黄龙全
- 作品数：57 被引量：197H指数：8
- 供职机构：安徽农业大学茶与食品科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 家蚕吡哆醛激酶cDNA的克隆、表达和基因结构分析被引量：2
- 2008年
- 吡哆醛激酶(pyridoxal kinase,PLK,EC2.7.1.35)是维生素B6关键代谢酶,其cDNA的克隆在昆虫类还未见报道。利用生物信息学原理和使用PCR方法,克隆出编码家蚕Bombyx mori吡哆醛激酶的cDNA(GenBank登录号DQ452397),体外原核表达成功,并对表达粗提产物进行了酶活检测。克隆到的cDNA含有一894bp的完整可读框,编码一条分子量为33.1kD,含298个氨基酸残基的蛋白质。序列比对显示此蛋白质与人类吡哆醛激酶具有52.84%的同一性,包含吡哆醛激酶家族共有的特征保守序列,但比哺乳动物和植物克隆到的吡哆醛激酶均少10多个氨基酸残基,几个有关键功能且在哺乳动物和植物中均保守的氨基酸残基在此蛋白中被替换。依据家蚕基因组数据库信息和PLK的cDNA,家蚕PLK基因包含5个外显子和4个内含子,跨越10kb DNA序列,所有外显子/内含子交接点都遵从gt/ag剪接规则,基因的5′端启动子调控区发现有TATA-box和CAAT-box保守基序。
- 张剑韵石瑞君黄龙全
- 关键词：家蚕吡哆醛激酶CDNA克隆基因结构分析
- 家蚕磷酸吡哆醇氧化酶cDNA克隆、鉴定及基因结构分析被引量：2
- 2008年
- 【目的】了解家蚕维生素B6关键代谢酶磷酸吡哆醇氧化酶(PNPO)的基因结构。【方法】利用生物信息学原理和PCR方法,克隆出编码家蚕(Bombyx mori)PNPO的cDNA(GenBank登录号:DQ452398);采用T7启动子/T7RNA聚合酶原核表达系统对cDNA进行体外表达,并通过酶活检测进行表达产物的功能鉴定;依据家蚕基因组数据库信息和得到的cDNA,对家蚕PNPO基因结构进行分析。【结果】克隆到的cDNA含有771bp的完整可读框,编码一条分子量为29.86kD、含257个氨基酸残基的蛋白质。序列比对显示此蛋白质与人类PNPO具有51.44%的同源性,包含PNPO家族共有的保守序列,但在人和大肠杆菌PNPO中具有重要作用的几个氨基酸残基在此蛋白质中被替换。在以磷酸吡哆醇(PNP)为底物时,表达产物Pro-PNPO的酶活力约为17nmol·min-1·mg-1。家蚕PNPO基因包含5个外显子和4个内含子,跨越3.5kbDNA序列,所有外显子/内含子交接点都遵从gt/ag剪接规则,基因的5’端启动子调控区发现有TATA-box和CAAT-box保守基序。【结论】获得家蚕PNPO基因,可利用该基因在分子水平上研究家蚕的VB6代谢特征,弄清PNPO家族的特征及其在生物进化过程中的演变规律。
- 张剑韵石瑞君黄硕豪黄龙全
- 关键词：家蚕磷酸吡哆醇氧化酶CDNA克隆酶活力基因结构分析
- 家蚕磷酸吡哆醛激酶cDNA的克隆和酶活表征(英文)被引量：1
- 2007年
- 吡哆醛激酶 (EC 2.7.1.35) 在 ATP 和 Zn2+的存在下,催化吡哆醛的磷酸化反应生成磷酸吡哆醛 (PLP)。在生物体内许多酶促反应中,PLP 是一种重要的辅酶因子。家蚕和哺乳动物一样,需依赖食物中的维生素 B6前体来合成 PLP。文章描述了利用家蚕基因组数据库序列信息及使用 PCR 方法,克隆出编码家蚕吡哆醛激酶的 cDNA (GenBank 登录号:DQ452397)。克隆到的 cDNA 含有一个 894 bp 的完整可读框,编码一条分子量为 33.1 kDa,含 298 个氨基酸残基的蛋白质。序列比对显示此蛋白质序列与人类吡哆醛激酶蛋白序列具有 48.6%的同一性,包含吡哆醛激酶家族共有的特征保守序列,但其氨基酸残基数比哺乳动物和植物克隆到的吡哆醛激酶残基数均少 10 多个残基。多序列比对结果显示,吡哆醛激酶中几个有关键功能且在哺乳动物和植物中均保守的氨基酸残基在此蛋白中被替换为其他种类氨基酸残基。采用 T7 启动子和 T7 聚合酶表达系统对克隆到的 cDNA 进行了原核表达并对表达粗提产物进行了酶活检测。实验结果显示表达得到的可溶性蛋白产物占其总蛋白量为 10%,细胞粗提物具有活力为 30 nmol/min/mg 的吡哆醛激酶活性,结果证实了克隆到的 cDNA 编码家蚕中的吡哆醛激酶。
- 石瑞君张剑韵江昌俊黄龙全
- 关键词：吡哆醛激酶家蚕基因组数据库
- 家蚕茧层含胶率与茧丝品质相关性研究被引量：1
- 1989年
- 饲养39个蚕品种,对其茧层含胶率与茧丝品质指标间的相关性作了试验,并对302个蚕品种的资料进行了分析,结果表明,中系二化性品种的茧层含胶率与茧层量、茧层率、茧丝长、茧丝量间呈显著正相关,其他类型品种无显著相关;茧层含胶率与解舒率、茧丝纤度间呈一致性的负相关,比较平均含胶率:中一化四眠〈日一化四眠〈中一化三眠〈中二化四眠〈日二化四眠〈多化四眠〈欧一代四眠。
- 黄龙全
- 关键词：蚕茧茧层含胶率茧丝品质
- 环境激素对人类健康的影响及其控制
- 环境激素是继臭氧层破坏、室温效应之后又一全球性的重大环境问题。环境激素也称外因性内分泌干扰物,进入机体后可以引起种种的负面生物学效应,严重威胁人类的健康。文章介绍了环境激素的概念、种类、危害和作用机制,并就环境激素的监测...
