王玲霞
- 作品数：19 被引量：40H指数：4
- 供职机构：宁夏大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学文化科学更多>>
- 发菜固氮基因nifD和nifK克隆及其失水条件下的差异表达
- 2019年
- nifD和nifK编码钼铁固氮酶中的钼铁蛋白。为了解发菜nifD和nifK分子信息及对水分胁迫的响应机制,该研究设计了简并性引物克隆发菜nifD和nifK全长,进行原核表达和生物信息学分析,并对不同失水状态下发菜nifD和nifK在转录水平的差异表达和固氮酶活性的变化进行分析。结果表明,发菜nifD和nifK全长分别为1 443 bp和1 536 bp (登陆号为分别为KU886164和KU886165);将nifD和nifK在大肠杆菌中表达,分别获得一个约57 kD和58 kD的外源蛋白;生物信息学分析表明,nifD和nifK核苷酸序列和推译的氨基酸序列均与点形念珠藻(Nostoc punctiforme PCC 73102)高度一致性;nifD和nifK的二级结构主要有α-螺旋、β-折叠、β-转角和随机卷曲。此外,随着藻体含水量的逐渐降低,发菜nifD和nifK在转录水平上的表达量逐渐增加,但固氮酶活性呈现先增加后下降的趋势。研究结果为深入全面研究发菜固氮酶基因结构及其响应水分胁迫的固氮机理及氮代谢途径提供了基础。
- 吴诗杰严奉坤丁苗苗李晓旭刘阳王玲霞梁文裕
- 关键词：发菜
- 盐胁迫下宁夏枸杞苯丙烷代谢相关基因差异表达分析
- 2023年
- 为探究盐胁迫条件下宁夏枸杞苯丙烷代谢相关基因差异表达规律,以不同浓度NaCl(0,100,200,300 mmol/L)处理的水培宁夏枸杞幼苗为研究材料,利用高通量测序技术和qRT-PCR对盐胁迫下宁夏枸杞苯丙烷代谢相关基因差异表达进行分析,同时对该途径中关键酶活性及产物含量进行测定。结果表明,(1)宁夏枸杞在不同浓度NaCl处理下共有58个苯丙烷代谢相关基因差异表达,且随着盐胁迫程度的增加大部分基因表达水平上调或不变;(2)随着NaCl浓度的增加,宁夏枸杞叶片抗氧化酶SOD、POD、CAT的活性均下降,而酚类物质、类黄酮和木质素的含量在100 mmol/L NaCl处理下均显著积累。研究发现,宁夏枸杞可能通过调控苯丙烷代谢相关基因上调表达,增加酚类物质、类黄酮和木质素的合成,来清除过多活性氧和提升细胞壁强度以适应盐胁迫;宁夏枸杞可耐受的NaCl浓度在100~200 mmol/L之间。
- 宋繁胡进红梁旺利梁文裕王玲霞
- 关键词：宁夏枸杞盐胁迫
- 发菜固氮酶nifH基因克隆及其干旱胁迫下的差异表达被引量：4
- 2017年
- 通过对发菜固氮酶H亚基基因(nifH)全长进行克隆、原核表达和生物信息学分析,采用qRT-PCR技术,分析不同干旱胁迫下发菜固氮酶基因nifH在转录水平的表达变化。结果表明,根据特异性引物克隆获得长度为894bp的nifH,GenBank登陆号为BankIt1901364(KU886163)。将nifH在大肠杆菌中表达,获得约36ku的外源蛋白。生物信息学分析表明,发菜nifH与已报道的多种蓝藻的nifH及推导的氨基酸序列具有较高的相似性,nifH二级结构和三级结构主要由α螺旋、β-折叠、随机卷曲和β-转角构成。随藻体含水量的逐渐降低,发菜nifH在转录水平上的表达量逐渐增加,固氮酶活性呈现先增加后下降的趋势。研究结果为进一步研究发菜固氮酶基因的分子结构和发菜响应干旱胁迫的固氮机制及氮代谢过程奠定基础。
- 吴诗杰王玲霞刘阳严奉坤丁苗苗李晓旭梁文裕
