虎、蜈蚣药对治疗恶性肿瘤的临床经验被引量：18
- 2018年
- 虫类药是传统中药的重要组成部分,具有解毒散结、搜风剔络的特点,在肿瘤治疗中常被采用,现代药理研究也证实其具有抗肿瘤作用。胡凯文教授长期从事恶性肿瘤的中西医结合临床工作,在中医治疗方面,胡教授喜将壁虎、蜈蚣二药作为药对,将其焙干、研末装胶囊并配合其他中药汤剂口服治疗,可抑制肿瘤生长、延长患者生存期。文章将从壁虎、蜈蚣的本草考证、抗肿瘤作用药理研究和胡教授应用二药的治疗理念几个方面,阐明此药对的应用价值。
- 孙满强胡凯文杨新阶刘永巧陈琪周天
- 关键词：恶性肿瘤壁虎蜈蚣本草考证
- 糖痹康颗粒HPLC指纹图谱研究被引量：2
- 2017年
- 目的建立糖痹康颗粒HPLC指纹图谱,科学评价并有效控制其质量,确保其生产的稳定性。方法采用德国默克RP-18 endcapped色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸水为流动相梯度洗脱,柱温40℃,流速1 m L/min,检测波长240 nm,进样量20μL。采用国家药典委员会《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版》对10批糖痹康颗粒制剂进行相似度评价,并对处方中的9味药进行相关性分析。结果以汉黄芩苷为参照峰,初步建立糖痹康颗粒HPLC指纹图谱,10批糖痹康颗粒制剂的HPLC指纹图谱相似度在0.90以上,标示出25个共有色谱峰,其中18个归属到方中各药材。结论该方法分离效果好、准确、简单,可为糖痹康颗粒质量评价提供参考。
- 王东超魏颖高佳琪孙文秦灵灵朱寅荻徐云玲石浩霞刘永巧屈玲霞徐暾海刘铜华
- 关键词：指纹图谱相似度
- 高剂量丹参、川芎对Lewis肺癌小鼠肿瘤的影响及机制研究被引量：7
- 2018年
- 目的探究高剂量活血化瘀药丹参、川芎对Lewis肺癌小鼠肿瘤侵袭转移的影响及其可能作用的机制。方法采用腋下接种Lewis肺癌细胞悬液的方法制备Lewis肺癌小鼠模型30只,随机分为模型组、顺铂组、高剂量丹参组、高剂量川芎组、丹参联合顺铂组和川芎联合顺铂组,每组5只。顺铂组、丹参联合顺铂组和川芎联合顺铂组均给予顺铂4 mg/kg腹腔注射,高剂量丹参组、丹参联合顺铂组以2. 16 g/kg剂量丹参灌胃,高剂量川芎组、川芎联合顺铂组以3. 6 g/kg剂量川芎灌胃,模型组给予等体积生理盐水腹腔注射和灌胃。灌胃1次/d,腹腔注射于造模后第1、3、5天进行。每2 d记录1次小鼠体重,并于治疗后第14天将小鼠断颈处死取材,称取肿瘤质量,计算抑瘤率;采用Western-Blot法检测肿瘤组织内Twist和血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果各组小鼠体重,模型组、高剂量丹参组和高剂量川芎组>顺铂组、丹参联合顺铂组和川芎联合顺铂组(P <0. 05),高剂量丹参组、高剂量川芎组和模型组比较差异无统计学意义。计算抑瘤率,发现中药对肿瘤生长并没有抑制作用,反而具有促进作用。肿瘤组织免疫印迹结果显示高剂量川芎组肿瘤组织Twist蛋白表达高于模型组(P <0. 05),高剂量丹参组肿瘤组织VEGF-A蛋白表达高于模型组(P <0. 05)。结论高剂量活血化瘀中药川芎、丹参对Lewis肺癌小鼠肿瘤侵袭转移具有促进作用,其机制可能与调控Twist和VEGF-A蛋白的表达有关。
- 孙满强胡凯文杨新阶陈琪刘永巧周天
- 关键词：LEWIS肺癌小鼠
- 葫芦巴碱对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响被引量：7
- 2018年