- 黄龙全张剑韵
- 关键词：环境激素健康
- 环境激素对人类健康的影响及其控制
- 环境激素是继臭氧层破坏、室温效应之后又一全球性的重大环境问题。环境激素也称外因性内分泌干扰物,进入机体后可以引起种种的负面生物学效应,严重威胁人类的健康。文章介绍了环境激素的概念、种类、危害和作用机制,并就环境激素的监测...
- 黄龙全张剑韵
- 关键词：环境激素健康
- 文献传递
- 能量型可吸果冻功能饮料及其制备方法
- 本发明公开了一种能量型可吸果冻功能饮料的配方及其制备方法，所述可吸果冻以每100g计，由下述重量配比的原料组成：氯化钾37‑43mg；刺槐豆胶30‑34mg、结冷胶139‑161mg、黄原胶30‑34mg；麦芽糊精MD1...
- 黄龙全张剑韵宋恒波
- 文献传递
- 家蚕体内叶酸的存在形态和转换代谢被引量：1
- 2003年
- 采用高效液相色谱 (high performanceliquidchromatography ,HPLC)技术 ,探讨了家蚕体内叶酸化合物的存在形态和转换代谢途径。用添加蝶酰谷氨酸 (pteroylglutamicacid ,PteGlu)的人工合成饲料饲育 5龄幼虫 ,其体内叶酸的主要存在型 ,血淋巴为PteGlu ;血淋巴以外的组织为四氢叶酸 (H4PteGlu)。脂肪体是H4PteGlu的主要储存场所。叶酸转换代谢酶的检索分析结果也证实家蚕缺乏哺乳动物体内的 5 ,10 亚甲四氢叶酸 ( 5 ,10 CH2 H4PteGlu)→ 5 甲基四氢叶酸 ( 5 CH3 H4PteGlu)→H4PteGlu转换途径。家蚕体内叶酸代谢方式简单 ,推测主要和核酸合成系、丝氨酸
- 张剑韵黄龙全
- 关键词：家蚕合成饲料高效液相色谱叶酸代谢
- 桑蚕蛹期以昆虫激素类物质MH、JHA、CA_3处理后卵巢增重曲线比较被引量：2
- 1994年
- 昆虫雌性生殖的激素调控作用是近年来受到重视的一个研究课题.关于昆虫激素类物质对桑蚕卵巢发育的影响,国内外也多有报道.试验以桑蚕早期雌蛹和结扎雌蛹为材料,着重探讨MH、JHA和CA3三种激素类物质对卵巢发育过程的影响.现将试验结果报道如下.
- 张剑韵黄龙全
- 关键词：蚕蛹激素处理卵巢
- 家蚕5龄幼虫体内共轭酶和二氢叶酸还原酶的基本性质
- 2003年
- 共轭酶 (EC 3 4 2 2 12 )和二氢叶酸还原酶 (EC 1 5 1 3)是生物体内重要的叶酸代谢酶。以家蚕幼虫为材料分析了这两种酶的基本性质。 5龄幼虫体液共轭酶反应的最适pH为 7 8,最适温度为 5 0℃ ;反应体系中添加巯基乙醇、K+ 或Mg2 + 可显著提高酶活性 ,而对羟高汞苯磺酸、Co2 + 、Zn2 + 、Fe2 + 等对酶活性具有明显的抑制作用 ;以叶酸五谷氨酸为基质的水解产物为叶酸 ;另以叶酸三谷氨酸为底物 ,采用 33mmol/LHepse Ches缓冲液 (pH 7 8)在 37℃的反应条件下 ,求得Km 为 9 6 μmol/L。幼虫脂肪体等组织中二氢叶酸还原酶以NADPH为供氢体 ;在pH 4 5～7 5的范围内具有较强活性 ,最适反应温度 35℃ ;巯基乙醇、胍 ,以及高浓度的 1价金属离子 (K+ 、Na+ 等 )对酶具有活性化作用 ,对氯高汞苯甲酸、甲酰胺、Co2 + 等具有强烈的抑制作用 ;采用 35mmol/L柠檬酸 磷酸钠缓冲液 (pH 5 .0 ,10g/L抗坏血酸 )在 30℃的反应条件下 ,求得Km 值为 2 7μmol/L。家蚕体液可作为共轭酶的新酶源而加以利用。
- 张剑韵黄龙全
- 关键词：家蚕幼虫二氢叶酸还原酶酶学性质体液
