张海燕 作品数:74 被引量:252 H指数:8 供职机构: 南方医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 国家重点实验室开放基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 电子电信 更多>>
一种基于重组聚合酶扩增和纸基电化学发光的核酸检测方法 被引量:2 2018年 基于重组聚合酶扩增(RPA)技术和纸基电化学发光(ECL)技术,结合RPA高特异性、操作简便和ECL高灵敏度、快速等特点,建立了一种新型核酸检测方法。以乙型肝炎病毒(HBV)基因片段的质粒为模板,设计特异性引物,对上游引物进行三联吡啶钌标记,生物素标记下游引物,通过RPA反应形成三联吡啶钌和生物素双标记的扩增子,链霉亲和素磁微球分离扩增子,纸基ECL检测三联吡啶钌信号。考察了上游引物三联吡啶钌标记效果,标记率为74.62%。优化了RPA反应参数条件,表明于30℃扩增20min即达到最佳核酸扩增效果。在HBV基因质粒模板浓度为0.12~1 200ng/mL范围内,纸基ECL响应峰面积与其浓度对数值呈现良好的线性关系,检出限(S/N>3)为1.2pg/mL。本方法可为在条件有限的现场进行核酸的快速检测提供实验依据。 夏舒 陈钰 李昕 张海燕 刘仲明 王捷关键词:电化学发光 核酸检测 纸基 传染性病毒联合检测基因芯片的研究制备 流行性感冒是一种由流感病毒引起的上呼吸道传染病。流感极易在人群中传播,历史上几次流感的大流行都造成成千上万人死亡。流感病毒分为甲(A)、乙(B)、丙(C)三型,甲型流感又包含15个血凝素(hemagglutinin,HA... 张海燕关键词:基因芯片 文献传递 应用iTRAQ定量蛋白质组学技术筛选胚胎发育不良性神经上皮肿瘤差异表达蛋白 应用同位素标记相对和绝对定量蛋白质组学技术(iTRAQ)筛选中国大陆黄种人胚胎发育不良性神经上皮肿瘤差异表达蛋白.将胚胎发育不良性神经上皮肿瘤实体组织标本(6例)与正常脑组织标本(2例),各组标本混合后提取蛋白,进行定量... 廖秋林 张伟 彭大云 王蔚 张海燕 陈晓东乙型脑炎病毒与黄热病病毒联合诊断基因芯片的初步实验研究 被引量:3 2007年 目的制备乙型脑炎病毒(JEV)与黄热病病毒(YFV)联合诊断基因芯片。方法基于早期实验室研究挑选出28条寡核苷酸探针制备检测芯片。克隆于质粒上的乙型脑炎病毒和黄热病病毒基因片段用于检测探针特异性,经限制性显示技术扩增并标记,与芯片杂交后完成扫描和数据分析。结果JEV、YFV探针与相应的荧光标记样本杂交后,均能检测出阳性荧光信号,而空白对照则检出阴性信号。结论基因芯片技术为病毒检测提供了一种早期、可靠的方法,具有应用于多病毒临床鉴别诊断的前景。 张海燕 马文丽 李凌 吴清华 郑文岭关键词:乙型脑炎病毒 黄热病病毒 基因芯片 杂交 2005-2009年鲍氏不动杆菌检出及耐药率分析 被引量:94 2010年 目的分析医院2005-2009年鲍氏不动杆菌检出及耐药性变迁规律,主要药物用量与耐药率变化之间的关系,为有效控制鲍氏不动杆菌感染率及耐药性不断上升的研究提供流行病学资料,也为临床医师用药提供指导。方法回顾性分析医院2005年1月-2009年12月临床送检标本中鲍氏不动杆菌检出率及耐药性,并对主要药物年用量进行统计。结果鲍氏不动杆菌2005-2009年分离率分别为:13.7%、12.6%、4.3%、9.2%、6.5%,对常用药物的耐药率呈逐年上升趋势。结论及时监控和掌握医院的鲍氏不动杆菌的耐药特点,是合理使用抗菌药物,努力控制和减少多药耐药鲍氏不动杆菌感染的关键。 朱会英 王艳 褚亚辉 徐德兴 张海燕关键词:鲍氏不动杆菌 耐药率 抗菌药物 应用不对称PCR技术提高寡核苷酸基因芯片杂交效率 被引量:11 2005年 目的:比较采用常规PCR和不对称PCR分别进行样品的掺入荧光标记,应用于60mer寡核苷酸芯片杂交,分析其对芯片杂交效率的影响。