汪丽娜
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 供职机构：沈阳药科大学生命科学与生物制药学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 一种利用DSA-FACE分析寡糖链的方法被引量：3
- 2008年
- 目的:优化糖链结构分析方法,满足高通量、高灵敏度和快速分析糖基结构的要求。方法:基于DNA测序仪的荧光糖电泳(DSA-FACE),将糖蛋白经过糖苷酶酶切获得糖链,并与荧光标记物8-氨基芘基-1,3,6-三磺酸(APTS)进行衍生化反应,标记样品经过Sephadex-G10、HPLC纯化后,用DNA3100测序仪电泳分离,用Genescan3.7软件进行数据分析。结果:利用DSA-FACE技术分析了标准品Man5GlcNAc2和Gal2GlcNAc2Man3GlcNac2,并得到糖蛋白牛核糖核酸酶B的5种N-糖基结构(Man5～9GlcNAc2)。结论:DSA-FACE是分析糖基结构的有效技术手段,能够实现对糖基结构的高通量、高灵敏度和快速分析。
- 刘波宋淼巩新唱韶红王凌雪杨依丽汪丽娜马清钧吴军
- 关键词：糖蛋白
- 抗HER2人源化单克隆抗体在乳酸克鲁维酵母中的高效表达及其产物分析被引量：3
- 2009年
- 目的:在乳酸克鲁维酵母中实现抗HER2人源化单克隆抗体的表达。方法:应用PCR扩增抗HER2人源化单克隆抗体的轻、重链基因,将扩增产物分别克隆入酵母表达载体pYES2/ochI和pPICZαA/ura3,经限制性内切酶以及DNA序列测定分析插入片段正确后,将重组质粒转化乳酸克鲁维酵母(Δura3)。转化子用半乳糖诱导,经间接ELISA和Western blot鉴定所表达产物的产量以及和抗原结合的活性。结果:构建了抗HER2人源化单克隆抗体轻、重链表达载体pYES2/ochI+αL和pPICZαA/ura3+αH,摇瓶培养表达产量可达(120±20)mg/L;经还原和非还原SDS-PAGE分析,抗体的轻、重链能够通过分子间二硫键正确装配;所表达抗体可与HER2胞外域特异性结合。结论:实现抗HER2人源化单克隆抗体在乳酸克鲁维酵母中的表达,具有与其抗原特异性结合的能力。
- 汪丽娜刘波巩新唱韶红王凌雪宋淼徐威吴军
- 关键词：乳酸克鲁维酵母高效分泌表达
- 抗HER2人源化单克隆抗体在乳酸克鲁维酵母中的表达及其产物分析
- HER2/neu基因是一种原癌基因，位于人染色体17q21，其编码产物p185erbB2蛋白具有酪氨酸激酶活性，为表皮生长因子受体家族成员之一。当HER2/neu基因过度表达时，存在于多种肿瘤组织，包括乳腺癌、卵巢癌、结...
- 汪丽娜
- 关键词：乳酸克鲁维酵母
- 文献传递
