陈礼朋
- 作品数：7 被引量：21H指数：2
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划河南省科技成果转化计划项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 传染性法氏囊病病毒河南分离株(HN04)A片段cDNA的克隆及序列分析
- 2012年
- 利用RT-PCR技术,以传染性法氏囊病毒河南分离株(HN04)基因组RNA为模板,扩增并克隆IBDV HN04株基因组A片段cDNA。测序结果表明:克隆的A片段全长3260个核苷酸,包括2个部分重叠的开放阅读框(ORFl和ORF2)及两端的非编码区。ORFl和ORF2分别编码含有1012个氨基酸的结构蛋白(VP2-4-3)及含有145个氨基酸的VP5。IBDV HN04株基因组A片段核苷酸序列与来自GenBank IBDV血清Ⅰ型毒株核苷酸序列的同源性高达94.9%～99.4%,血清Ⅱ型毒株核苷酸序列同源性为83.8%。对IBDV HN04株的A片段核苷酸及其推导氨基酸进行序列分析,结果显示HN04株与国内外IBDV数株弱毒株的同源性在99.0%以上。
- 张宇耕卢佳崔保安李新生王子馨陈礼朋
- 关键词：IBDV克隆
- 鸡新城疫病毒HN09-69株主要基因的克隆、原核表达及鉴定
- 新城疫(Newcastledisease.ND)是由新城疫病毒(Newcastlediseasevirus，NDV)引起禽的高度接触性传染病，主要引起呼吸道，神经系统或肠道病变。NDV是单股负链的RNA病毒，为副黏病毒科...
- 陈礼朋
- 关键词：鸡新城疫病毒原核表达融合蛋白蛋白纯化
- 文献传递
- 2010—2011年河南省部分地区H9亚型禽流感、新城疫和鸡传染性支气管炎的流行病学调查被引量：18
- 2012年
- 为了解河南省H9亚型禽流感、新城疫和鸡传染性支气管炎的流行情况。从河南省15个地市发病鸡场采集病鸡组织样品309份,采用鸡胚尿囊腔传代接种法分离病毒,并利用血凝试验(HA)、血凝抑制试验(HI)和RT-PCR试验对分离毒株进行鉴定。结果表明:3类病毒的总检出率为26.54%,其中NDV、IBV和AIV(H9)的检出率分别为11.00%、3.88%和11.65%。2010年10月NDV和IBV检出率均最高,分别为30.00%、15.00%,2011年1月AIV(H9)检出率最高,为43.24%。2类病毒混合感染的检出率达3.24%。表明2010年7月—2011年4月H9亚型禽流感、新城疫以及鸡传染性支气管炎在河南省部分地区普遍流行,且存在一定程度的混合感染。为有效预防和控制河南省3种主要疫病提供了科学依据。
- 岳旭龙陈礼朋李双亮高文明张宇耕崔保安李新生
- 关键词：流行病学调查H9亚型禽流感新城疫鸡传染性支气管炎
- 2010-2011年河南省部分地区H9亚型禽流感、新城疫和鸡传染性支气管炎的流行病学调查
- 河南省15个地市发病鸡场病鸡组织309份,应用鸡胚法进行病毒的分离,并通过血凝(HA)试验、血凝抑制(HI)试验和RT-PCR试验对分离毒株进行鉴定.结果分离得到H9亚型禽流感病毒36株,新城疫病毒34株,鸡传染性支气管...
- 岳旭龙陈礼朋李双亮高文明张宇耕崔保安李新生
- 关键词：H9亚型禽流感新城疫病毒鸡传染性支气管炎流行病学
- 鸡α-2,3-唾液酸转移酶Ⅰ基因的克隆和真核表达载体的构建被引量：3
- 2013年
- 试验利用Trizol法从鸡肠道组织提取总RNA,采用特异性引物通过RT-PCR扩增出α-2,3-唾液酸转移酶Ⅰ(α-2,3-sialyltransferaseⅠ,ST3GALⅠ)基因的cDNA片段,并将其克隆至pGEM-T easy载体,获得阳性重组质粒,再以阳性重组质粒为模板亚克隆ST3GALⅠ基因的完整ORF区,定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)上,进行PCR、限制性酶切和DNA序列分析鉴定。结果表明,ST3GALⅠ基因全长1029bp,测序结果同GenBank数据库收录的序列一致,无任何密码子缺失与突变,插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)上的目的基因大小方向均正确。本研究成功构建了pcDNA3.1(+)-ST3GALⅠ真核表达载体,为下一步的真核表达及对ST3GALⅠ基因的功能研究奠定了基础。
- 刘媛媛王俊亚张晓娟陈礼朋岳旭龙高文明李双亮崔保安李新生
- 关键词：禽流感病毒受体真核表达载体
- 新城疫病毒HN09-69株P基因的克隆、序列分析及表达
- 2012年
- 【目的】对新城疫病毒(NDV)HN09-69株P基因进行克隆、序列分析和表达鉴定,为研究P和V蛋白的功能,及NDV新流行毒株的免疫预防提供理论依据。【方法】以HN09-69株NDV为研究对象,根据GenBank上发布的相关P基因参考序列设计引物,进行RT-PCR扩增、克隆和序列测定分析,将P基因的核苷酸序列与相关参考株的P基因序列进行比对分析并构建进化树。将P基因克隆到原核表达载体PET28a(+)中,得到重组质粒rPET28a(+)-P,将重组表达质粒转化到BL21(DE3)中诱导表达,用SDS-PAGE电泳和Western blotting检测表达情况。【结果】扩增出了HN09-69株P基因的ORF,序列长度为1 188bp。NDV HN09-69株核苷酸与弱毒株La Sota、clone-30同源性分别为82.5%和82.4%,与强毒株F48E8同源性为84.9%,与鸭源,鹅源NDV核苷酸同源性分别为97.9%～98.4%和96.0%～98.0%。SDS-PAGE电泳和Western blotting检测结果表明,重组P蛋白分子质量约为54ku,符合预期结果,在大肠杆菌中主要以可溶性的形式表达。【结论】NDV HN09-69株与SDWF-02和SD-09鸭源强毒分离株同源性高,亲缘关系近。重组P蛋白在大肠杆菌中得到了高效表达。
- 陈礼朋王忠田岳旭龙王泽仁高文明李双亮张宇耕崔保安李新生
- 关键词：新城疫病毒P基因SDS-PAGEWESTERNBLOTTING
- 鸡新城疫病毒HNO9-69株主要基因的克隆、原核表达及鉴定
- 新城疫(Newcastle disease.ND)是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引起禽的高度接触性传染病,主要引起呼吸道,神经系统或肠道病变。NDV是单股负链的RNA病毒,为副黏...
- 陈礼朋
- 关键词：新城疫病毒克隆原核表达融合蛋白蛋白纯化