- 目的:探讨葫芦巴碱对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响。方法:培养HepG2细胞,MTT法检测葫芦巴碱对HepG2细胞增殖的影响以确定可作用于HepG2细胞的葫芦巴碱的浓度;将HepG2细胞置于含胰岛素浓度为1×10^(-6)mol/L的培养液中,培养36 h成功建立胰岛素抵抗模型后,每孔加入100μL不同浓度的含药培养基,用葡萄糖检测试剂盒检测葫芦巴碱对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗的影响。结果:葫芦巴碱浓度为3,000、2,500、2,000、1,500、1,000、500μmol/L时的细胞存活率分别为21.38%、39.23%、51.43%、73.36%、86.23%、91.88%,葫芦巴碱浓度>1,000μmol/L时对细胞有明显的毒性,故选择终浓度为1,000、500、250、100、50、25μmol/L进行实验,各浓度葫芦巴碱对胰岛素抵抗的HepG2细胞的葡萄糖消耗分别为(4.679±0.04)、(3.994±0.062)、(3.683±0.094)、(3.633±0.120)、(3.619±0.119)、(3.503±0.128)μmol/L,其中,前两个浓度与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:葫芦巴碱对HepG2细胞胰岛素抵抗有改善作用。
- 刘永巧魏颖魏颖屈玲霞魏颖高佳琪
- 关键词：HEPG2细胞胰岛素抵抗模型降糖活性
- 尖叶假龙胆乙酸乙酯部位对胰岛素抵抗HepG2细胞IRS-1、Akt的影响被引量：4
- 2017年
- 目的:研究尖叶假龙胆乙酸乙酯部位对胰岛素抵抗HepG2细胞胰岛素关键信号IRS-1、Akt的基因、蛋白的影响。方法:以CCK-8法检测HepG2细胞活性;采用人肝癌HepG2细胞,并用高浓度胰岛素(10^(-6)mol·L^(-1))培养HepG2细胞36 h,建立胰岛素抵抗细胞模型。根据CCK-8法结果分为正常组(Control组)、模型组(IR组)、尖叶假龙胆乙酸乙酯部位IR+50μg·mL^(-1)组、IR+500μg·mL^(-1)组及二甲双胍组,以葡萄糖试剂盒检测葡萄糖消耗量。尖叶假龙胆乙酸乙酯部位给药6 h后RT-PCR检测胰岛素抵抗HepG2细胞IRS-1、Akt基因表达;尖叶假龙胆乙酸乙酯部位给药6 h后,利用Western blot法检测IRS-1、Akt的蛋白表达。结果:尖叶假龙胆乙酸乙酯部位浓度为500μg·mL^(-1)时,存活率达到95%。浓度高于500μg·mL^(-1)时,存活率下降;与IR组比较,IR+50μg·mL^(-1)组与IR+500μg·mL^(-1)组促进胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖的消耗量,但其作用不及盐酸二甲双胍组。给药6 h后与IR组比较,IR+50μg·mL^(-1)组与IR+500μg·mL^(-1)组的RT-PCR检测胰岛素抵抗HepG2细胞IRS-1、Akt的基因表达显著升高,P<0.01。给药6 h后与IR组比较,IR+50μg·mL^(-1)组与IR+500μg·mL^(-1)组的Western blot法检测IRS-1、Akt的蛋白表达显著升高,P<0.01。结论:尖叶假龙胆乙酸乙酯部位上调HepG2细胞胰岛素信号通路关键靶点IRS-1、Akt基因表达,以及IRS-1、Akt蛋白表达从而可能是其改善胰岛素抵抗作用的机制。
- 高佳琪魏颖屈玲霞刘永巧刘一冰徐暾海刘铜华
- 关键词：HEPG2细胞胰岛素抵抗胰岛素信号
- UPLC-ESI-MS^n法测定糖痹康颗粒入血成分研究
- 2017年
