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李晓旭

作品数：11 被引量：24H指数：3
供职机构：宁夏大学生命科学学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
相关领域：生物学农业科学更多>>

合作作者

文献类型

  • 11篇中文期刊文章

领域

  • 7篇生物学
  • 4篇农业科学

主题

  • 9篇发菜
  • 8篇克隆
  • 6篇胁迫
  • 6篇基因
  • 6篇旱胁迫
  • 6篇干旱
  • 6篇干旱胁迫
  • 4篇基因克隆
  • 2篇植物
  • 2篇固氮
  • 1篇调节剂
  • 1篇亚细胞
  • 1篇亚细胞定位
  • 1篇蔗糖
  • 1篇蔗糖合成
  • 1篇蔗糖合成酶
  • 1篇植物生长
  • 1篇植物生长调节
  • 1篇植物生长调节...
  • 1篇植株

机构

  • 11篇宁夏大学
  • 2篇教育部
  • 1篇中国海洋大学

作者

  • 11篇梁文裕
  • 11篇王玲霞
  • 11篇李晓旭
  • 8篇丁苗苗
  • 6篇严奉坤
  • 5篇刘阳
  • 3篇徐婷婷
  • 2篇杨涓
  • 2篇王俊
  • 1篇石晶
  • 1篇岳思君
  • 1篇华剑锋
  • 1篇纳小凡

传媒

  • 6篇分子植物育种
  • 2篇基因组学与应...
  • 1篇西北农业学报
  • 1篇西北植物学报
  • 1篇植物遗传资源...

