- 温度对体外大鼠睾丸支持细胞增殖及occludin蛋白表达的影响被引量:5
- 2012年
- 目的:通过观察不同温度对原代大鼠睾丸支持细胞增殖作用与紧密连接蛋白occludin(OCLN)表达的影响,探讨温度因素在男性生殖功能降低或男性不育中的作用机制。方法:体外分离培养雄性Wistar大鼠睾丸支持细胞(Sertoli cell,SC),油红O染色及免疫组化FasL鉴定。实验分为对照组(34℃)和实验组(35℃、36℃、37℃、38℃、39℃)。在相应的温度下培养4 d后,CCK-8法检测SC增殖作用,HE染色观察细胞形态及结构,Western印迹法和免疫荧光法检测OCLN表达水平。结果:体外培养SC的纯度为(96.20±1.95)%,CCK-8结果显示,细胞增殖活性在34~36℃时逐渐增强,36~39℃时逐渐降低,并在镜下观察发现细胞核固缩、裂解明显;免疫荧光及Western印迹显示,36℃时OCLN表达量最高;高于36℃时,OCLN表达量随着温度的增加而降低(P<0.01)。结论:温度升高(>36℃)抑制SC的增殖活性,并降低SC紧密连接蛋白的表达量。因此,高温对SC活性和紧密连接完整性的影响,可能是导致男性生育能力下降或不育的机制之一。
- 胡建听邵翠华王沛涛刘勇郝伟玉冯友亮刘世海王新生
- 关键词:温度支持细胞紧密连接蛋白精子发生
- 移植用组织库建立及管理被引量:3
- 2009年
- 移植用组织库(以下简称“组织库”)一般是建立在低温保存技术基础之上。近几十年来,组织器官移植学和生物保存技术,特别是低温保存技术的发展对组织库技术产生了巨大影响。同时由于人类疾病和健康需求的变化,组织库标准和指导原则协同化也日益突出。按照国家和(或)国际对组织库的一般要求,涉及的标准和方法主要包括供体的选择、处理、保存、消毒、贮存和分配等多个环节及操作过程,以及与组织库相关的法律法规或条例、社会伦理等方面。因此,完善的组织库的建立与应用管理具有其特殊的技术规范和管理要求。本文就从移植用组织库的政策法规、技术支持和质量管理等多个方面进行论述。
- 王沛涛李强邵翠华
- 关键词:器官移植学质量管理组织库法律法规人类疾病
- 卵母细胞深低温保存的策略分析被引量:1
- 2015年
- 背景:卵母细胞具有特殊而复杂的低温生物学性质,致使卵母细胞在深低温保存中易受到多因素的损伤而影响复温后的存活率、受精率和受精后发育潜能。目的:综述卵母细胞深低温保存技术的研究进展,阐明存在的技术缺陷以及解决问题的思路与研究路线。方法:以"卵母细胞,深低温保存/慢速冷冻,玻璃化"为中文捡索词,以"oocyte,cryopreservation/slow freezing,vitrification"为英文检索词,在中国知网(CNKI)期刊全文数据库和Pub Med数据库检索2004年1月至2014年10月有关卵母细胞深低温保存文献,排除陈旧性、重复性研究,最终纳入41篇文献进行综述。结果与结论:慢速冷冻、玻璃化方法深低温保存卵母细胞得到较好的临床应用,但复温存活率、受精能力、发育能力损伤等仍困扰医生们。卵母细胞深低温保存技术的进一步完善或突破在于对深低温保存技术环节的细化、卵母细胞低温生物学特性的研究以及相关技术的创新,如深低温保护剂选择、冷冻载体的改进、卵母细胞时相选择、卵母细胞体外成熟技术、卵巢组织保存与移植等。
- 王沛涛邵翠华刘海宁
- 关键词:卵子卵母细胞干细胞深低温保存玻璃化生物学特性
- 低氧对原代支持细胞增殖能力和occludin蛋白表达的影响被引量:5
- 2013年
- 目的:观察低氧对原代大鼠睾丸支持细胞生长活性、occludin蛋白表达的影响。方法:18~22日龄Wistar大鼠,通过两步酶消化法,建立原代支持细胞培养体系,经油红O、免疫荧光法鉴定。传代后随机分为以下氧浓度组进行培养:20%、15%、10%、5%和1%。分别培养至6、12、24、48、72 h,CCK-8测定细胞增殖活性,West-ern印迹测定occludin蛋白表达量,并进行差异性分析。结果:油红O染色见胞质内脂滴染成红色,免疫荧光见FasL蛋白表达阳性,细胞纯度>95%。与20%氧浓度相比,细胞在15%和10%氧浓度下增殖率逐渐降低,5%和1%氧浓度下,细胞增殖率明显下降(P<0.01);从12 h开始,随着氧浓度降低和时间延长,occludin表达量明显下降(P<0.01)。结论:低氧会抑制支持细胞生长,并减少occludin蛋白表达。推测低氧环境损伤支持细胞参与的血睾屏障完整性,影响睾丸的生精过程。
- 郝伟玉邵翠华冯友亮胡建听李强王洪强王沛涛
- 关键词:低氧支持细胞细胞增殖OCCLUDIN
- 移植用同种异体组织库流程及质量管理被引量:1
- 2011年
- 背景:随着组织移植学和保存技术的发展,移植用组织库更广泛的发展,技术水平不断提高。同时,组织库标准和指导原则协同化日益突出,质量管理问题越来越受到重视。目的:结合20多年同种异体组织库的科研、医学临床和管理实践,对组织库的建立及应用进行阐述。方法:由第二、三作者检索美国医学索引Medline1966/2010、荷兰生物医学文摘1974/2010,中国科技文献数据库1999/1999和中国生物医学文献数据库1978/2009等移植用组织库建立与管理、质量标准与控制等方面文献。结果与结论:移植用同种异体组织库在临床治疗中的发挥重要作用,为临床医生提供了一种有效、方便的治疗选择。组织库的建立与应用管理是一个综合性的,并且具有一定特殊性的医学领域,具有它自己独特的管理模式和质量控制体系。一个完整的组织库应具备的流程管理主要包括设置及管理模式、技术操作流程、质量控制体系等。应对组织库的所有操作环节进行规范,并把其纳入到医疗机构科学化管理范畴中来,使同种异体组织库更好地服务于中国医学事业。
- 王沛涛邵翠华李强
- 关键词:组织库同种异体