- 目的:通过UPLC-ESI-MSn方法定性分析糖痹康颗粒(TBK)的入血成分,初步阐明糖痹康颗粒的药效物质基础。方法:采用UPLC-LTQ-Orbitrap高分辨液质联用仪,在电喷雾离子源的正、负离子模式下,对空白血清、糖痹康颗粒经大鼠给药后的含药血清进行检测。根据离子碎片信息,偶电子规律,氮规则等并结合相应参考文献,定性分析并鉴定入血成分。结果:糖痹康颗粒灌胃给药后,在大鼠血清中发现15个入血成分,其中13个是以原型成分被吸收,其余2个可能为代谢产物。结论:糖痹康入血成分是各组方药味配伍后共同作用的结果,在大鼠血清中,多数成分已经被大鼠代谢吸收,少数以原型成分吸收。本实验为糖痹康颗粒的药效物质基础和体内代谢研究提供参考。
- 王东超魏颖高佳琪刘一冰屈玲霞刘永巧徐暾海刘铜华
- 关键词：入血成分药效物质基础
- 芍药内酯苷对大鼠坐骨神经雪旺细胞的保护作用研究被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨糖痹康颗粒中主要成分芍药内酯苷对大鼠坐骨神经雪旺细胞(Schwann Cells,SCs)的影响作用。方法:本实验通过不同浓度的葡萄糖对大鼠坐骨神经雪旺细胞的影响的研究,建立了以150 mmol·L^(-1)D-葡萄糖,培养时间为48 h的细胞氧化应激模型,通过设立芍药内酯苷高中低组(100μM、20μM、4μM),模型组,维生素C组(100μM),正常组,利用流式细胞仪定量检测细胞内ROS含量和荧光显微镜定性观察细胞内ROS状态以及CCK-8检测细胞活性。结果:采用CCK-8法检测细胞增殖情况,48 h后,模型组与正常组有明显的差异P<0.01;芍药内酯苷给药组与模型组相比,P<0.01;芍药内酯苷可以促进雪旺细胞增殖。通过检测ROS荧光含量,发现芍药内酯苷100、20、4μM与模型组(Glu 150 mM)相比,各组P<0.01,表明芍药内酯苷可以减轻雪旺细胞内ROS,缓解氧化应激状态。结论:芍药内酯苷可以通过增加雪旺细胞增殖,改善氧化应激状态对雪旺细胞产生保护作用。
- 王东超魏颖高佳琪刘一冰屈玲霞刘永巧徐暾海刘铜华
- 关键词：芍药内酯苷雪旺细胞神经保护
- 鹰嘴豆中三种异黄酮醚化反应研究被引量：6
- 2017年
- 目的:改善鹰嘴豆中三种异黄酮的药物活性。方法:以鹰嘴豆芽素A、刺芒柄花素、染料木素为原料,以丙酮为溶剂,碳酸钾作为催化剂,分别与1,3-二溴丙烷,1-溴丙烷,3-溴丙烯进行醚化反应。结果:合成了9个异黄酮类衍生物,方法简便、条件易控、产率较高。结论:产物结构通过1H-NMR、13C-NMR、ESI-MS分析确认,为进一步对其生物活性研究奠定结构基础。
- 李博刘永巧石浩霞徐暾海刘铜华
- 关键词：鹰嘴豆芽素A醚化反应
- HPLC同时测定辅助降糖片中芦丁、异槲皮苷、槲皮素的含量被引量：2
- 2020年
- 目的:建立同时测定辅助降糖片中芦丁、异槲皮苷、槲皮素含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱:Thermo syncronis C18(250 mm×4.6 mm,5μm)。流动相:乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)。梯度洗脱:0~5分钟,12%(B);5~15分钟,22%(B);15~25分钟,28%(B);25~30分钟,30%(B);30~40分钟,35%(B)。流速:1 mL/min。柱温:35℃。检测波长:370 nm。进样量为20μL。结果:芦丁、异槲皮苷、槲皮素的进样量分别在50~1000 mg/L(r1=0.998)、20~600 mg/L(r2=0.997)、10~200 mg/L(r3=0.998)范围内与峰面积积分值呈良好线性关系;平均回收率分别为102.62%、98.58%、100.31%。结论:该方法准确、可靠、重复性良好可用于辅助降糖片的质量控制。
- 刘永巧魏颖魏颖孙巍巍魏颖徐暾海王扬
- 关键词：高效液相色谱法芦丁异槲皮苷槲皮素