年份

  • 2篇2021
  • 2篇2020
  • 4篇2019
  • 1篇2018
  • 2篇2017
共 11 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
干旱胁迫下发菜蔗糖合成酶基因Sus2克隆与差异表达被引量：7
2018年
蔗糖合成酶(Sus2)是调控蔗糖代谢的关键酶。为了解发菜Sus2分子信息及其对干旱胁迫的响应,设计特异性引物克隆发菜Sus2全长并进行序列分析和原核表达,分析干旱胁迫下发菜Sus2在转录水平上表达变化和蔗糖含量变化。结果表明,发菜Sus2基因全长312 bp (GeenBank登录号为MG598619),与点形念珠藻的Sus2基因及其推译氨基酸的序列相似性分别为94%和93%。推译氨基酸在第81位的Ile疏水性最强,在第27位的Gln亲水性最强。Thr有3个磷酸化位点,Ser有12个磷酸化位点,Tyr有3个磷酸化位点。Sus2蛋白二级结构及三级结构由α螺旋、β折叠、随机卷曲和β转角共同构成。将Sus2基因进行原核表达,得到一个12.29 kD的外源蛋白,LC-MS/MS分析证明该外源蛋白为蔗糖合成酶。干旱胁迫下发菜Sus2在转录水平的表达量和蔗糖含量均逐渐增加。研究结果为进一步认识发菜Sus2的分子信息以及干旱胁迫下发菜蔗糖代谢的分子机理提供了科学依据。
李晓旭丁苗苗刘阳王猛严奉坤梁文裕徐婷婷王俊王玲霞
关键词：发菜蔗糖合成酶克隆干旱胁迫
发菜固氮酶nifH基因克隆及其干旱胁迫下的差异表达被引量：4
2017年
通过对发菜固氮酶H亚基基因(nifH)全长进行克隆、原核表达和生物信息学分析,采用qRT-PCR技术,分析不同干旱胁迫下发菜固氮酶基因nifH在转录水平的表达变化。结果表明,根据特异性引物克隆获得长度为894bp的nifH,GenBank登陆号为BankIt1901364(KU886163)。将nifH在大肠杆菌中表达,获得约36ku的外源蛋白。生物信息学分析表明,发菜nifH与已报道的多种蓝藻的nifH及推导的氨基酸序列具有较高的相似性,nifH二级结构和三级结构主要由α螺旋、β-折叠、随机卷曲和β-转角构成。随藻体含水量的逐渐降低,发菜nifH在转录水平上的表达量逐渐增加,固氮酶活性呈现先增加后下降的趋势。研究结果为进一步研究发菜固氮酶基因的分子结构和发菜响应干旱胁迫的固氮机制及氮代谢过程奠定基础。
吴诗杰王玲霞刘阳严奉坤丁苗苗李晓旭梁文裕
关键词：发菜固氮酶基因克隆生物信息学
发菜GPR基因(proA)克隆及其干旱胁迫下的差异表达被引量：1
2019年
proA编码的γ-谷氨酰磷酸还原酶(GPR)是脯氨酸合成途径的关键酶。该研究通过设计特异性引物克隆获得全长1 308 bp的发菜proA基因(GenBank登录号为KX553954)。与点形念珠藻的proA基因及其推译的氨基酸序列相似性分别为91%和93%;氨基酸序列中第123位的Leu疏水性最强,第80位的Lys亲水性最强;Thr、Ser和Tyr分别有19、12、4个磷酸化位点;proA编码的蛋白为膜外蛋白,其二级结构由α螺旋、β折叠、无规卷曲和β转角构成。将proA基因在大肠杆菌表达,获得一个47.22 kD的外源蛋白,MALDI-TOF-TOF/MS分析证明该外源蛋白为γ-谷氨酰磷酸还原酶。随着干旱胁迫程度的增加,发菜proA在转录水平的差异表达及脯氨酸含量均呈现增加的趋势。研究结果对深入研究发菜proA的分子功能及阐明其在干旱胁迫下的调控机制具有重要意义。
丁苗苗刘阳李晓旭王猛田姣王玲霞徐婷婷纳小凡梁文裕
关键词：干旱胁迫发菜
发菜组氨酸激酶基因NfHK2的克隆及其在干旱胁迫下的差异表达
2021年
由HK基因编码的组氨酸激酶是双组分信号系统的重要组成部分。为了研究发菜NfHK2基因的分子信息及其对干旱胁迫的响应,对NfHK2基因进行了克隆、序列分析以及原核表达,并分析了该基因在干旱胁迫下的差异表达。结果表明,NfHK2基因全长1467 bp,NfHK2氨基酸序列中疏水性最强的是位于139的Leu,亲水性最强的是229位的Lys,共有49个磷酸化位点,由α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲构成不对称的三维结构。发菜NfHK2蛋白定位于细胞质中,与筒孢藻(Cylindrospermum sp.NIES-4074)(BAZ29775.1)HK亲缘关系较近。NfHK2包含一个保守功能域His KA。将NfHK2基因转入大肠杆菌中,获得了54.2 kD的外源组氨酸激酶。随着发菜干旱胁迫程度加重,NfHK2基因的表达量逐渐升高。结果为深入挖掘发菜NfHK2的功能以及其对于干旱胁迫的调控机理提供了参考。
张筝任随缘王猛李晓旭王玲霞梁文裕
关键词：发菜组氨酸激酶克隆干旱胁迫
马蹄金(Dichondra repens Forst.)组织培养和快速繁殖被引量：3
2020年
为了探究马蹄金组织培养及快繁技术,本研究以马蹄金为材料,使用75%的酒精和10%NaClO对不同外植体(胚根,下胚轴,子叶)进行消毒处理,在不同激素浓度配比的MS培养基中进行丛生芽诱导、愈伤组织诱导及分化,成功建立了马蹄金的组培快繁体系。结果表明:利用马蹄金下胚轴为外植体直接诱导不定芽效果较好,其最适程序为:流水冲洗30 min+75%酒精30 s+10%NaClO 9 min,污染率为5%,成活率为75%;下胚轴不定芽诱导的最适培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,诱导率为93.55%,出芽指数为8.86;胚根愈伤组织诱导的最适培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,诱导率为100%,下胚轴愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+1 mg/L NAA,诱导率为95.24%,子叶愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,诱导率为100%;愈伤组织不定芽分化的最适培养基为1/2MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,芽诱导率为20%,平均芽数为12.83;组培苗诱导生根的最适培养基为不加激素的1/2MS培养基;生根苗以瓶盖全开的炼苗方式移栽到以河沙为基质的育苗盒中成活率为100%,且添加蒸馏水与自来水对植株生长并无明显影响。本研究成功建立了马蹄金组织培养与快繁体系,为马蹄金种质资源改良及优质种苗生产提供了技术参考。
