阮海华
- 作品数：46 被引量：104H指数：6
- 供职机构：天津商业大学生物技术与食品科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金天津市普通高等学校本科教学质量与教学改革研究计划重点项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生文化科学农业科学更多>>
- 生物化学课程思政映射点的规划与整合研究被引量：20
- 2020年
- 生物化学是生命科学、农学、林学、医学、药学以及食品等相关专业的基础理论课程,其重要性不言而喻。为了扎实推进高等教育"立德树人"根本任务,实现"课程育人"目标,本文以生物化学课程为例,将课程思政映射点进行梳理、凝练、分类、规划与整合,并归纳了运用合理教学方法将专业课堂教学与思想政治教育巧妙融合的一系列举措,旨在实现培养学生专业技能的同时进行价值引领的双重教学目标。
- 赵培陶永清武妮娜阮海华
- 关键词：生物化学
- 适于工程教育的生物化学PBL教学案例设计被引量：3
- 2022年
- 工程教育是我国高等教育的重要组成部分,随着新工科人才培养内涵的不断深化,全方位开展课程改革,提高工科人才培养质量正当其时。为了突出新工科人才培养的特色,专业课和实习实践类课程正在成为课程教学改革的重点。但是,在专业基础课中如何突出工科特色人才培养的实践亟待探索。本文以生物化学课程为例,采用问题引导式教学方法,选择合适的教学案例,从科学与技术问题出发探索教学设计,引导学生凝练问题、分析问题并解决问题。实现引导学生从“被动式”到“主动式”学习的转变,提升学生思辨能力的同时,突出科学与技术的工程化应用,并为持续甚至终生学习奠定基础,为新工科背景下应用型人才培养提供参考和借鉴。
- 赵培王素英张宏宇阮海华
- 关键词：工程教育PBL生物化学生物工程食品科学与工程
- 沙门氏菌感染肠上皮细胞外泌体宿主蛋白质组学分析被引量：2
- 2022年
- 选用人肠上皮细胞Henle-407作为模型,经鼠伤寒沙门氏菌感染后提取其分泌的外泌体,利用Label free相对定量蛋白质组学方法探究外泌体内宿主细胞蛋白质组的变化。结果表明,在鼠伤寒沙门氏菌感染或未感染的宿主细胞外泌体中共鉴定到宿主蛋白质2490种,其中包括321种差异表达蛋白。在该321种蛋白中,共有蛋白有7种,包括3种表达上调蛋白和4种表达下调蛋白。相比于共有蛋白,314种蛋白属于非共有蛋白,即与未感染组外泌体相比,在感染组外泌体中特异性存在的宿主蛋白有9种,而缺失的宿主蛋白却多达305种。基因本体论分析表明差异蛋白主要分布于细胞器、细胞膜等细胞组分,参与代谢和生物调节等生物学过程,与结合、催化和转运等分子功能有关。京都基因与基因组百科全书分析表明差异蛋白主要富集在17种代谢通路中。通过比较鼠伤寒沙门氏菌感染与未感染组外泌体内宿主来源的蛋白质组学数据变化发现,鼠伤寒沙门氏菌感染除了改变少部分共有蛋白的表达以外,同时会导致大量宿主细胞来源的蛋白质在外泌体中急剧减少。外泌体作为一种粒径在30~150 nm的双层膜囊泡,在空间有限的情况下,推测沙门氏菌可能通过某种未知机制抑制了宿主细胞蛋白向外泌体中的转运,而沙门氏菌的特异性蛋白和脂多糖等成分进入外泌体内,通过改变邻近宿主细胞对沙门氏菌的易感性进而帮助沙门氏菌在宿主细胞中的感染和扩散。
- 张彪路娟娥韩文英刘素可武陶阮海华
- 关键词：鼠伤寒沙门氏菌外泌体蛋白质组学
- 一种蜡样芽孢杆菌及其应用
- 本发明公开了一种蜡样芽孢杆菌及其应用，而提供一种能够同时分泌两种分子量类型的胶原酶的蜡样芽孢杆菌及其制备方法和应用。本发明的蜡样芽孢杆菌为Bacillus cereus，保藏编号为CGMCC NO.8614，所产生的酶液...
- 阮海华张西轩王素英李晔
- 文献传递
- 沙门氏菌效应蛋白SopB的多克隆抗体的制备方法
- 本发明公开了一种沙门氏菌效应蛋白SopB的多克隆抗体的制备方法，旨在提供一种特异性好、灵敏度高、可与沙门氏菌感染宿主细胞的过程中分泌的内源性沙门氏菌效应蛋白SopB发生特异性结合的兔源多克隆抗体的制备方法。以沙门氏菌效应...