方法:以A/T克隆分别将NS1、NS2a、NS2b、NS4a和NS4b基因片段与pMD18-T载体连接,应用常规PCR和不对称PCR两种方法进行掺入荧光标记,将荧光标记样品与寡核苷酸芯片杂交,在相同条件下完成杂交清洗和芯片的扫描检测。结果:与常规PCR标记方法相比,采用不对称PCR技术标记单链样品与寡核苷酸芯片杂交,能提高芯片的杂交效率。结论:应用不对称PCR技术对样品进行荧光标记后,与寡核苷酸芯片杂交能提高芯片的杂交效率,有利于检测型寡核苷酸基因芯片的应用。 张海燕 马文丽 李凌 吴清华 郑文岭关键词:聚合酶链反应 寡核苷酸类 基因 一种用于CYP3A5基因分型的电化学传感器阵列设计 2011年 目的:设计一种用于检测CYP3A5基因分型的电化学传感器阵列及其不同基因型的判别方法。方法:设计的电化学基体由印刷电路板(PCB)组成,该电路板包含一组金电极。每个金电极表面修饰有包含单链捕获探针的自组装单分子膜。设计中使用二茂铁做为电活性指示剂,基因分型检测是通过两种不同电势的二茂铁衍生物分别标记等位基因特异性信号探针来实现。结果:该设计能构建一种快速准确、操作简便的DNA电化学传感器阵列检测系统。结论:本文设计为使用电化学方法检测基因分型提供了一种新方法和新技术。 张海燕 王捷 陈钰 吴小丽 刘仲明关键词:传感器 基因分型 高分辨率熔解曲线分析法检测胶质瘤中异柠檬酸脱氢酶1基因突变 被引量:1 2013年 目的采用高分辨率溶解曲线分析法检测胶质瘤中异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)基因突变,探讨其应用于临床检测的可行性。方法首先采用高分辨率溶解曲线分析法检测9例胶质瘤患者中IDH1基因的突变情况,并以直接测序法对结果进行验证。结果通过高分辨率熔解曲线分析法,确认9例胶质瘤患者中有6例发生了IDH1突变,其中5例为R132H(CGT〉CAT),1例为R132C(CGT〉TGT),其余检测均为野生型。经直接测序对以上9例标本进行验证,证实所有患者的突变情况与高分辨率熔解曲线分析法的结果一致。结论应用高分辨率熔解曲线分析法检测临床样本IDH1突变与直接测序法比较具有操作简便、快速、结果准确的优点,适合在临床开展。 张海燕 王捷 陈晓东 张伟 冼江关键词:胶质瘤 突变 高分辨率熔解曲线分析 CYP3A5基因多态性对中国肾移植受者他克莫司血药浓度和疗效的影响 被引量:14 2011年 目的研究CYP3A5基因多态性对肾移植受者他克莫司(FK506)血药浓度/剂量比(blood drug concentration/dose,C/D),术后急性排斥反应(AR)及不良反应发生率的影响。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测肾移植受者CYP3A5基因型,并以直接测序法进行验证。比较不同基因型患者之间的FK506C/D值,AR、不良反应的发生率。结果肾移植术后3个月内,*3/*3基因型患者FK506的C/D值为149±59,明显高于*1/*1基因型和*1/*3基因型患者的78±24和90±42(均为P<0.05);移植术后3个月内*1/*1基因型患者的AR发生率与*1/*3基因型和*3/*3基因型患者的AR发生率比较差异无统计学意义。与*1/*1基因型和*1/*3基因型患者比较,*3/*3基因型患者术后肝功能异常、药物肾毒性不良反应的发生率较高(均为P<0.05)。结论 CYP3A5基因多态性对服用FK506肾移植患者的C/D值、肝功能异常、药物肾毒性有一定影响。CYP3A5*3/*3基因型患者的FK506的C/D值、肝功能异常和药物肾毒性不良反应的发生率较高。 张海燕 张小明 吴小丽 陈钰 王捷关键词:肾移植 他克莫司 细胞色素P450 基因多态性 血药浓度 一种尿道逆行造影检查器 本发明公开了一种尿道逆行造影检查器,包括注射器及与注射器端头相连的注液软管,注液软管上固定有一伞状接头罩,伞状接头罩的开口向外侧。此尿道逆行造影检查器可由患者自行使用,通过将注液软管经过外尿道口插入后,将伞状接头罩扣在外... 张小明 胡卫列 何恢绪 应敏 张海燕文献传递