王猛李晓旭张筝王玲霞杨涓梁文裕
关键词：快繁技术
发菜磷酸葡糖胺变位酶(glmM)对干旱胁迫的响应及其基因克隆
2020年
glmM编码的磷酸葡糖胺变位酶是肽聚糖合成前体的关键酶。为探究发菜glmM响应干旱胁迫的表达调控机制及明确其分子信息,本研究对干旱胁迫条件下发菜glmM在转录水平的差异表达进行了分析,并对glmM的表达水平、磷酸化修饰、乙酰化修饰和琥珀酰化修饰水平进行了检测,克隆了发菜glmM,进行了序列分析和原核表达。结果表明,干旱胁迫条件下,发菜glmM在转录水平上的表达量先增加后减少,glmM上调表达,glmM的磷酸化修饰水平逐渐增加,乙酰化修饰水平相对稳定,琥珀酰化修饰水平有明显变化。设计特异性引物克隆glmM基因,获得全长1416 bp发菜glmM基因,与肺衣(5183)glmM的核苷酸序列同源性为95%,氨基酸同源性为97%。将glmM在大肠杆菌中表达,获得一个51.45 kD的外源蛋白,MALDI-TOF-TOF/MS分析证明该蛋白为磷酸葡糖胺变位酶。研究结果为深入研究发菜glmM的分子信息、生物学功能及其响应干旱胁迫的分子机制提供帮助。
王猛严奉坤李晓旭丁苗苗张筝石晶王玲霞梁文裕
关键词：发菜干旱胁迫基因克隆
发菜固氮基因nifD和nifK克隆及其失水条件下的差异表达
2019年
nifD和nifK编码钼铁固氮酶中的钼铁蛋白。为了解发菜nifD和nifK分子信息及对水分胁迫的响应机制,该研究设计了简并性引物克隆发菜nifD和nifK全长,进行原核表达和生物信息学分析,并对不同失水状态下发菜nifD和nifK在转录水平的差异表达和固氮酶活性的变化进行分析。结果表明,发菜nifD和nifK全长分别为1 443 bp和1 536 bp (登陆号为分别为KU886164和KU886165);将nifD和nifK在大肠杆菌中表达,分别获得一个约57 kD和58 kD的外源蛋白;生物信息学分析表明,nifD和nifK核苷酸序列和推译的氨基酸序列均与点形念珠藻(Nostoc punctiforme PCC 73102)高度一致性;nifD和nifK的二级结构主要有α-螺旋、β-折叠、β-转角和随机卷曲。此外,随着藻体含水量的逐渐降低,发菜nifD和nifK在转录水平上的表达量逐渐增加,但固氮酶活性呈现先增加后下降的趋势。研究结果为深入全面研究发菜固氮酶基因结构及其响应水分胁迫的固氮机理及氮代谢途径提供了基础。
吴诗杰严奉坤丁苗苗李晓旭刘阳王玲霞梁文裕
关键词：发菜
发菜G6PDH基因(GND)克隆及其干旱胁迫下的差异表达分析被引量：7
2017年
由GND编码的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)是戊糖磷酸途径的关键酶。为了解发菜GND分子信息以及对干旱胁迫的响应机制,该研究设计了特异性引物克隆发菜GND全长,进行序列分析、原核表达和MALDITOF-TOF/MS鉴定,并对干旱胁迫下发菜GND的差异表达水平和G6PDH活性进行分析。结果表明:(1)发菜GND全长1 431bp(GenBank登录号为KX553955),与点形念珠藻(73102)的GND核苷酸序列相似性为96%,G6PDH氨基酸相似性为98%;氨基酸序列中第26和27位的Ile疏水性最强,在第302位的Arg亲水性最强,Thr有19个磷酸化位点,Ser有18个磷酸化位点,Tys有5个磷酸化位点,二级结构和三级结构主要由α螺旋、β折叠、β转角和随机卷曲构成。(2)将GND基因进行原核表达,获得47.23kD的外源表达蛋白G6PDH。(3)随干旱胁迫程度加剧,GND在转录水平的表达量和G6PDH活性均逐渐增加。研究结果为进一步探讨干旱胁迫条件下发菜GND表达调控奠定了基础。
刘阳严奉坤丁苗苗李晓旭王玲霞岳思君梁文裕
关键词：发菜葡萄糖-6-磷酸脱氢酶克隆
荇菜组织培养及植株再生体系的建立被引量：1
2019年
荇菜(Nymphoides peltatum)是一种具有观赏、药用及水质净化作用的水生植物。为建立荇菜组织培养和离体再生体系,以野生荇菜为材料,研究了不同外植体(根,茎和叶)和不同植物生长调节剂配比对其愈伤组织、不定芽和再生根诱导分化的影响。结果表明,培养基为MS+NAA(0.3 mg/L)+6-BA(1.0 mg/L)时,叶的愈伤组织诱导率为73.3%;MS+NAA(0.2 mg/L)+6-BA(1.5 mg/L)培养基中丛生芽的诱导率达到76.7%,形成的丛生芽长势较好;培养基为MS+NAA(0.3 mg/L)+6-BA(1.0 mg/L)时,带节茎段不定芽诱导率达66.7%;采用MS+NAA(0.3 mg/L)培养基诱导不定根,生根率为100%。再生苗移栽后存活率可达90%。研究结果为快速恢复和保护荇菜资源,并利用遗传转化实现新种质培育提供了实验依据。
杨涓王猛华剑锋常皓然李晓旭丁苗苗王玲霞梁文裕
关键词：植株再生植物生长调节剂
发菜PspA基因克隆及其转基因植物的抗旱性分析被引量：2
2021年
为探讨发菜噬菌体休克蛋白A(PspA)的分子信息和基因功能,本研究通过设计特异引物克隆发菜PspA基因,采用qRT-PCR技术,分析发菜PspA基因在干旱胁迫下的表达模式;构建PspA真核表达载体pCAM35s-GFP-PspA,对PspA进行亚细胞定位和PspA基因拟南芥遗传转化,并对阳性转化拟南芥分别进行Southern和Western杂交验证;对转基因植株进行抗旱实验,结果表明,PspA基因全长为777 bp,干旱胁迫下发菜PspA基因表达量显著增加;PspA定位于细胞膜上,通过花絮浸染法获得稳定遗传的转PspA基因拟南芥。Southern杂交表明,PspA基因已成功导入拟南芥基因组中并以低拷贝形式存在,Western blot进一步证实PspA蛋白在转基因拟南芥中成功表达。在干旱胁迫下,转PspA基因拟南芥生长状态明显好于野生型植株。研究结果为深入探讨发菜PspA基因功能及其在响应干旱胁迫过程中的应答机制奠定了基础。
王猛李晓旭张筝马彩霞马晓蓉王玲霞梁文裕
关键词：发菜亚细胞定位
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