- 阮海华张振奇陶永清赵辉张坤生
- 血清白蛋白-紫杉醇纳米粒的研究进展
- 2023年
- 紫杉醇属于二萜类化合物,对卵巢癌、乳腺癌等多种恶性肿瘤具有良好的抗肿瘤活性。紫杉醇因难溶于水,直接用药后不良反应较大,应用受到限制。血清白蛋白纳米粒可弥补药物本身的缺陷,通过增强药物在体内的稳定性、提高生物利用度和靶向性来达到增效、减毒的目的,一定程度上可解决紫杉醇的问题。该文综述了血清白蛋白-紫杉醇纳米粒的制备工艺、修饰血清白蛋白在载紫杉醇纳米粒中的应用,以期为研发满足临床实际应用的血清白蛋白纳米载药系统提供理论指导。
- 黄梦玲阮海华宋芸
- 关键词：血清白蛋白紫杉醇纳米粒表面修饰
- 一种从大肠杆菌包涵体中分离纯化GST-TRAF6融合蛋白的方法被引量：2
- 2014年
- 利用8 mol/L尿素溶液对表达在大肠杆菌包涵体中的GST-TRAF6融合蛋白进行变性,通过逐级稀释复性的方法对尿素溶解后的GST-TRAF6融合蛋白进行复性,将复性后的GST-TRAF6融合蛋白进一步利用谷胱甘肽琼脂糖树脂亲和层析的方法进行分离纯化,将分离纯化后的蛋白通过Western blot方法进行验证,最后利用体外泛素化反应检测经包涵体变性、复性和纯化后的GST-TRAF6融合蛋白的生物学活性。经过包涵体变性、梯度稀释复性和谷胱甘肽琼脂糖树脂亲和层析3个步骤后纯化得到纯度达90%以上、浓度为396 ng/μL的蛋白质溶液。利用GST蛋白作为对照,经Western blot验证表明,纯化得到的蛋白确为GSTTRAF6融合蛋白。进一步利用体外泛素化反应分析其泛素连接酶活性发现,17 ng/μL浓度的GST-TRAF6融合蛋白能够以泛素分子作为底物在5 min内快速催化自由泛素链的生成。结果表明,表达在大肠杆菌包涵体中的GST-TRAF6融合蛋白经尿素变性溶解后能够成功复性并分离纯化,在溶解性改变的同时恢复了其泛素连接酶活性。为从大肠杆菌包涵体中大规模分离纯化蛋白质提供了一种新的复性方法。
- 张西轩李晔张振奇董世瑞赵培阮海华
- 关键词：TRAF6蛋白纯化包涵体复性重组蛋白
- 人源溶菌酶在大肠杆菌中的表达与复性研究被引量：2
- 2020年
- 人源溶菌酶(Human lysozyme,HLZ)是一种糖苷水解酶,具有抗菌消炎的作用,其作为抗生素的替代品,已经被广泛应用于食品业、畜牧业和医疗等领域。如何获得高产量、高活性、高纯度的人源溶菌酶一直是亟待解决的技术问题。优化人源溶菌酶编码基因密码子,提高其在大肠杆菌中的适应度和表达量;将优化的基因克隆至大肠杆菌表达质粒pET21a,并将其在大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中诱导表达;利用8 mol/L尿素溶液对包涵体进行溶解变性后,探究一步透析、梯度透析和梯度稀释3种复性方式以及复性液中谷胱甘肽氧化还原对(GSSG/GSH)、精氨酸、甘油等复性物的浓度对重组人源溶菌酶复性的效果,获得最佳的复性方案。研究结果表明:37℃诱导温度下,利用0.5 mmol/L IPTG成功诱导了分子量约为14.7 kD的重组人源溶菌酶的表达,包涵体表达量约为380 mg/L(湿重)。包涵体经一步透析、梯度透析和梯度稀释3种复性方式复性后,测得比活力值分别为147 U/mg、335 U/mg、176 U/mg,表明最佳复性方法为梯度透析复性法。进一步探索了复性液中GSSG/GSH比值、精氨酸浓度、甘油浓度对人源溶菌酶复性效果的影响,表明当复性液中同时添加浓度比为1∶2的GSSG/GSH、4 mmol/L精氨酸和6%甘油时,复性后人源溶菌酶的最佳比活力值为1170 U/mg,显著高于3种复性物均不加时溶菌酶335 U/mg的比活力值,但低于溶菌酶标准品1732 U/mg的比活力值。成功地将人源溶菌酶基因在大肠杆菌中表达,并通过包涵体复性体系成功获得高活性重组人源溶菌酶。
- 张春晨胡双艳阮海华
- 关键词：大肠杆菌表达系统包涵体
- 不同盐离子对单核细胞炎症反应的影响
- 2011年
- [目的]研究NH4+引起炎症反应的机制。[方法]利用倒置显微镜观察不同盐离子引起单核癌细胞THP-1形态的变化,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞培养上清中LDH,台盼蓝染色检测细胞形态和存活情况,Western blot检测炎症反应相关细胞因子的产生和分泌。[结果]通过体外研究发现NH4+能够激活caspase-1和下游的IL-1β,IL-1β是炎症反应的重要细胞因子;K+能够抑制NH4+引起的caspase-1和IL-1β的激活。[结论]Na+、SO24-、Cl-都不引起炎症反应,对THP-1细胞没有影响;NH4+能够引起单核细胞的炎症反应,并且可以被K+抑制,为氨基酸代谢紊乱引起的疾病的治疗提供了一定的依据。
- 赵红梅阮海华
- 关键词：炎症反应CASPASE-1IL-1Β
- 沙门氏菌效应蛋白SopB288～309肽段介导SopB依赖的HeLa细胞AKT的磷酸化研究
- 2014年
- [目的]研究沙门氏菌效应蛋白SopB中跨膜疏水结构域288-309肽段对受SopB诱导的HeLa细胞Akt磷酸化激活中的功能。[方法]通过重叠延伸PCR的方法构建SopB第288~309位肽段缺失突变基因,并将该基因在HeLa细胞中进行异位表达,与野生型SopB基因进行比较,确定缺失的第288~309位间肽段在受SopB诱导的Akt磷酸化激活中的作用。[结果]与空载体对照相比较,在HeLa细胞中表达野生型SopB重组质粒明显激活了pAkt473的磷酸化,而在HeLa细胞中表达SopB缺失突变体SopBΔ288-309时,则检测不到pAkt473的磷酸化激活。[结论]SopB表达激活HeLa细胞pAkt473的磷酸化与其第288~309位肽段的功能直接相关,该跨膜疏水结构域的缺失导致SopB蛋白不能亚细胞定位至细胞膜,从而导致SopBΔ288-309对pAkt473磷酸化激活功能的丧失。
- 李晔张西轩阮海华
- 关键词：沙门氏菌属