- 关键词：发菜固氮酶基因克隆生物信息学
- NaCl胁迫对宁夏枸杞叶和幼根显微及超微结构的影响被引量：5
- 2021年
- 以宁夏枸杞为材料,采用超薄切片技术制备样品,应用光学显微镜和透射电镜分析了不同浓度NaCl胁迫条件下宁夏枸杞叶和幼根显微及超微结构的变化。结果表明:随着NaCl胁迫的加重,(1)叶片上表皮细胞增厚,栅栏组织细胞出现缩短现象,排列疏松且紊乱;幼根的初生结构无明显变化。(2)叶片栅栏组织中叶绿体不再紧靠在细胞膜上,叶绿体双层膜破坏,基粒片层松散排列,杂乱无章,出现膨胀和空泡现象,淀粉粒和嗜锇颗粒增多,叶肉细胞中线粒体发生轻微变化;幼根中皮层薄壁细胞线粒体形状发生改变,结构破坏,内膜和外膜模糊甚至破裂,大多数嵴模糊,出现空泡现象;细胞核解体,基质外溢。研究表明,不同浓度的NaCl胁迫对宁夏枸杞叶片和幼根细胞的显微及超微结构影响不同,NaCl浓度大于200 mmol/L时,宁夏枸杞叶片和幼根细胞的显微及超微结构发生了明显变化,且叶肉细胞中线粒体的变化没有叶绿体的变化显著,推测叶肉细胞中线粒体的耐盐性比叶绿体强。
- 马晓蓉杨淑娟姚宁王玲霞马强梁文裕
- 关键词：宁夏枸杞NACL胁迫显微结构超微结构
- 发菜GPR基因(proA)克隆及其干旱胁迫下的差异表达被引量：1
- 2019年
- proA编码的γ-谷氨酰磷酸还原酶(GPR)是脯氨酸合成途径的关键酶。该研究通过设计特异性引物克隆获得全长1 308 bp的发菜proA基因(GenBank登录号为KX553954)。与点形念珠藻的proA基因及其推译的氨基酸序列相似性分别为91%和93%;氨基酸序列中第123位的Leu疏水性最强,第80位的Lys亲水性最强;Thr、Ser和Tyr分别有19、12、4个磷酸化位点;proA编码的蛋白为膜外蛋白,其二级结构由α螺旋、β折叠、无规卷曲和β转角构成。将proA基因在大肠杆菌表达,获得一个47.22 kD的外源蛋白,MALDI-TOF-TOF/MS分析证明该外源蛋白为γ-谷氨酰磷酸还原酶。随着干旱胁迫程度的增加,发菜proA在转录水平的差异表达及脯氨酸含量均呈现增加的趋势。研究结果对深入研究发菜proA的分子功能及阐明其在干旱胁迫下的调控机制具有重要意义。
- 丁苗苗刘阳李晓旭王猛田姣王玲霞徐婷婷纳小凡梁文裕
- 关键词：干旱胁迫发菜
- 植入“人文元素”,让植物生理学教学具有“文艺范”被引量：2
- 2017年
- 针对高校植物生理学教学传统模式存在课堂互动不足、学生学习兴趣不高的问题，作者尝试在教学过程中植入“人文元素”，让植物生理学教学具有“文艺范”。以文促理，激发学生学习该课程及开展相关研究的兴趣，引领学生在掌握本植物生理学课程丰富的专业知识外，领悟该门课程所蕴含的人文素养的内涵和精髓，提高自身人文素质，从而为学生的终身发展奠定良好基础。
- 梁新华梁文裕王玲霞张建英
- 关键词：植物生理学人文素质
- 干旱胁迫条件下发菜cphB差异表达与基因克隆被引量：3
- 2017年
- 发菜是一种分布在干早、半干旱荒漠草原地区的陆生固氮蓝藻,对干旱具有极强的适应性。采用qRT-PCR技术,对干旱胁迫条件下发菜cphB的差异表达进行了分析,发现干旱胁迫条件下发菜cphB在转录水平上呈逐渐增加的趋势。根据发菜同源物种设计简并性引物克隆cphB基因,获得长度为864bp的DNA(GenBank登陆号为KX092456)。同源性比较发现发菜cphB基因具有较高的保守性,二级结构预测表明发菜CphB由α螺旋,β折叠和随机卷曲构成。三级结构预测表明CphB具有一个由α螺旋和β折叠组成的5股的结构域和由7个β折叠连成三明治结构的7股的结构域。将cphB基因在大肠杆菌中表达,获得符合预期的外源重组蛋白,CphB亚细胞定位于细胞质中。研究成果为进一步研究干旱胁迫条件下发菜cphB表达调控、藻蓝素的代谢机制及能量代谢机制方面奠定了基础。
- 王淑萍刘阳严奉坤吴诗杰王玲霞徐婷婷梁文裕
- 关键词：发菜基因克隆原核表达
- 发菜组氨酸激酶基因NfHK2的克隆及其在干旱胁迫下的差异表达
- 2021年
- 由HK基因编码的组氨酸激酶是双组分信号系统的重要组成部分。为了研究发菜NfHK2基因的分子信息及其对干旱胁迫的响应,对NfHK2基因进行了克隆、序列分析以及原核表达,并分析了该基因在干旱胁迫下的差异表达。结果表明,NfHK2基因全长1467 bp,NfHK2氨基酸序列中疏水性最强的是位于139的Leu,亲水性最强的是229位的Lys,共有49个磷酸化位点,由α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲构成不对称的三维结构。发菜NfHK2蛋白定位于细胞质中,与筒孢藻(Cylindrospermum sp.NIES-4074)(BAZ29775.1)HK亲缘关系较近。NfHK2包含一个保守功能域His KA。将NfHK2基因转入大肠杆菌中,获得了54.2 kD的外源组氨酸激酶。随着发菜干旱胁迫程度加重,NfHK2基因的表达量逐渐升高。结果为深入挖掘发菜NfHK2的功能以及其对于干旱胁迫的调控机理提供了参考。
- 张筝任随缘王猛李晓旭王玲霞梁文裕
- 关键词：发菜组氨酸激酶克隆干旱胁迫
- 马蹄金(Dichondra repens Forst.)组织培养和快速繁殖被引量：3
- 2020年
- 为了探究马蹄金组织培养及快繁技术,本研究以马蹄金为材料,使用75%的酒精和10%NaClO对不同外植体(胚根,下胚轴,子叶)进行消毒处理,在不同激素浓度配比的MS培养基中进行丛生芽诱导、愈伤组织诱导及分化,成功建立了马蹄金的组培快繁体系。结果表明:利用马蹄金下胚轴为外植体直接诱导不定芽效果较好,其最适程序为:流水冲洗30 min+75%酒精30 s+10%NaClO 9 min,污染率为5%,成活率为75%;下胚轴不定芽诱导的最适培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,诱导率为93.55%,出芽指数为8.86;胚根愈伤组织诱导的最适培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,诱导率为100%,下胚轴愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+1 mg/L NAA,诱导率为95.24%,子叶愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,诱导率为100%;愈伤组织不定芽分化的最适培养基为1/2MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,芽诱导率为20%,平均芽数为12.83;组培苗诱导生根的最适培养基为不加激素的1/2MS培养基;生根苗以瓶盖全开的炼苗方式移栽到以河沙为基质的育苗盒中成活率为100%,且添加蒸馏水与自来水对植株生长并无明显影响。本研究成功建立了马蹄金组织培养与快繁体系,为马蹄金种质资源改良及优质种苗生产提供了技术参考。
- 王猛李晓旭张筝王玲霞杨涓梁文裕
- 关键词：快繁技术
